Name: Construcción y evaluación de un modelo murino Osteolysis Calvarial por exposición a partículas de CoCrMo en aflojamiento aséptico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-02-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Aprende a construir un modelo murino de osteólisis calvarial mediante exposición a nanopartículas de CoCrMo. Este método permite evaluar las interacciones entre partículas de desgaste y células en el aflojamiento aséptico.

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Este estudio fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias naturales de China (81572111), la clínica de la ciencia y tecnología proyecto de Fundación de la provincia de Jiangsu (BL2012002), el proyecto de investigación científica de Nanjing (201402007), la Ciencia Natural Fundación de la provincia de Jiangsu (BK20161385) y la Fundación especial de asociación médico chino (2015COS0810).

Todos los métodos aquí descritos han sido aprobados por el institucional Animal Care y el Comité uso (IACUC) de la Universidad de Nanjing.
1. preparación de la partícula CoCrMo
<ol><li>Obtener partículas de CoCrMo mediante alto vacío fabricadas tres electrodos corriente4. Aleación de CoCrMo lugar en el instrumento bajo 10-3 Pa vacío, 0,04 MPa argón y 3:2 (v/v) de hidrógeno y 650 A cátodo actuales.</li>
	<li>Medir los diámetros de las partículas de CoCrMo.<ol>
<li>Añadir 1 mg de CoCrMo partículas en 1,5 mL de etanol anhidro.</li>
		<li>Resuspender las partículas CoCrMo en etanol anhidro por agitación ultrasónica a 28 kHz y 600 W durante 5 minutos.</li>
		<li>Aplicar una gota (aproximadamente 20 μl) de la suspensión resultante de la tabla objetivo de microscopio electrónico de transmisión (TEM). Serie de fotos TEM en el voltaje de aceleración de 200 kV y 0,24 nm resolución de captura.</li>
		<li>Utilice el software suministrado para calcular la distribución tamaño medio diámetro y partícula en micrografías TEM.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Descontaminación de endotoxinas<ol>
<li>Autoclave de 50 g de partículas durante 15 min a 121 ° C y 15 psi.</li>
		<li>Detectar endotoxinas por un análisis cuantitativo de amebocitos de Limulus Lysate (LAL) (< 0,25% consideró indican ausencia de endotoxina UE/mL)5.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Resuspender las partículas en solución salina tamponada con fosfato (PBS) a una concentración de 50 mg/mL solución stock6.</li>
</ol>2. construcción del modelo Calvarial Osteolysis
<ol><li>Anestesiar el 6 semana de edad C57BL/J6 (seis ratones por grupo) withpentobarbital (50 mg/kg). Utilice la prueba del pellizco para evaluar el nivel de anestesia. Prevenir la resequedad de los ojos con solución salina normal.</li>
	<li>Lugar de ratones en la posición propensa. Quitar la piel sobre el cráneo con una afeitadora y desinfectar la piel utilizando las bolas de algodón médico que contiene el etanol del 75%.</li>
