Fare Abdominal aort Myointimal Hiperplazi ikna etmek için balon tabanlı yaralanma

Bu fare tabanlı model sistemin genel amacı, aort balonu yaralanmasından sonra miyointimal hiperplazi gelişimini incelemektir. Bu model sistemi, gelişimine hangi faktörlerin katkıda bulunduğu gibi miyointimal hiperplazi ile ilgili temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Transgenik farelerde miointimal hiperplazinin gelişimini inceleyerek, hastalığın patomekanizmasını daha iyi anlamayı umuyoruz.

Bu hayvan modelinin bir diğer avantajı da hastalığın hızlı ilerlemesidir. Sadece birkaç hafta içinde, farelerde incelendik. İlk önce gerekli kateteri hazırlayın.

Tutucudan çıkarın ve kılavuz teli distal porttan lümenden dışarı çekin. Daha sonra kateterin distal ucuna bir damla siyanoakrilat koyun ve kılavuz teli RX portundan, ardından lümenden ve distal porttan dışarı doğru besleyin. Ardından, yaklaşık beş milimieterin dışarı çıkmasını sağlamak için kılavuz teli hafifçe geri çekin ve yapıştırıcının kurumasını bekleyin.

Daha sonra üç mililitrelik bir şırıngayı 1.5 mililitre% 0.9 salin ile doldurun ve kateterin balon şişirme portuna bağlayın. Ardından balon şişirmeyi test etmek için pistonu itin. Şırıngada yaklaşık 0,6 mililitre salin bırakın.

Ardından, fareyi ameliyat için hazırlayın. Bir izofluran odasında uyuşturun ve daha sonra ameliyat sırasında bir burun konisi yoluyla izofluran verin. Devam etmeden önce, refleks olmadığını doğrulamak için arka ayakları ve kuyruğu sıkıştırarak yeterli anestezi derinliğini onaylayın.

Daha sonra bir saç düzeltici kullanarak karın kıllarını alın ve arka bacakların konumunu bant kullanarak sabitleyin. Son olarak, üç alternatif povidon iyot ve ardından %80 etanol kullanarak karın bölgesini dezenfekte edin. Karın organlarını ortaya çıkarmak için linea alba boyunca cildi ve kas katmanlarını diseksiyonla başlayın.

Sonra bağırsakları bir kenara koyun, nemli tutmak için tuzlu suya batırılmış bir gazlı beze sarın. Şimdi abdominal aortun üzerindeki yağ dokusunu çıkarmak için iki ince forseps kullanıyor. Daha sonra bir insülin şırıngasından IVC'ye yaklaşık 12 ünite heparin sülfat enjekte edin ve sistemik dağıtım için üç dakika bekleyin.

Daha sonra infrarenal aortu bifurkasyona kadar incelemek ve giden dalları ortaya çıkarmak için forseps kullanın. Daha sonra koterizasyon kullanarak, klemplenecek alan içindeki infrarenal aort boyunca yan damarları bağlayın. Ardından, damarı doğrudan renal arterlerin altına klempleyerek ve aort bifurkasyonunun hemen üzerinde distal bir pozisyonda klempleyerek kan akışını durdurun.

Şimdi kelepçeler arasındaki orta noktada damar boyunca küçük bir yatay kesi yapın. Kesi, damarın çevresinin yaklaşık 1/3'ü kadar olmalıdır. Daha sonra, bir insülin şırıngası kullanarak, aortu daha önce olduğu gibi heparin çözeltisi ile yıkayın.

Daha sonra, insizyonun her iki tarafına tek düğümlü 10-0 dikiş yerleştirin. Devam etmek için aortu genişletin. Kesiye bir damar genişletici yerleştirin ve damarı hafifçe yayın.

Bunu iki veya üç kez yapın. Daha sonra balon kateteri tuzlu su ile ıslatarak hazırlayın. Daha sonra balon kateteri sönmüş olarak aort içine yerleştirin ve proksimal klempe doğru ilerletin.

Proksimal kelepçeyi dikkatlice açın ve yaklaşık 0,6 mililitre salin enjekte ederek kan sızıntısını önlemek için balonu şişirin. Ardından, kateteri yaklaşık iki santimetre geriye doğru ilerletin. Balonu hafifçe söndürürken kateteri geri çekin.

Kateter aort insizyonuna ulaştığında, proksimal klempi tekrar takın. Ardından balonu tamamen söndürün ve çıkarın. Şimdi aortu heparin çözeltisi ile durulayın.

Daha sonra aort kesisini her iki yan tarafta kesintili 10-0 dikişler kullanarak kapatarak devam edin. Ardından ventral tarafta bir veya iki dikiş atılır. Daha sonra distal klempi açın, kanama olup olmadığını kontrol edin ve gerekirse ek dikişler yerleştirin.

Kanama olmadığında, proksimal kelepçeyi dikkatlice açın. Destek ve kanamayı yavaşlatmak için dikişlerde sürüntü kullanın. Daha sonra onları sürdürmek için dikişlerin üzerine emilebilir kanama durdurucular yerleştirin.

Her iki klemp de açıkken, aort nabzı insizyondan distal olarak görülebilmelidir. Şimdi bağırsakları tekrar karın içine yerleştirin ve karın boşluğunu 37 santigrat dereceye kadar ısıtılmış tuzlu su ile durulayın. Daha sonra karın kas tabakasını 6-0 koşu dikişleri kullanarak kapatın.

Ve sonra cildi 5-0 koşu dikişleri ile kapatın. Daha sonra, hayvan uyanmadan hemen önce deri altına bir analjezik enjekte edin. Şimdi fareyi bilinç kazanana ve sternal yaslanmayı sürdürene kadar izleyin.

Bilinciniz açıldıktan sonra, tamamen iyileşene kadar hayvanı tek başına barındırın. Üç gün boyunca içme suyuna Metamizol verin. İyi bir iyileşme sağlamak için her gün fareyi kontrol ettiğinizden emin olun.

Balon denudasyonu, farelerde miyointimal hiperplazi gelişimini incelemek için uygun bir yöntemdir. Hayvanlar ameliyattan sonra iyi bir şekilde iyileşti ve mükemmel fiziksel durumdaydı. 50'den fazla ameliyatta %3'ten azı öldü.

Greftte ilerleyici olarak miyointimal hiperplazi gelişti. Masson'un trikrom ile histolojik boyama, iç elastik lamina içinde miyointima oluşumunu gösterdi. Miyointimal lezyonlar esas olarak SM22 için pozitif hücresel bileşenlerden oluşuyordu, bu da düz kas hücrelerini ve yine kırmızı ile gösterilen miyofibroblastlar gibi ECM hücrelerini gösteriyordu.

Bu videoyu izledikten sonra, farelerde balon yaralanmalarının nasıl gerçekleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa 20 dakika içinde yapılabilir.