Name: Parche angioplastia en la aorta de rata o de la vena cava inferior (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 4 s
Description: Aprende la técnica de parche angioplastia en aorta y vena cava inferior de rata para estudiar la hiperplasia neointimal en entornos vasculares arteriales y venosos. Este modelo permite comparar respuestas biológicas.

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Este trabajo fue apoyado en parte por los Institutos Nacionales de Salud subvenciones R56-HL095498, R01-HL-095 498 (dC), R01-HL128406, el mérito de la opinión Premio I01-BX002336 del Departamento de Asuntos de Veteranos Biomedical Research Laboratory de Estados Unidos y Programa de desarrollo (AD), un Departamento de Yale de Cirugía premio Ohse (AD), una Beca de la Fundación Sarnoff Cardiovascular (JMS), ya través de los recursos y el uso de las instalaciones del Sistema de Salud de Connecticut Asuntos de Veteranos (West Haven, CT ). parches de pericardio bovino fueron generosamente proporcionadas por Lemaitre Vascular Inc. (Burlington, MA).

Se debe obtener la aprobación del Comité de Cuidado y Uso de Animales institucional apropiada, lo que indica que el protocolo sigue las directrices del comité de ética de investigación de animales de su institución. 1. Anestesia y procedimientos preoperatorios <ol><li> Anestesiar ratas Wistar macho, que pesaban alrededor de 200 g, con isoflurano vaporizado 3% y 1 L / min de oxígeno administrado en una cámara de inducción acrílico. </li><li> Confirmar una anestesia adecuada a través de una falta de reacción a un dedo del pie y de pinzamiento del rabo. Coloque la pomada en los ojos para evitar la sequedad mientras los animales están bajo anestesia. Coloque el supina cada rata en la placa de la operación de plástico y colocar una máscara de silicona para entregar vaporiza 2 - 3% de isoflurano por inhalación continua. No deje un animal sin vigilancia hasta que se haya recuperado el conocimiento suficiente para mantener decúbito esternal. </li><li> Con los guantes estériles, eliminar el vello parte ventral del abdomen utilizando un removedor de pelo. Buprenorphine, por vía subcutánea o por vía intraperitoneal, se dan con frecuencia en este punto. </li></ol> 2. Procedimientos Operativos <ol><li> venoplasty parche <ol><li> Antes de la cirugía, recortar el parche de pericardio bovino utilizando un microscissor a un tamaño de 3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm. Remojar el parche en 10 ml de solución salina esterilizada durante 5 minutos en una placa de cultivo celular. </li><li> Preparar el lugar de la incisión con un antiséptico tópico de acuerdo a su protocolo institucional y aplicar un paño quirúrgico. Use guantes e instrumentos estériles para mantener una técnica aséptica durante toda la cirugía. La anestesia local pueden inyectarse en el sitio de la incisión de la piel previsto. </li><li> El uso de un bisturí, hacer una incisión abdominal en la línea media que se extiende desde el nivel de la xifoides hasta justo por encima del pubis. </li><li> Insertar un retractor y destripar todos los intestinos de la cavidad abdominal hacia el lado derecho. Envolver las entrañas de una gasa empapada con solución salina. </li><li> Exponer la ivena cava nfrarenal (IVC). El sitio de la implantación parche es de aproximadamente 2 mm por debajo del nivel del origen de las venas renales; diseccionar la vena cava inferior gratis en este sitio. Ligar y dividir todas las venas lumbares y tributarios a este nivel usando 6-0 suturas de nylon. </li><li> Colocar