Name: Repetidos de muestras de sangre de vena de la cola de las ratas no anestesiados con un sistema de colección de sangre vacío (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Aprenda a obtener muestras repetidas de sangre de la vena de la cola en ratas no anestesiadas utilizando un sistema de vacío. Este método eficiente reduce la exposición directa a la sangre y minimiza el estrés en los animales.

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Los autores no tienen ninguna agradecimientos para hacer.

Todos los procedimientos fueron aprobados por el Consejo de Universidad médica de Tongji en el Animal cuidado Comité de Huazhong University of Science y tecnología (Wuhan, China). El manuscrito fue preparado según llegan (investigación Animal: presentación de informes de experimentos In Vivo ) directrices6.
1. cría
<ol><li>Utilizar ratas Sprague-Dawley (SD) (n = 20, 10 hombres, 8 semanas de edad, pesa 261 a 291 g, significan = 272.85 ±9.07 g) de la Universidad Experimental animales centro de Huazhong de la ciencia y la tecnología y mantener ratas según la guía para el cuidado y uso de Animales de laboratorio publicados por nosotros Instituto Nacional de salud (NIH publicación No.85-23, revisada en 1996)</li>
	<li>Casa bajo condiciones estándar con libre acceso a alimentos y agua potable. Manten a las ratas en jaulas de2 530 cm con madera-afeitado ropa de cama. Casa de dos ratas en cada jaula. Mantener jaulas todo abierto para el ambiente (no micro-aislamiento o jaulas ventiladas)</li>
	<li>Asegúrese de que el personal que participa en el protocolo experimental manejar regularmente las ratas.</li>
	<li>Mantener la temperatura entre 21 ° C y 23 ° C. Dar índices de una dieta normal de sal (0.3% NaCl) durante todo el estudio.</li>
</ol>2. procedimiento de recogida de sangre
Nota: El sistema de colección de sangre vacío consiste en una aguja de doble punta [22 G (0,7 x 25 mm)], un soporte de plástico y una serie de tubos de vacío (2 mL) con tapones de goma (figura 1).
<ol><li>Colocar la rata en un soporte plástico de retención y lavar la cola con agua tibia (20-30 ° C) para eliminar la suciedad visible o las heces. Mientras un asistente sostiene la cola en una posición extendida, limpie la cola con etanol al 70% y limpiar con una gasa para aclarar la vena.</li>
	<li>Inserte la punta de la aguja de 22 G mariposa en una de las venas laterales de la cola (alrededor de 5 mm) en una posición aproximadamente 2-3 cm de la punta de la cola en ángulo de aproximadamente 20 ° (figura 2). Recoja la sangre en el tubo de la colección vacío insertando el extremo de la goma de la aguja de la mariposa en el tubo de la colección de la sangre del vacío (figura 3). Nota: El volumen de sangre recogida máxima es 1,2 mL7.</li>
	<li>Después de la recolección de sangre, retire la aguja y suavemente aplique presión en el sitio de punción con una gasa por 15-30 s detener el flujo de sangre. Luego, suelte la rata del soporte de retención plástico y retomar su jaula de la rata.</li>
	<li>Utilizar tubos que contienen EDTA como anticoagulante para recolectar plasma de sangre. Invierta suavemente el tubo varias veces para mezclar el anticoagulante en la sangre y coloque las muestras en hielo vertical.</li>
	<li>Centrifugar los tubos de colección de muestras de sangre en una centrífuga refrigerada a 2.000 x g por 10 min separar el suero o plasma.</li>
	<li>Extraer el plasma/suero, teniendo cuidado de no para molestar a las capas de la célula de sangre roja y blanca. Para recoger el suero de la sangre, se pueden utilizar tubos sin anticoagulante. Ambos tipos de muestra pueden utilizar inmediatamente o almacenadas a-80 ° C por hasta un año. Nota: Colección de sangre exitosa se definió como obtener 1,2 mL de sangre cada vez. Tiempo máximo de punción fue establecido en tres ensayos, si el volumen de sangre total fue inferior a 1,2 mL después de la tercera punción, se definió como una colección de sangre. La duración del muestreo se inicia desde la punción de la vena de la cola a la remoción de la aguja de la mariposa después de la recolección de sangre.</li>
	<li>
Recoger la sangre dos veces en dos semanas7.
	<ol>
<li>Para comprobar y verificar la viabilidad de este método, tren de dos estudiantes de medicina (principiantes) por 2 h antes de realizar este protocolo de extracción de sangre. Utilizar veinte ratas y extraer la sangre de 10 ratas por compañeros experimentados 2 (grupo experimental) y de 10 ratas por los estudiantes de medicina 2 (grupo para principiantes).</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. estadístico análisis
<ol><li>Expresar los datos como un valor medio ± desviación estándar y análisis con SPSS estadística 17. Un valor α de 0.05 fue elegido, por lo tanto p < 0.05 se consideró estadísticamente significativo.</li>
</ol>