	<li>Para el punto de localización, identificar dos puntos, incluyendo los puntos medios entre los dos ojos y las orejas, respectivamente. Luego, determinar la línea entre los dos más puntos y haga una incisión en la piel a lo largo de la línea de arriba con unas tijeras (figura 1A).</li>
	<li>Retire el periostio craneal del calvaria con un bisturí (figura 1B)6.</li>
	<li>Piel en ambos extremos de la sutura con sutura interrumpida simple.</li>
	<li>Hacer una línea de sutura a través del centro de la incisión sin anudar. Sujete los dos extremos de la línea de sutura.</li>
	<li>Incorporar 50 μl de suspensión de partículas de CoCrMo (50 mg/mL en PBS) en medio de la calvarias (figura 1)2.</li>
	<li>Nudo la última puntada de la sutura interrumpida simple (figura 1).</li>
	<li>Mantener los ratones durante otras 2 semanas.</li>
</ol>3. evaluación del modelo de osteólisis Calvarial por la exploración Micro-CT
<ol><li>Sacrificar a los ratones con dióxido de carbono. Decapita a los ratones en el plano horizontal. Retire el tejido cerebral dentro y la piel y la piel exterior. La cosecha la calvarias para experimentos adicionales.</li>
	<li>Aclarar suavemente todo el tejido suave en el calvaria con pinzas. Fijar el calvarias despejado en paraformaldehído al 4% a 4 ° C por 24 h. sumergir calvarias en PBS 24 h antes de la exploración micro-CT.</li>
	<li>Analizar la calvarias ratones mediante micro-CT en alta resolución en una resolución isométrica de 18 μm y la configuración de energía de rayos x de 45 kV y 550 mA.</li>
	<li>Llevar a cabo la reconstrucción tridimensional de los datos con el software micro-CT.</li>
	<li>Análisis cuantitativo y cualitativo.<ol>
<li>En primer lugar, seleccione la región cuadrada alrededor de la sutura de la línea media como la región de interés.</li>
		<li>En segundo lugar, medir la densidad mineral ósea (DMO), osea el volumen total volumen (BV/TV), número trabecular (Tb.N), espesor trabecular (Tb.Th), separación/separación trabecular (Tb.Sp) y porcentaje de porosidad total con el software suministrado para micro-CT.</li>
		<li>En tercer lugar, comparar los tres grupos para las distintas medidas por ANOVA unidireccional. Para el análisis post-hoc de la varianza, aplicar el método de Bonferroni2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. evaluación del modelo de osteólisis Calvarial por tinción H & E
<ol><li>Descalcificar muestras de calvaria en 15% ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)-PBS a 4 ° C. Cambiar la solución de descalcificación cada día durante 3 semanas.</li>
	<li>Incrustar las muestras descalcificadas en parafina para un 2 x 1 cm x 1 cubo de cm y cortar en secciones de 2 μm en la zona de deposición de partículas.</li>
	<li>Mancha las secciones con hematoxilina y eosina como describió anteriormente7.</li>
	<li>Capturar imágenes de la pathomorphism general por microscopia ligera.</li>
</ol>