dos pinzas de microcirugía través de ambos extremos proximal y distal infarenal IVC. Realizar una venotomía con una aguja de 25 G mediante la punción de la pared anterior de la vena cava inferior, y luego extenderla a alrededor de 3 mm con unas tijeras (Figura 1A). </li><li> Cierre la venotomía con el parche usando correr o 10-0 de nylon interrumpidas (Figura 1B). </li><li> Completar el cierre venoplasty. Retire la pinza distal primero en ventilar el parche y quite la pinza proximal para restaurar el flujo de sangre a la vena cava inferior. </li><li> Confirmar la hemostasia mediante la observación durante 30 s sin compresión. Devolver las entrañas a su posición natural. Cierre el abdomen con una sutura continua de acuerdo con los protocolos aprobados animales. </li></ol></li><li> arterioplastia parche <ol><li> Antes de la cirugía, recortar el parche de pericardio bovino utilizando un microscissor a un tamaño de 3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm. Remojo en una solución salina esterilizada. </li><li> Preparar el lugar de la incisión con un antiséptico tópico y aplicar un paño quirúrgico. Use guantes e instrumentos estériles para mantener una técnica aséptica durante toda la cirugía. </li><li> El uso de un bisturí, hacer una incisión abdominal en la línea media que se extiende desde el nivel de la xifoides hasta justo por encima del pubis. </li><li> Insertar un retractor y destripar todos los intestinos de la cavidad abdominal hacia el lado derecho. Envolver las entrañas de una gasa empapada con solución salina. </li><li> Exponer la aorta. El sitio de la implantación parche es de aproximadamente 2 mm por debajo del nivel del origen de las arterias renales; diseccionar la aorta gratis en este sitio. Ligar y dividir todas las arterias lumbares a este nivel usando 6-0 suturas de nylon. </li><li> Sujetar la aorta infrarrenal. Utilice una aguja de 25 G para realizar una arteriotomía por puncturing de la pared anterior de la aorta y, a continuación, extenderlo a alrededor de 3 mm con unas tijeras (Figura 1C). </li><li> Cierre la arteriotomía con el parche usando corriendo 10-0 de nylon (Figura 1D). Completar el cierre arterioplastia. Retire la pinza distal primero en ventilar el parche y quite la pinza proximal para restaurar el flujo de sangre a la aorta. </li><li> Confirmar la hemostasia mediante la observación durante 30 s sin compresión. Devolver las entrañas a su posición natural. Cierre el abdomen con una sutura continua de acuerdo con los protocolos aprobados animales. </li></ol></li></ol> 3. Procedimientos postoperatorios <ol><li> Tras el cierre del abdomen, suspender la anestesia. Aplicar cuidados post-operatorios, incluyendo la analgesia y el cuidado de las heridas, de acuerdo con las instrucciones recomendadas por el Comité de Cuidado y Uso de Animales institucional. </li><li> Para la analgesia, el uso de buprenorfina en 0,1 mg / kg por vía intramuscular no menos de cada 12 h durante 24 h siguening los procedimientos quirúrgicos. Compruebe el estado de los animales todos los días en la sala de los animales, lo que garantiza la recuperación adecuada del período peri-operatorio, así como el tratamiento adecuado del dolor post-quirúrgico. No devuelva un animal que ha sido sometido a una cirugía para la compañía de otros animales hasta que se haya recuperado por completo. </li></ol><style type="text/css">p.p1 {margin: 0.0px 0.0px 0.0px 0.0px; font: 12.0px Helvetica}
</style><style type="text/css">p.p1 {margin: 0.0px 0.0px 0.0px 0.0px; font: 12.0px Helvetic
</style>