<ol><li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessels+of+the+rat+tail%3A+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li>
<li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WHO+Guidelines+on+Drawing+Blood%3A+Best+Practices+in+Phlebotomy+WHO+Guidelines+Approved+by+the+Guidelines+Review+Committee%22">WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee</a>. , (2010).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+device+for+collecting+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li>
<li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry%2C+haematology+and+practical+usage+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Feline+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li>
<li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Assoc+Thai%22%5BJournal%5D)">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li>
<li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Acad+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar

El actual informe describe un método de colección de sangre fácil de aprender en ratas. Nuestros resultados mostraron que este método es viable para recoger repetidamente un volumen grande de sangre de las ratas. Además, este método podría ser dominado fácilmente con una curva de aprendizaje a corto plazo. Este procedimiento se puede realizar en las ratas no anestesiados y sólo produce mínimo estrés a los animales.
Sangre se puede recoger de ratas en varios lugares. La vena de la cola es una ubicación superior para toma de muestras de sangre4. Sin embargo, no siempre es fácil obtener suficiente volumen de sangre de la vena de la cola de flujo de sangre delgada y baja de las ratas. El sistema de colección de sangre vacío generalmente se utiliza para recoger muestras de sangre de pacientes en la práctica clínica diaria. Este sistema de colección de sangre vacío se ha utilizado en pacientes y animales de investigación por un tiempo8,9,10. Este sistema consiste en un tubo de colección de sangre vacío con aguja de pared y mariposa de tubo interior recubierto de silicona. Se basa en el principio de presión negativa del vacío y permite la elaboración continua de sangre sin el riesgo de la recogida de sangre, que también reduce la posibilidad de contaminación y hemólisis11. El volumen de muestra de sangre en el catéter es de unos 0,3 mL. Después de retirar la aguja de la vena de la cola, fluirá a la sangre en el catéter en el tubo colector de vacío por el vacío. Este método también es aplicable para la recogida de sangre de ratas que pesen menos de 100 g con el uso de una aguja de punción más pequeños.
Este método de colección de sangre tiene varias ventajas. Este procedimiento sólo provoca lesiones mínimas a las ratas y de muestras de sangre se pueden realizar sin el uso de anestésicos, así se puede evitar la influencia de la respuesta de estrés y anestésicos en la muestra de sangre. Nuestras observaciones demostraron que las ratas estaban en silenciosa en el soporte plástico de restricción durante el procedimiento y no había muertes durante estos experimentos. En segundo lugar, repetida de muestras de sangre cada uno o dos días es posible, que permite el muestreo frecuente de la sangre con un volumen adecuado para diversos fines de investigación. Por último, este método es fácil de aprender y domina fácilmente por los principiantes después de un período de aprendizaje corto (2 h), según lo indicado por las tasas de éxito similares y los tiempos de la punción entre los grupos experimentales y principiante en este informe. En un informe anterior, Lee et al demostraron un método similar de muestras de sangre de la vena lateral de la cola de la rata4. Nuestro método es más simple que el reportado por Lee et al. 4 en que directamente insertamos de la aguja de punción en la vena de la cola y el otro extremo del tubo está conectado directamente con el tubo de vacío para la recolección de la sangre, sin el uso de una jeringa extra y aspiración manual de la sangre y sin la necesidad de ' leche Ing' la vena para facilitar el flujo de sangre. Recolección de sangre con este sistema cerrado reduce el riesgo de contaminación de la sangre. Uso del soporte de retención plástico también reduce el estrés en la rata y facilita la fijación de la cola.
Los siguientes dos pasos son fundamentales para la aplicación exitosa de este método. 1) extender la cola y evitar el movimiento de la cola; 2) suavemente punción en la vena en un ángulo de 20 º para evitar la punción en la vena y mantener la aguja de punción en la vena.
En conclusión, el método de colección de sangre vacío adoptado en ratas es segura, factible y fácil de practicar. Este método permite frecuentes muestras de sangre con un volumen adecuado de sangre Obtenido de ratas no anestesiados.

