25 de mayo de 2017
La degeneración del disco intervertebral es un factor importante en el dolor de espalda y una de las principales causas de discapacidad en todo el mundo. Existen numerosos modelos animales de degeneración de los discos intervertebrales. Demostramos un modelo ovino de degeneración de disco intervertebral, utilizando una broca, que logra una lesión de disco consistente y nivel reproducible de degeneración de disco.
El objetivo general de este enfoque retroperitoneal lateral, el método de lesión del disco intervertebral con broca es crear un modelo ovino seguro, consistente y reproducible de discos intervertebrales degenerativos. Este modelo de degeneración del disco intervertebral lumbar ovino puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la investigación traslacional de la columna vertebral al proporcionar otro método para investigar la trayectoria o la fisiología de la degeneración del disco y la investigación potencial de las terapias regenerativas. La principal ventaja de este enfoque es que permite una lesión quirúrgica consistente a través de un enfoque quirúrgico seguro en un modelo animal apropiado.
Después de anestesiar e intubar una oveja y preparar el quirófano de acuerdo con el protocolo de texto, coloque al animal en la mesa de operaciones en la posición lateral derecha. Utilizando maquinillas electrónicas, afeitar la región definida superiormente por las costillas inferiores, inferiormente por el hueso ilíaco, medialmente por las apófisis transversas lumbares contralaterales y aproximadamente 10 centímetros laterales a las apófisis transversales lumbares ipsilaterales. Palpar la cresta ilíaca, las apófisis transversas lumbares y cruzar un ángulo vertebral para ver los puntos de referencia de este sitio de incisión quirúrgica.
Luego, use un bolígrafo estéril para marcar estos puntos de referencia. A continuación, con un lavado antiséptico con clorhexidina y alcohol yodado, desinfectar el abdomen lateral. A continuación, coloque un paño cuadrado fenestrado estéril sobre el sitio quirúrgico y un paño cuadrado estéril grande sobre la mesa superior, seguido de los instrumentos estériles.
Bajo lupa quirúrgica y un faro, inyecte anestésico local y luego use una hoja de bisturí de 22 unida a un mango de cuatro bisturíes para hacer una incisión longitudinal paralela y un centímetro anterior a una o dos apófisis transversas lumbares por encima y por debajo de los niveles de interés del disco intervertebral. Mediante la diatermia monopolar, se divide el tejido subcutáneo subyacente y la cara lateral de la musculatura de la pared abdominal. Dirigiendo la disección hacia las puntas de las apófisis transversas lumbares, por encima y por debajo de los discos intervertebrales de interés.
A continuación, divida la fascia toracolumbar longitudinalmente en su unión a las apófisis transversas. Visualice y preserve el cuadrado lumbar subyacente, los músculos sóleos y los haces neurovasculares transversales. Con la diatermia, mantenga la hemostasia durante todo el procedimiento.
Deslizar los dedos entre el plano del peritoneo y la musculatura de la pared abdominal posterior a los niveles del disco intervertebral expuesto para realizar una disección digital roma. Ahora, usando diva retractor, retraiga los músculos cuadrado lumbar y sóleo lateralmente para exponer aún más los discos intervertebrales. Luego, palpa los cuerpos intervertebrales cóncavos y los discos intervertebrales convexos.
Coloque los retractores inmediatamente sobre los discos y asegúrese de que los vasos lumbares no se dañen. Luego, utilizando la lupa quirúrgica con el faro, identifique los vasos lumbares que se encuentran aproximadamente un centímetro caudal a la placa terminal inferior. Después de realizar una radiografía lateral intraoperatoria para confirmar el nivel del disco, en función de los niveles de disco deseados, exponer los discos intervertebrales separando las estructuras circundantes.
Para los niveles L tres, cuatro y superiores, use la disección roma digital para barrer las inserciones musculares sobre los discos. Para los niveles L cuatro, cinco e inferiores, use tijeras diatérmicas bipolares para dividir bruscamente las inserciones musculares del tendón más gruesas sobre el disco. Defina el punto de lesión de la broca observando las extremidades laterales e interiores izquierdas en el disco intervertebral.
El nivel del disco debe confirmarse con radiografías laterales antes de lesionarse la broca. Coloque una broca de punta de clavo en el taladro eléctrico. Asegúrese de que el diámetro de la broca sea ligeramente menor que la altura del disco intervertebral.
Por ejemplo, 3,5 milímetros para discos intervertebrales lumbares en ovejas de 60 a 70 kilogramos. Aplique un tope de broca para proporcionar una longitud de broca sin protección de aproximadamente la mitad del diámetro del disco intervertebral lumbar. Por ejemplo, 12 milímetros para los discos intervertebrales lumbares en ovejas de 60 a 70 kilogramos.
A continuación, aplique la broca al punto de entrada y diríjala en la trayectoria ligeramente craneal al centro del disco intervertebral, lo que minimizará el riesgo de lesiones en la placa terminal. Con el taladro a baja potencia, avance lentamente la broca en el disco intervertebral durante un segundo. Si se encuentra una resistencia excesiva, ajuste la trayectoria de forma ligeramente craneal o caudal.
Una vez lograda la hemostasia, se utiliza la solución de Ringer para irrigar la herida. A continuación, realice el cierre en capas, preferiblemente utilizando suturas trenzadas sintéticas absorbibles 2-0 a los tejidos laterales de la pared abdominal y sutura subcuticular sintética absorbible continua 3-0 sin teñir a la piel. Aquí se muestra un corte preoperatorio del plano sagital de una resonancia magnética 3T de la mitad del disco intervertebral lumbosacro ovino sin evidencia de degeneración significativa del disco intervertebral preoperatorio.
Esta radiografía lateral intraoperatoria confirma el nivel del disco intervertebral y permite calcular el índice de altura del disco. La apariencia morfológica macroscópica presentada aquí demuestra el tracto de lesión de la broca que penetra en el anillo fibroso y se extiende hacia el núcleo pulposo. La lesión también es evidente en esta resonancia magnética de 9.4T.
Al intentar este enfoque, es importante dirigir la broca cranealmente y avanzar la broca lentamente para minimizar el riesgo de lesiones en la placa final. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo producir lesiones por brocas en el modelo ovino a través de un abordaje retroperitoneal lateral. No olvide que trabajar con bisturíes y cauterio puede ser peligroso.
Se debe seguir el equipo de protección personal y las precauciones de seguridad adecuadas en todo momento. Es importante mantener la esterilidad quirúrgica.
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Este estudio presenta un modelo ovino novedoso para la degeneración del disco intervertebral utilizando una técnica con broca. Este modelo tiene como objetivo facilitar la investigación sobre la fisiopatología de la degeneración del disco y las posibles terapias regenerativas.
El establecimiento de modelos preclínicos confiables es fundamental para reducir los riesgos en la validación de dianas terapéuticas en el área de la terapéutica músculo-esquelética. Este modelo de degeneración del disco ovino proporciona un sistema reproducible para evaluar mecanismos fisiopatológicos e intervenciones terapéuticas. Su relevancia traslacional apoya la prueba de hipótesis en etapas tempranas y la priorización de carteras en investigación y desarrollo relacionados con la columna vertebral.
El modelo se integra en los flujos de trabajo de descubrimiento al proporcionar un sistema biológico validado para la evaluación de objetivos basada en hipótesis y el cribado mecanicista.