Aplicación y metodología de la técnica de RMN no destructivos ¹⁹F dominio del tiempo para medir el contenido en medicamentos que contienen flúor

El objetivo general de esta metodología de resonancia magnética nuclear de dominio del tiempo de flúor 19 de bajo campo es determinar el contenido promedio de medicamentos florinados en productos farmacéuticos formulados. Se trata de una técnica no destructiva para el desarrollo y la fabricación de fármacos en la industria farmacéutica. Este método puede ayudar a responder preguntas clave dentro del campo farmacéutico, en el proceso de formulación de medicamentos y productos farmacéuticos.

Sugerir el contenido promedio de medicamentos en tabletas y cápsulas. La principal ventaja de esta técnica es que no es destructiva y es más rápida que los métodos convencionales como la cromatografía líquida de alta resolución a la hora de medir el contenido medio de fármacos en los productos farmacéuticos. Pesar las muestras para su calibración en los tubos de RMN apropiados hasta la línea de marcado, o alrededor de 30 milímetros de altura.

También pese las muestras de productos farmacéuticos formulados en los tubos de RMN apropiados hasta la línea de marcado o alrededor de 30 milímetros de altura. A continuación, coloque la muestra estándar de teflón dentro de un tubo de RMN de 25 o 26 milímetros. Coloque el tubo de RMN en la sonda dentro del imán.

Deje que el tubo se equilibre durante cinco a 10 minutos, antes de afinar el instrumento a f 19. Seleccione auto o uno, en el menú de comandos del software RINMR. Repita la medición al menos tres veces.

Y tome el último valor del parámetro o uno. Navegue hasta el menú de comandos en el software RINMR y seleccione auto p 90, para calibrar el pulso de 90 grados para f 19, con la muestra de teflón estándar, utilizando la secuencia de calibración automatizada estándar disponible en el instrumento. Para una mejor relación señal/ruido, coloque la muestra API, preparada en el tubo de RMN de 25 milímetros, dentro de la sonda f 19, instalada en el imán y deje que se equilibre durante al menos 10 minutos.

Mida el tiempo de relajación t un siguiendo las instrucciones del manual del instrumento, para cada muestra de API, utilizando el experimento estándar para la recuperación de inversión, del software RINMR. Para medir el tiempo de relajación, navegue hasta la secuencia y seleccione la carga en el software RINMR. A continuación, seleccione la secuencia de pulsos de recuperación inversa y haga clic en abrir.

Compruebe que los parámetros básicos tienen los valores correctos haciendo clic en la pestaña a. En el menú de herramientas, seleccione scripts y aparecerá una ventana. A continuación, seleccione la pestaña para t one y haga clic en la flecha verde.

Aparecerá otra ventana. Seleccione el archivo de lista de retrasos con los retrasos adecuados. O cree la lista después de hacer clic en abrir.

Una vez que la lista de retrasos sea satisfactoria, haga clic en Aceptar. Una ventana mostrará un aviso para la creación de un archivo para todos los espectros que se recopilarán, con el fin de calcular el valor t uno. Haga clic en guardar para que el instrumento comience a adquirir los datos.

Y guarde automáticamente los archivos en la carpeta seleccionada. Aparecerá una ventana, con la curva de relajación t uno y la constante de tiempo o el valor t uno. Para construir la curva de calibración, primero coloque una muestra de calibración en el imán, para un API en particular.

Equilibre las muestras durante un mínimo de cinco minutos para los tubos más pequeños y 10 minutos para los tubos más grandes. Adquiera un experimento de decaimiento por inducción libre o sólido con los parámetros adecuados, siguiendo las instrucciones del manual del instrumento. En la pestaña de secuencia del software RINMR, cargue la secuencia de pulsos seleccionando la secuencia y haciendo clic en abrir.

Compruebe que los parámetros básicos tengan los valores correctos. Mida todas las muestras, preparadas para cada API, después de que se equilibren a la temperatura del imán, durante cinco a 10 minutos, para generar las curvas de calibración para cada muestra de API. Guarde los datos en una carpeta, dando un nombre distinto a cada ejecución experimental.