La muestra de sangre de las ratas es necesaria para una gran variedad de estudios experimentales. Técnicas para recolección de sangre de la rata, como punción del corazón, del plexo orbital retro, vena yugular, vena safena, vasos de cola, la arteria carótida, aorta abdominal y vena cava. Mayoría de las técnicas (excepto la vena safena y punción de vasos sanguíneos de la cola) requiere anestesia1,2. Rutinariamente se pinchan las venas de la cola de rata para tomar muestras de sangre y de la inyección vascular. Después de tratar la cola con agua caliente, los vasos sanguíneos son dilatados y adecuado para la manipulación, incluso cuando las ratas son anestesiados3.
A pesar del desarrollo de nuevas y mejores técnicas para obtener muestras de sangre en el laboratorio pequeños animales2, no siempre es fácil obtener suficiente sangre al muestreo de pequeños animales. La vena de la cola de las ratas es una excelente ubicación para el muestreo de sangre4. Sin embargo, la vena de la cola es delgada, así es a veces difícil de pinchar y tomaría un largo tiempo para conseguir suficiente sangre debido a la reducción del flujo sanguíneo. Colección de la sangre a través de un sistema de tubo de aspiración es un método típico en la práctica clínica diaria. Este sistema cerrado para recoger la sangre reduce el riesgo de exposición directa a sangre y ha hecho más fácil tomar muestras múltiples de una sola venopunción5. El actual informe describe un método de tomar muestras de sangre de la vena de cola simple en ratas no anestesiados mediante el sistema de tubo de aspiración. Este método es fácil de dominar y puede utilizarse para obtener un gran volumen de sangre repetidamente en las ratas.

<table><tbody><tr><td>una aguja de doble punta</td><td>Shanghai Kang Nong instrumento médico co., LTD, China</td><td>22G &nbsp;</td><td>(0.7 veces; 25mm)</td></tr> <tr><td>tubos de vacío</td><td>Wuhan Zhi Yuan, ciencia médica y tecnología co., LTD, China</td> 2 <td>ml</td><td></td></tr><tr><td>rata que restringe el soporte&nbsp;</td><td>Shanghai Kang Nong instrumento médico co., LTD, China</td><td>250g rat hoder modelo</td><td></td></tr> dieta <tr><td>de sal normal para ratas Las ratas</td><td></td><td></td><td>recibieron una dieta de sal normal (0,3% NaCl) durante todo el estudio</td></tr><tr><td>Software SPSS para análisis estadístico</td><td>SPSS Inc,&nbsp; Chicago; Estados Unidos &nbsp;</td><td>Versión 17.0.&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

repetidos de muestras de sangre de vena de la cola de las ratas no anestesiados con un sistema de colección de sangre vacío

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Sangre se puede recoger de ratas en un número de localizaciones de muestreo. Por ejemplo, la vena de la cola es una ubicación superior para tomar muestras de sangre. Sin embargo, la vena de la cola es delgada por lo que a veces es difícil de pinchar. Además, la vena de la cola tiene reducción del flujo sanguíneo y requiere un tiempo de muestreo largo para obtener suficiente sangre. El actual informe describe un método de muestreo de sangre simple, el método de recogida de la sangre del vacío, que generalmente se utiliza para obtener muestras de sangre de los pacientes, que aquí se utiliza para las ratas no anestesiados. La punta de la aguja de 22 G mariposa fue insertada en una de las venas laterales de la cola aproximadamente 2-3 cm de la punta de la cola en un ángulo de aproximadamente 20° y la sangre fue recogido en el tubo de la colección vacío insertando el extremo de la goma de la aguja de la mariposa en el va tubo de colección de sangre cuum. Los resultados experimentales muestran que la tasa de éxito fue 95% en el grupo experimental y el 90% en el grupo de principiantes. La tasa de éxito y tiempos de punción fueron similares entre los dos grupos. La duración del muestreo fue significativamente menor en el grupo experimental en comparación con el grupo de principiantes. En conclusión, este método de colección de sangre vacío para muestreo secuencial de la sangre de la vena de la cola de no - anestesiadas ratas es factible y fácil de aprender, que podría servir como una alternativa fiable al otro convencionalmente utiliza técnicas de muestreo de sangre para ratas.