<ol><li>Muto, A., Nishibe, T., Dardik, H., Dardik, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patches+for+carotid+artery+endarterectomy%3A+current+materials+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Patches for carotid artery endarterectomy: current materials and prospects.</a> J Vasc Surg. 50 (1), 206-213 (2009).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+usage+and+future+directions+for+the+bovine+pericardial+patch%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Current usage and future directions for the bovine pericardial patch.</a> Ann Vasc Surg. 25 (4), 561-568 (2011).</li>
<li>Biasi, G. M., Sternjakob, S., Mingazzini, P. M., Ferrari, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nine-year+experience+of+bovine+pericardium+patch+angioplasty+during+carotid+endarterectomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Nine-year experience of bovine pericardium patch angioplasty during carotid endarterectomy.</a> J Vasc Surg. 36 (2), 271-277 (2002).</li>
<li>Papakostas, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+vascu-guard+bovine+pericardium+patch+for+arteriotomy+closure+in+carotid+endarterectomy.+Early+and+long-term+results%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Use of the vascu-guard bovine pericardium patch for arteriotomy closure in carotid endarterectomy. Early and long-term results.</a> Ann Vasc Surg. 28 (5), 1213-1218 (2014).</li>
<li>Ohwada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutaraldehyde-fixed+heterologous+pericardium+for+vena+cava+grafting+following+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatogastroenterology%22%5BJournal%5D)">Glutaraldehyde-fixed heterologous pericardium for vena cava grafting following hepatectomy.</a> Hepatogastroenterology. 46 (26), 855-858 (1999).</li>
<li>Mori, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standard+hepatic+vein+reconstruction+with+patch+plasty+using+the+native+portal+vein+in+adult+living+donor+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Standard hepatic vein reconstruction with patch plasty using the native portal vein in adult living donor liver transplantation.</a> Liver Transpl. 18 (5), 602-607 (2012).</li>
<li>Bai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericardial+patch+venoplasty+heals+via+attraction+of+venous+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Pericardial patch venoplasty heals via attraction of venous progenitor cells.</a> Physiological Reports. 4 (12), (2016).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericardial+patch+angioplasty+heals+via+an+Ephrin-B2+and+CD34+positive+cell+mediated+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Pericardial patch angioplasty heals via an Ephrin-B2 and CD34 positive cell mediated mechanism.</a> PLoS One. 7 (6), 38844(2012).</li>
<li>Bai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pretreatment+of+pericardial+patches+with+antibiotics+does+not+alter+patch+healing+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Pretreatment of pericardial patches with antibiotics does not alter patch healing in vivo.</a> J Vasc Surg. 63 (4), 1063-1073 (2016).</li>
<li>Muto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eph-B4+prevents+venous+adaptive+remodeling+in+the+adult+arterial+environment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Eph-B4 prevents venous adaptive remodeling in the adult arterial environment.</a> J Exp Med. 208 (3), 561-575 (2011).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Se describe un modelo de angioplastia con parche en la rata que se puede utilizar en cualquiera de las venas o arterias, creando un parche o venoplasty arterioplastia parche, respectivamente. El uso de este modelo de parche de pericardio, demostramos la hiperplasia neointimal agresivo y estable en la rata IVC venoplasty en comparación con el arterioplastia aórtica (Figura 2) 7, 8. Varios aspectos técnicos son notable...

Los cirujanos vasculares comúnmente cerrar vasos sanguíneos con parches de pericardio, ya sea bovina o porcina, para reducir el riesgo de reestenosis 1, 2. En la cirugía arterial, pericárdico angioplastia con parche reduce la tasa de reestenosis en comparación con un cierre primario 3, 4. Venoplasty Patch también se realiza de manera similar para cerrar las venas, aunque con menos frecuencia, en comparación con los procedimientos arteriales 5, 6. Los parches suelen desarrollar hiperplasia neointimal en sus superficies luminales; sin embargo, el mecanismo de la formación neointimal sigue siendo poco clara, especialmente en la comparación de diferencias en la formación neointimal entre la arterial y entornos venosas. Anteriormente puso de manifiesto que los parches de pericardio atraen a las células progenitoras tanto en la arteriales y venosos y los ambientes que la angioplastia con parche venoso Mas unala formación de neoíntima ggressive en comparación con los parches arteriales 7, 8. En este estudio, se describe el modelo de rata de angioplastia con parche pericárdico que es común a cerrar ambas venas y las arterias y que puede ser utilizado para estudiar la formación de neoíntima; este método es un modelo de pequeños animales de una técnica quirúrgica utilizada comúnmente en pacientes humanos. El modelo de rata tiene un diámetro más grande que el modelo de ratón, lo que facilita los aspectos técnicos de la cirugía y la mejora de la curva de aprendizaje para el modelo.