<ol><li>Dong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotide+targeting+TNF-alpha+can+suppress+Co-Cr-Mo+particle-induced+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotide targeting TNF-alpha can suppress Co-Cr-Mo particle-induced osteolysis.</a> J Orthop Res. 26 (8), 1114-1120 (2008).</li>
<li>Deng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SIRT1+protects+osteoblasts+against+particle-induced+inflammatory+responses+and+apoptosis+in+aseptic+prosthesis+loosening%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">SIRT1 protects osteoblasts against particle-induced inflammatory responses and apoptosis in aseptic prosthesis loosening.</a> Acta Biomater. 49, 541-554 (2017).</li>
<li>Langlois, J., Hamadouche, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+animal+models+of+wear-particle+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Orthop%22%5BJournal%5D)">New animal models of wear-particle osteolysis.</a> Int Orthop. 35 (2), 245-251 (2011).</li>
<li>Wang, P., Zhao, F. X., Zhang, Z. Z. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/287666498_Preparation_of_ultrafine_silver_powders_by_DC_arc_plasma">Preparation of ultrafine zinc powders by DC arc plasma evaporation method.</a> Chinese Journal of Nonferrous Metals. 21 (9), 2236-2241 (2011).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fibroblast+expression+of+RANKL+in+CoCrMo-particle-induced+osteolysis+is+mediated+by+ER+stress+and+XBP1s%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The fibroblast expression of RANKL in CoCrMo-particle-induced osteolysis is mediated by ER stress and XBP1s.</a> Acta Biomater. 24, 352-360 (2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+mediated+CoCrMo+particle-induced+peri-implant+osteolysis+by+promoting+osteoblast+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Autophagy mediated CoCrMo particle-induced peri-implant osteolysis by promoting osteoblast apoptosis.</a> Autophagy. 11 (12), 2358-2369 (2015).</li>
<li>Wang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle-induced+osteolysis+mediated+by+endoplasmic+reticulum+stress+in+prosthesis+loosening%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Particle-induced osteolysis mediated by endoplasmic reticulum stress in prosthesis loosening.</a> Biomaterials. 34 (11), 2611-2623 (2013).</li>
<li>Yang, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adeno-associated+virus-mediated+osteoprotegerin+gene+transfer+protects+against+particulate+polyethylene-induced+osteolysis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Adeno-associated virus-mediated osteoprotegerin gene transfer protects against particulate polyethylene-induced osteolysis in a murine model.</a> Arthritis Rheum. 46 (9), 2514-2523 (2002).</li>
<li>Liu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autophagy+mediated+TiAl%286%29V%284%29+particle-induced+peri-implant+osteolysis+by+promoting+expression+of+TNF-alpha%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Autophagy mediated TiAl(6)V(4) particle-induced peri-implant osteolysis by promoting expression of TNF-alpha.</a> Biochem Biophys Res Commun. 473 (1), 133-139 (2016).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ER+Stress+Mediates+TiAl6V4+Particle-Induced+Peri-Implant+Osteolysis+by+Promoting+RANKL+Expression+in+Fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">ER Stress Mediates TiAl6V4 Particle-Induced Peri-Implant Osteolysis by Promoting RANKL Expression in Fibroblasts.</a> PLoS One. 10 (9), e0137774(2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TiAl6V4+particles+promote+osteoclast+formation+via+autophagy-mediated+downregulation+of+interferon-beta+in+osteocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">TiAl6V4 particles promote osteoclast formation via autophagy-mediated downregulation of interferon-beta in osteocytes.</a> Acta Biomater. 48, 489-498 (2017).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lycorine+suppresses+RANKL-induced+osteoclastogenesis+in+vitro+and+prevents+ovariectomy-induced+osteoporosis+and+titanium+particle-induced+osteolysis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Lycorine suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis in vitro and prevents ovariectomy-induced osteoporosis and titanium particle-induced osteolysis in vivo.</a> Sci Rep. 5, 12853(2015).</li>
<li>Neuerburg, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+calcitonin+receptor+signalling+in+polyethylene+particle-induced+osteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The role of calcitonin receptor signalling in polyethylene particle-induced osteolysis.</a> Acta Biomater. 14, 125-132 (2015).</li>
<li>Catelas, I., Jacobs, J. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20415362">Biologic activity of wear particles.</a> Instr Course Lect. 59, 3-16 (2010).</li>
<li>Liu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biological+response+to+nanometre-sized+polymer+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">The biological response to nanometre-sized polymer particles.</a> Acta Biomater. 23, 38-51 (2015).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Existen dos métodos principales para la osteólisis inducida por partículas de desgaste en ratones: el modelo de bolsa de aire y el modelo de osteólisis calvarial. En el modelo de bolsa de aire, una bolsa de aire subcutáneo generada se establece primero, seguido por la introducción de partículas de desgaste y la implantación en el tejido óseo del8. La pared de bolsa imita el periostio en aflojamiento aséptico. Sin embargo, la implantación de hueso es no vascular sin actividad biológica, que hace di...