Duración del muestreo, masa corporal y volumen de la colección de la sangre de los dos grupos Se extrajo sangre de 10 ratas (5 varones) dos veces dentro de dos semanas en cada grupo. La masa corporal promedio en ambos grupos fue similar (272,00 g ±9.66 y g ±8.87 273.70). Duración de muestreo fue significativamente menor en el grupo experimental en comparación con el grupo de principiante (2,77 ±0.53 min vs 3.28 ±0.83 min, p < 0.05) (tabla 1).
Éxito la tarifa y de la puntura veces de dos grupos La tasa de éxito fue 95% (19/20) en el grupo experimental y el 90% (18/20) en el grupo de principiante (p > 0.05). Tiempos de punción no fueron significativamente diferentes entre los dos grupos (1.50 min ±0.61 vs 1.85 ±0.75 min, p > 0.05) (tabla 2). Estos resultados indican que este método es fácil de aprender, y la técnica podría ser dominada después de un entrenamiento de 2 h.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> Figura 1 : tubo de colección de sangre vacío 2 mL (izquierda), aguja de la mariposa de 22 G (centro), el soporte de retención plástico (derecha). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> Figura 2 : Punta de la aguja fue insertada en la vena lateral de la cola (alrededor de 5 mm) en la posición de la punta de la cola en ángulo de aproximadamente 20 ° aproximadamente 2-3 cm. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> Figura 3 : Venopunción exitosa. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">Grupo experimental</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">Grupo principiante</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>Género</td>
			<td>Peso (g)</td>
			<td>Volumen de recogida de sangre (mL)</td>
			<td>duración del muestreo (min)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Género</td>
			<td>Peso (g)</td>
			<td>Volumen de recogida de sangre (mL)</td>
			<td>duración del muestreo (min)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,73</td>
			<td></td>
			<td>B1-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,73</td>
			<td></td>
			<td>B3-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.88</td>
			<td></td>
			<td>B3-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2,41</td>
			<td></td>
			<td>B4-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B4-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.61</td>
			<td></td>
			<td>B5-1</td>
			<td>hombre</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5-2</td>
			<td>hombre</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.33</td>
			<td></td>
			<td>B6-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>274</td>
			<td>0,9</td>
			<td>4.87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B6-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.82</td>
			<td></td>
			<td>B7-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.05</td>
			<td></td>
			<td>B8-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B9-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.82</td>
			<td></td>
			<td>B10-1</td>
			<td>mujer</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.25</td>
			<td></td>
			<td>B10-2</td>
			<td>mujer</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>Promedio</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2.77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3.28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">En-1: número de serie de ratas en el grupo experimental de la primera colección de la sangre.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">En-2: número de serie de ratas en el grupo experimental para la segunda colecta de sangre.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">BN-1: número de serie de ratas en el grupo de principiantes para la primera colección de la sangre.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">BN-2: número de serie de ratas en el grupo de principiantes para la segunda colecta de sangre.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabla 1: Resultados de sangre recogidos en el grupo experimental y el grupo de principiantes.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>Tiempos de recogida de sangre</td>
			<td>Tiempos promedio de punción</td>
			<td>Una punción de tiempo</td>
			<td>Pinchar dos veces</td>
			<td>Tres veces de la puntura</td>
			<td>No se pudo</td>
			<td>Tasa de éxito</td>
		</tr>
<tr>
<td>Grupo experimental</td>
			<td>20</td>
			<td>±0.61 1.50</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>95%</td>
		</tr>
<tr>
<td>Grupo principiante</td>
			<td>20</td>
			<td>±0.75 1.85</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Una punción de tiempo: número de ratas con la colección de sangre exitosa después de la primera punción</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Dos veces la punción: número de ratas con la colección de sangre exitosa después de la segunda punción</td>
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			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">Tres veces la punción: número de ratas con la colección de sangre exitosa después de la tercera punción</td>
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		</tr>
<tr>
<td colspan="5">Error: número de ratas con no recolección de la sangre después de la tercera punción</td>
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		</tr>
</tbody></table>Tabla 2: Comparación de los tiempos de punción y las tasas de éxito del grupo experimental y el grupo de principiantes.

