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Advanced Confocal Microscopy Techniques to Study Protein-protein Interactions and Kinetics at DNA Lesions

Avanzadas técnicas de Microscopía Confocal para estudiar las interacciones proteína-proteína y cinética en las lesiones del ADN

Full Text
11,451 Views
12:43 min
November 12, 2017

DOI: 10.3791/55999-v

Soňa Legartová*1, Jana Suchánková*1, Jana Krejčí1, Alena Kovaříková1, Eva Bártová1

1Institute of Biophysics of the Czech Academy of Sciences

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Microirradiation láser es una herramienta útil para estudios de reparación del ADN en las células vivas. Se muestra un enfoque metodológico para el uso de láseres de rayos UVA para inducir varias lesiones del ADN. Hemos optimizado un método para microirradiation local que mantiene el ciclo normal de la célula; así, las células irradiadas proceden a través de mitosis.

El objetivo general de estos experimentos es inducir lesiones en el ADN utilizando la microirradiación local de las células y observar el reclutamiento de proteínas implicadas en los procesos de reparación del ADN. Este método puede ayudarnos a entender una cuestión muy compleja y profunda como es cómo responden las células normales y cancerosas a las lesiones en el ADN. La principal ventaja de esta técnica es que podemos estudiar la respuesta al daño del ADN en células vivas individuales. La demostración del procedimiento correrá a cargo de Sona Legartova, una postdoctorada, y Jana Suchankova, una estudiante de doctorado de mi laboratorio. Para empezar, cultive células HeLa en DMAM suplementado con un 10% de FBS y antibióticos adecuados. Incubar las células a los 37

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