Aflojamiento aséptico es la causa más común de artroplastia total de cadera (THA) y fracaso de la artroplastia (TKA) total de la rodilla, que requiere de cirugía de revisión1. Sin embargo, el mecanismo subyacente permanece claro2. Una carta recordativa larga es necesaria para detectar la osteólisis inducida por partículas cuya ocurrencia es rara; por lo tanto, es un reto a explorar su patogenesia en casos clínicos. Por lo tanto, estudios más centrados en mecanismos celulares y tejidos complejos requieren que ambos experimentos en vivo en usan modelos de la osteólisis inducida por partículas y en vitro ensayos en células relacionadas con la homeostasis3del hueso. Un modelo animal válido es importante en revelar los efectos de las partículas de desgaste en la pérdida ósea, proporcionando la evidencia para otros ensayos celulares.
Un modelo murino osteolysis calvarial construido por exposición a partículas de CoCrMo es un método efectivo y válido para evaluar las interacciones entre las partículas y diversas células en aflojamiento aséptico. En este modelo, partículas de CoCrMo causan osteólisis calvarial induciendo citoquinas inflamatorias en macrófagos, activación de osteoclastos, inhibiendo la proliferación de osteoblastos, y promover la apoptosis de osteoblastos.
Sólo se tarda dos semanas para establecer este modelo. Osteólisis puede ser visualizada y cuantificada por hematoxilina y eosina (H & E) coloración y micro computarizada de tomografía (micro-CT)2. Además, este modelo tiene un ratón de relativamente bajo costo y transgénico y knockout modelos pueden utilizarse para un gran número de compuestos en diversas dosis3.
El procedimiento para establecer y evaluar este modelo es simple. En primer lugar, las partículas de CoCrMo fueron obtenidas por alto vacío de tres electrodos corriente y resuspendió en solución salina tamponada con fosfato (PBS) a una concentración de 50 mg/mL. Entonces, 50 μl de la suspensión resultante se aplicó a la mitad de la calvaria murino después de la separación del periostio craneal por agudo disección. Los ratones fueron sacrificados después de dos semanas, y se cosecharon muestras de la calvaria; se realizaron análisis cualitativos y cuantitativos por H & E tinción andmicro-CT.
Un modelo murino osteolysis calvarial construido por exposición a partículas de CoCrMo es una herramienta ideal para evaluar las interacciones entre las partículas de CoCrMo y varias células, como macrófagos, fibroblastos, osteoblastos y osteoclastos, en aflojamiento aséptico.