Aquí, describimos un método de tomar muestras de sangre de la vena de cola simple en ratas no anestesiados mediante un sistema de tubo de aspiración. Este método reduce el riesgo de exposición directa a sangre y simplifica la toma de muestras múltiples de una sola venopunción.

Repetidos de muestras de sangre de vena de la cola de las ratas no anestesiados con un sistema de colección de sangre vacío

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

El presente informe describe el método de muestreo de sangre mediante una única punción en la vena de la cola en ratas no anestesiadas, utilizando un sistema de tubos de extracción al vacío. Este procedimiento se lleva a cabo restringiendo primero a la rata, limpiando la cola y pasando un hisopo con etanol al 70%. A continuación, se inserta la punta de una aguja tipo mariposa en una de las venas laterales de la cola dilatadas y se recoge la sangre en el tubo de recolección al vacío conectado al extremo de goma de la aguja mariposa.Finalmente se retira la aguja y se detiene la punción sanguínea. El punto destacado de esta técnica de muestreo es el uso del sistema de tubos de extracción al vacío. Esto puede reducir el riesgo de exposición directa a la sangre y facilita la obtención de múltiples muestras a partir de una sola punción venosa.El procedimiento será demostrado por dos miembros de nuestro laboratorio, Yanyang Cheng y Zhong Peng. Para comenzar, prepare un soporte de plástico, tubos de vacío con tapón de goma y una aguja de doble punta. Coloque estos materiales sobre una superficie estéril.A continuación, coloque la rata en el soporte plástico de inmovilización, teniendo cuidado de que las patas delanteras y traseras estén en una posición cómoda y de que la respiración no esté restringida. Luego, coloque el soporte sobre una superficie de trabajo firme. Deje que la cola cuelgue por el borde de la encimera, extendida.Para obtener la muestra de sangre, lave la cola con agua tibia de 20 a 30 grados Celsius para eliminar cualquier suciedad visible. Límpiela con etanol al 70 % para dilatar los vasos sanguíneos de la cola. Luego, localice las venas laterales de la cola, derecha o izquierda, situadas lateralmente respecto a la arteria, para la toma de sangre.Tomar una sección de la vena en la porción inferior de la cola. Sujete la cola suave pero firmemente cerca de la punta para mantenerla recta durante la recolección de la muestra. A continuación, inserte la punta de la aguja tipo mariposa de 22 g en una de las venas laterales de la cola, aproximadamente cinco milímetros en la posición situada a unos dos o tres centímetros de la punta de la cola, con un ángulo de aproximadamente 20 grados.Cuando se penetre la vena, la sangre fluirá hacia la aguja. Ahora, inserte rápidamente el extremo de goma de la aguja tipo mariposa en el tubo de recolección de sangre al vacío. La sangre fluirá lentamente hacia el tubo de recolección al vacío.El volumen sanguíneo previsto es de un punto dos mililitros cada vez. Cuando se haya recolectado un volumen adecuado de muestra, retire la aguja de la vena y aplique brevemente presión sobre el sitio de inserción para detener la hemorragia. Para recolectar plasma sanguíneo, utilice tubos que contengan EDTA como anticoagulante.Invierta suavemente el tubo varias veces para mezclar y desagregar la sangre. Coloque las muestras verticalmente sobre hielo. Centrifugue los tubos de recolección de sangre completa en una centrífuga refrigerada durante diez minutos para separar el plasma y el suero.Eluir el plasma, teniendo cuidado de no perturbar las capas de glóbulos rojos y blancos. Para recolectar suero sanguíneo, utilice tubos sin anticoagulante. Ambos tipos de muestras se pueden usar inmediatamente o almacenar a menos de 80 grados Celsius durante hasta un año.Con el fin de probar y verificar la viabilidad de este método, dos estudiantes de medicina recibieron entrenamiento durante dos horas antes de realizar este protocolo de recolección de sangre como grupo principiante. Y dos compañeros experimentados actuaron como grupo experimental. Los resultados mostraron que la tasa de éxito fue del 95 % en el grupo experimental y del 90 % en el grupo principiante.La tasa de éxito y el número de punciones fueron similares entre los dos grupos. La duración del muestreo fue significativamente más corta en el grupo experimental en comparación con el grupo de principiantes. Esta técnica de muestreo es sencilla y eficiente para la recolección repetida de sangre en ratas, y puede obtener un volumen sanguíneo suficiente cada vez.Además, este método es fácil de aprender y se puede realizar en ratas no anestesiadas, causando el mínimo estrés a los animales. Al adoptar un método de recolección de sangre por vacío, el vacío y la presión permiten obtener una extracción continua de sangre sin riesgo de contacto con la sangre, lo que también reduce la posibilidad de contaminación y hemólisis.