Calcule el porcentaje de peso de las muestras, en función de la cantidad en cada tubo. Teniendo en cuenta la pureza de la muestra de API, en el tubo más grande. Coloque las muestras de productos farmacéuticos formulados ya preparadas en el imán para medirlas una a la vez.

Equilibre las muestras cinco minutos para los tubos de RMN pequeños o 10 minutos para las muestras en los tubos de RMN más grandes. Adquirir el mismo experimento de RMN, con las mismas condiciones, que para las muestras calibradas para cada API. Abra el software de calibración de instancias reservadas.

Recupere todos los datos sólidos haciendo clic en el símbolo del clip para abrir el FID o los archivos sólidos de una API en particular y sus muestras de productos farmacéuticos como tabletas. Para todas las muestras medidas, introduzca los porcentajes de peso en la columna de concentración y los pesos en la columna de masa. Seleccione la región adecuada, utilizando el método de promedio para construir la curva de calibración.

Guarde la curva de calibración. A continuación, seleccione la región del experimento sólido de cinco a 300 puntos para crear las curvas de calibración. Los resultados de la calibración, utilizando el método promedio, aparecen en forma de tabla.

Como segundo método de calibración, utilice el método Fit en el software de calibración RI para construir la curva de calibración con la misma región seleccionada. Guarde la curva de calibración. Los resultados de la calibración, utilizando el método Fit, aparecen en forma de tabla.

Como tercer método de calibración, abra el software Mnova. Arrastre todos los datos sólidos de una API en particular. E introduzca los porcentajes de peso de las muestras.

En el menú avanzado, seleccione dominio de tiempo y, a continuación, cuantificación. Aparecerá una ventana. Haga clic en el signo más azul para seleccionar el área de integración.

A continuación, integre la región adecuada utilizando el modo de magnitud para construir la curva de calibración. Guarde la curva de calibración. En la tabla, introduzca los porcentajes de fármacos por muestra en la columna de concentración solo para los estándares.

Y los pesos de todas las muestras debajo de la columna de masa. Las muestras de calibración deben estar en rojo. Asegúrese de que la función de la señal sea y igual a s sobre m, para normalizar la señal a masa.

Para mayor reproducibilidad y repetibilidad, mida cada muestra tres veces, en días diferentes y cree una curva de calibración en ambos paquetes de software. Asegúrese de guardar los archivos de la curva de calibración. Lea los datos de RMN de las muestras medidas e ingrese sus pesos para determinar el porcentaje en peso de API fluorado en las tabletas o cápsulas formuladas.

Utilice las curvas de calibración obtenidas de cada uno de los tres métodos de calibración diferentes. Finalmente, calcule la cantidad de medicamento fluorado por tableta o cápsula como el valor promedio, utilizando la ecuación que se encuentra en el protocolo de texto. Y comparar con los valores calculados por el software, en función de las curvas de calibración.

Aquí se muestran los resultados representativos de la curva de calibración de Cinacalcet HCL, calculados como bases libres y mediciones por triplicado. Uso de software de calibración RI en el modo promedio. El uso del software de calibración RI en el modo Fit da como resultado una curva de calibración similar de Cinacalcet HCL en mediciones triplicadas.

La curva de calibración de Cinacalcet HCL en mediciones por triplicado, utilizando el método de área del software Mnova en el modo de magnitud, arroja resultados comparables. A continuación se muestra una tabla de resultados de las dosis calculadas de Cinacalcet base libre en comprimidos comerciales. Con sus estadísticas mediante el software de calibración RI utilizando los métodos de promedio y ajuste, así como el software Mnova.

Una vez dominada, esta técnica se puede hacer en 15 a 20 minutos. Por ejemplo, las muestras de calibración pueden tardar una hora. Y solo hay que hacerlo una vez si se realiza correctamente.

Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo cuantificar el contenido promedio de medicamentos fluorados en productos farmacéuticos formulados, mediante la técnica no destructiva de RMN de flúor 19 TD de bajo campo. No olvide que trabajar con medicamentos e instrumentos de RMN puede ser extremadamente peligroso y siempre se deben tomar precauciones como el equipo de protección personal y la ausencia de objetos metálicos cerca del imán al realizar este procedimiento.