<table><tbody><tr><td>Aleación de CoCrMo de prótesis</td><td>Waldemar Link GmbH & Co</td><td>GEMINI MK II</td><td>Materia prima para obtener nanopartículas de CoCrMo</td></tr><tr><td>Fabricación de corriente continua de tres electrodos de alto vacío</td><td>Facultad de Ciencia de Materiales y Ingeniería, Universidad de Tecnología</td><td></td> de Nanjing <td>Máquina de diseño propio</td></tr> macho <tr><td>de 6 semanas de edad C57BL / 6J</td> ratones <td>Modelo centro de investigación animal de la Universidad de Nanjing</td><td>N000013</td><td></td></tr><tr><td>100% etanol</td><td>Reactivo de Nanjing</td><td>C0691514023</td><td>solvente de nanopartículas de CoCrMo para transmisión escaneo con microscopio electrónico Tubos de</td></tr><tr><td>microcentrífuga de 1,5 ml</td><td>Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD</td><td>W603</td><td></td></tr><tr><td>Balanza microanalítica</td><td>Shenzhen Qun long Instrument Equipment Co,. LTD</td><td>EX125DZH</td><td></td></tr><tr><td>Agitador ultrasónico</td><td>Shanghai Yuhao instrumento científico co., LTD</td><td>YH-200DH</td><td>Para suspender nanopartículas de CoCrMo</td></tr><tr><td>Microscopio electrónico</td><td>de transmisión FEI</td><td>Tecnai G20</td><td></td></tr><tr><td>SimplePCI software</td><td>Compix Inc.</td><td>6.6 versión</td><td>Para calcular el diámetro medio y la distribución del tamaño de partícula.</td></tr><tr><td>Bandeja de esterilización de mano alta</td><td>QIULONGYIQI</td><td>KYQL-100DS</td><td>Para descontaminar endotoxinas</td></tr><tr><td>Limulus Ensayo de lisado de amebocitos (LAL)</td><td>Charles River</td><td>R13025</td><td>Para detectar endotoxinas&nbsp;</td></tr><tr><td>15 ml Tubos de microcentrífuga</td><td>Taizhou Suyi Medical</td><td>B122</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato</td><td>Boster Biological Technology</td><td>AR0030</td><td>Disolvente de solución madre de nanopartículas de CoCrMo</td></tr><tr><td>Pentobarbital Sodio</td><td>Sigma</td><td>P3761</td><td>Para anestesiar ratones</td></tr><tr><td>Solución salina normal</td><td>SACKLER</td><td>SR8572EP-15</td><td>Para evitar la sequedad de los ojos de los ratones</td></tr><tr><td>Etanol al 75%</td><td>Nanjing Reactivo</td><td>C0691560275</td><td>Desinfección</td></tr><tr><td>Bola de algodón médico</td><td>Shuitao</td><td>1278298933</td><td></td></tr><tr><td>Afeitadora</td> de desinfección <td>Kemei</td><td>KM-3018</td><td>Para afeitar la piel</td></tr><tr><td>Tijera</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>S12005-10</td><td>Para incidir la piel</td></tr><tr><td>Sutura</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F34001-01</td><td>Para suturar la piel</td></tr><tr><td>Portaagujas</td><td>RWD LIFE CIENCIA</td><td>F33001-01</td><td>Para suturar la piel</td></tr><tr><td>Aguja</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>R14003-12</td><td>Para suturar la piel</td></tr><tr><td>Pinzas para vasos</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F22003-09</td><td>Para suturar la piel</td></tr><tr><td>Bisturí</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>S31010-01</td><td>Para cosechar calvaria</td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>RWD LIFE SCIENCE</td><td>F12006-10</td><td>Para cosechar calvaria</td></tr><tr><td>100 &micro; Pipetas</td><td>L Eppendorf</td><td>3120000240</td><td>Para incrustar partículas en suspensión en las calvatias</td></tr><tr><td>100 &micro; L puntas de pipeta</td><td>AXYGEN</td><td>T-200-Y</td><td>Para incrustar partículas en suspensión en las calvatias</td></tr><tr><td>5 ml Microtubos</td><td>Taizhou Weierkang Medical Supplies co., LTD</td><td>W621</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldehído</td><td>Servicebio</td><td>G1101</td><td>Fijación</td></tr><tr><td>Micro Tomografía Computarizada&nbsp;</td><td>SkyScan</td><td>SkyScan1176</td><td></td></tr><tr><td>Etileno Diamino Ácido tetraacético</td><td>Servicebio</td><td>G1105</td><td>Descalcificación</td></tr><tr><td>Parafina</td><td>Servicebio</td><td>#0001</td><td></td></tr><tr><td>Cortadora de parafina</td><td>Leica</td><td>RM2125RTS</td><td></td></tr><tr><td>Portaobjetos</td><td>de vidrio Servicebio</td><td>G6004</td><td></td></tr><tr><td>Cubierta de vidrio</td><td>Servicebio</td><td>200</td><td></td></tr><tr><td>kit de tinción HE</td><td>Servicebio</td><td>#1-5</td><td>Microscopio óptico de tinción HE</td></tr><tr><td></td><td>Nikon</td><td>E200</td><td></td></tr></tbody></table>