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Investigación

JoVE Journal

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Medicina

Las muestras de sangre son útiles para evaluar biomarcadores de estados fisiológicos o enfermedades in vivo. Aquí describimos la metodología para muestrear sangre de la vena lateral de la cola en la rata. Este método proporciona muestras rápidas con un mínimo de dolor e invasión.

Toma de muestras de sangre de la vena lateral de la cola de la rata

Aquí, presentamos un protocolo para recolectar muestras de sangre de la vena subclavia de rata.

Punción de la vena subclavia como método alternativo de recogida de muestras de sangre en las ratas

Este estudio divulga la muestra de sangre de vena de la cola en ratones usando un sistema de tubo de aspiración con la lupa de lente. Nuestro método es fácil de practicar y podría utilizarse para tomar muestras de sangre de repetición en ratones.

Colección de sangre modificada de las venas de la cola de los ratones no anestesiados con un sistema de colección de sangre vacío y gafas lupa

El presente protocolo describe un método simple y eficiente para recolectar sangre de la vena subclavia en ratas. Permite un muestreo rápido, oportuno y fácilmente identificable sin anestesia y obtiene sangre de alta calidad a través de la recolección repetitiva de muestras.

Muestreo repetitivo de sangre de la vena subclavia de rata consciente

Aquí, presentamos un protocolo para ofrecer alternativas de recolección de sangre rápidas, fáciles y confiables para el modelo de rata. Describimos tres métodos diferentes de muestreo de sangre según el contexto: punción de la vena de la cola bajo anestesia o en un animal consciente, y punción de la vena dorsal del pene bajo anestesia.

Punción modificada de la vena de la cola y la vena del pene para el muestreo de sangre en el modelo de rata

El protocolo muestra repetidas recolecciones de líquido cefalorraquídeo y sangre de ratas epilépticas realizadas en paralelo con un monitoreo continuo de video-electroencefalograma (EEG). Estos son fundamentales para explorar posibles vínculos entre los cambios en varias moléculas de fluidos corporales y la actividad convulsiva.

Toma de muestras de líquido cefalorraquídeo y sangre de la vena lateral de la cola en ratas durante los registros de EEG

Aquí presentamos una combinación de métodos efectivos de restricción en ratas y punción de la vena subclavia que permiten la recolección de sangre rápida, segura y repetida en ratas sin anestesia.

Muestreo de sangre de la vena subclavia en ratas conscientes

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Los biomarcadores son indicadores biológicos medidos directamente-de la enfermedad o la salud. En la población y de las ciencias sociales, los biomarcadores deben ser fáciles de obtener, transportar y analizar. Secado de gotas de sangre (DBS) colección responde a esta necesidad, se puede recoger en el campo con altas tasas de respuesta y analizada por una variedad de biomarcadores.

Sangre Seca Colección de Biomarcadores de salud para maximizar la participación en estudios de población

El uso de la toma de muestras por citocepillo para recolectar linfocitos y monocitos del endocérvix es una técnica mínimamente invasiva que proporciona muestras para el análisis de la inmunidad del tracto genital femenino. En este protocolo, describimos la recolección de muestras de citocepillo y el aislamiento de células inmunitarias para ensayos de citometría de flujo.

Colección, Aislamiento, y citometría de flujo análisis de las muestras endocervicales Humano

Aprenda a obtener muestras repetidas de sangre de la vena de la cola en ratas no anestesiadas utilizando un sistema de vacío. Este método eficiente reduce la exposición directa a la sangre y minimiza el estrés en los animales.

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