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DOI: 10.3791/55403-v
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La pérdida desigual de medio de placas de microtitulación afecta a la reproducibilidad de la formación de esferoides de tumor multicelulares uniforme. La mejora de las condiciones de cultivo para reducir la pérdida significativa medio mejorará la reproducibilidad de la formación de esferoides y los resultados de los ensayos basados en esferoides utilizando la técnica de los líquidos de recubrimiento.
El objetivo general de este procedimiento es mejorar la escalabilidad y la reproducibilidad de la formación uniforme de esferoides utilizando una técnica de superposición líquida en placas de 384 pocillos. La principal ventaja de esta técnica es que reduce el refuncionamiento excesivo del medio de múltiples placas y, por lo tanto, mejora la reproducibilidad de la formación de esferoides. Hemos desarrollado y validado el método de cultivo de esferoides 3D para pruebas de cribado de artrópodos en nuestro laboratorio y nuestro estudio ha consistido en evaluar cuál es el efecto borde en las placas de los cultivos multicelulares.
Hoy voy a demostrar el procedimiento junto con Sona, un póster del laboratorio. Comience este procedimiento pesando cero coma siete cinco gramos de agarosa de bajo punto de fusión y agréguela a 100 mililitros de mccoy's 5a medium con o sin rojo fenol y sin suero. Calienta la solución en un microondas y revuélvelo cada uno o dos minutos para disolver completamente la agarosa.
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