construcción y evaluación de un modelo murino osteolysis calvarial por exposición a partículas de cocrmo en aflojamiento aséptico

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

Osteólisis inducida por partículas de desgaste es una de las principales causas del aflojamiento aséptico en el fracaso de la artroplastia, pero el mecanismo subyacente es incierto. Debido al largo seguimiento necesarios para detección y ocurrencia esporádica, es difícil evaluar la osteólisis inducida por el ofparticle de patogenesia en casos clínicos. Por lo tanto, modelos animales óptimos se requieren estudios adicionales. El modelo murino de osteólisis calvarial establecido por la exposición a partículas de CoCrMo es una herramienta eficaz y válida para evaluar las interacciones entre las partículas y diversas células en aflojamiento aséptico. En este modelo, las partículas de CoCrMo primero fueron obtenidas por alto vacío de tres electrodos corriente y resuspendió en solución salina con tampón fosfato a una concentración de 50 mg/mL. Entonces, 50 μl de la suspensión resultante se aplicó a la mitad de la calvaria murino después de la separación del periostio craneal por agudo disección. Después de dos semanas, los ratones fueron sacrificados y se cosecharon muestras de la calvaria; se realizaron evaluaciones cualitativas y cuantitativas por hematoxilina y eosina y micro tomografía computada. Los puntos fuertes de este modelo incluyen simplicidad de procedimiento, evaluación cuantitativa de la pérdida de masa ósea, rapidez de desarrollo de osteólisis, uso potencial transgénico o knockout modelos y un costo relativamente bajo. Sin embargo, este modelo no puede utilizarse para evaluar la fuerza mecánica y efectos crónicos de las partículas en aflojamiento aséptico. Modelo murino osteolysis calvarial generado por la exposición a partículas de CoCrMo es una herramienta ideal para evaluar las interacciones entre las partículas de desgaste y varias células, por ejemplo, los macrófagos, fibroblastos, osteoblastos y osteoclastos, en aflojamiento aséptico.

Las partículas de nanoescala producido interno CoCrMo fueron alrededor de 50 nm (error estándar de 3.56) de diámetro, como cuantificado por TEM (figura 2). Después de la exposición de ratón calvarias a partículas de CoCrMo, los animales (n = 6 por grupo) se mantuvieron durante dos semanas. Dentro de dos semanas, la incisión calvarial fue curada completamente, y la sutura puede caer. Cualquier infección local o no sindical puede afectar la evaluación de la pér...

Este manuscrito describe un modelo murino osteolysis calvarial por exposición a partículas de CoCrMo, que constituye un modelo animal ideal para la evaluación de las interacciones entre las partículas de desgaste y diversas células en aflojamiento aséptico.

Construcción y evaluación de un modelo murino Osteolysis Calvarial por exposición a partículas de CoCrMo en aflojamiento aséptico

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

El objetivo general de este procedimiento es construir y evaluar el modelo de osteólisis calvarial murina mediante la exposición a nanopartículas de cobalto-cromo-molibdeno. La osteólisis inducida por partículas de desgaste es una causa importante del aflojamiento aséptico en el fracaso de la artroplastia, pero los mecanismos subyacentes a este proceso son poco claros. Debido al largo tiempo de seguimiento y a la aparición esporádica, es difícil explorar la patogénesis del aflojamiento aséptico en casos clínicos.Por lo tanto, es necesario un modelo animal de desgaste para estudios posteriores. En nuestro laboratorio, un modelo de osteolisis calvarial murino construido con partículas de aleación de cobalto es un modelo eficaz para estudiar la patogénesis del aflojamiento aséptico. Esto se logra primero generando partículas nanométricas de cromo molibdeno cobalto a partir de prótesis de aleación de cobalto y resuspendiéndolas en solución salina tamponada con fosfato a una concentración de 15 miligramos por mililitro.El siguiente paso consiste en identificar la posición de la incisión en una línea entre los dos puntos medios entre los dos ojos y orejas, respectivamente. A continuación

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Investigación

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Medicine

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Aprende a construir un modelo murino de osteólisis calvarial mediante exposición a nanopartículas de CoCrMo. Este método permite evaluar las interacciones entre partículas de desgaste y células en el aflojamiento aséptico.

Construcción y evaluación de un modelo murino Osteolysis Calvarial por exposición a partículas de CoCrMo en aflojamiento aséptico (Video) | JoVE Journal

Construcción y evaluación de un modelo murino Osteolysis Calvarial por exposición a partículas de CoCrMo en aflojamiento aséptico

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