<table><tbody><tr><td>parche pericárdico bovino</td><td>LeMaitre Vascular</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinza vascular</td><td>Roboz Surgical Instrument Co.</td><td>RS-5424</td><td></td></tr><tr><td>Pinza de aplicación de pinzas</td><td>Roboz Surgical Instrument Co</td><td>RS-5410</td><td></td></tr><tr><td>10-0 Sutura de Prolene</td><td>Arosurgical Co.</td><td>T05A10N10-13</td><td></td></tr></tbody></table>

parche angioplastia en la aorta de rata o de la vena cava inferior

Patch Angioplasty in the Rat Aorta or Inferior Vena Cava

parches de pericardio se utilizan comúnmente en la cirugía vascular para cerrar vasos. Para facilitar estudios de la hiperplasia neointimal que se forma en el parche, hemos desarrollado un modelo de rata de angioplastia con parche que se puede utilizar ya sea en una vena o una arteria, la creación de un venoplasty parche o un arterioplastia parche, respectivamente. Se discuten los aspectos técnicos de este modelo. La IVC o aorta infra-renal se diseccionan y a continuación, sujetan proximal y distal. A venotomía 3 mm o arteriotomía se realiza en la vena cava inferior infrarrenal o aorta de 6-8 semanas de edad, ratas Wistar. Un parche de pericardio bovino (3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm) se utiliza entonces para cerrar el sitio usando una sutura de nylon 10-0. En comparación con los parches arteriales, venosos parches muestran un aumento de espesor neointimal en día postoperatorio 7. Este nuevo modelo de angioplastia con parche pericárdico puede ser utilizado para examinar la hiperplasia neointimal en biomateriales vasculares, así como para comparar las diferencias entre los arterial y venosaambientes.

Después de la angioplastia con parche, no hubo trombosis, ya sea en la venosa (n = 42) o arterial grupos de revisión (n = 24). La supervivencia a los 7 días fue del 100% en ambos grupos, ya sea con un parche venoso o arterial. Los parches se recogieron el día 7 y se tiñeron con hematoxilina y eosina, y el espesor neointimal se comparó tal como se describe previamente 7. Debido a la diferencia morfológica distinta en...

Hemos establecido un modelo de angioplastia pericárdica con parche que se puede utilizar tanto en venas como en arterias de pequeño diámetro. Este modelo se puede utilizar para comparar la formación de hiperplasia neointimal venosa y arterial.

Parche angioplastia en la aorta de rata o de la vena cava inferior

Pericardial patches are commonly used in vascular surgery to close vessels. To facilitate studies of the neointimal hyperplasia that forms on the patch, ...

El objetivo general de este procedimiento es implantar biomateriales vasculares en el entorno arterial o venoso. Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre las diferencias en la hiperplasia neointimal que se forma en los biomateriales colocados en entornos arteriales o venosos. La principal ventaja de esta técnica es que es fácil de aprender y requiere solo un breve tiempo para su realización.Tras confirmar la ausencia de respuesta al pellizco en los dedos del pie, administre buprenorfina por vía IP como analgesia preventiva. Retire el vello del abdomen ventral del animal. A continuación, use tijeras microquirúrgicas para recortar un parche de pericardio bovino a un tamaño de 3 x 1,5 x 0,6 milímetros, y sumerja el parche en 10 mililitros de solución salina esterilizada en una placa de cultivo celular durante cinco minutos.Mientras el parche se empapa, desinfecte el sitio de incisión con un antiséptico tópico y cubra al animal con un campo quirúrgico. Bajo un microscopio estereoscópico, use un bisturí para realizar una incisión abdominal media que se extienda desde el apéndice xifoides hasta justo por encima del pubis, e inserte un retractor en la incisión. Una vez a

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