Name: Establecimiento de un cultivo primario de Sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Aprenda a establecer un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivado de paciente. Este modelo preclínico humano permite estudiar la patofisiología tumoral y evaluar respuestas terapéuticas in vitro.

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Los autores desean agradecer a Gráinne Tierney por asistencia editorial.

STS células están aisladas de un tumor suprimido masa quirúrgico de pacientes con STB. El protocolo ha sido aprobado por el Comité de ética Local y se realiza según las directrices de buena práctica clínica y la declaración de Helsinki. Todos los pacientes dieron consentimiento informado para participar en el estudio. Los especímenes quirúrgicos son analizados por un patólogo experimentado sarcoma y procesados dentro de 3 horas de cirugía.
1. tumor recogida de muestras y procesamiento:
<ol><li>Recoger las muestras de tumor con la ayuda de un patólogo de sarcoma en un contenedor de orina estéril de 100 mL con 50 mL de DMEM glucosa baja medio sellado con una película de parafina.</li>
	<li>Almacenar las muestras a 4 ° C por un máximo de 3 h después de la resección del tumor.</li>
	<li>Realizar los siguientes pasos bajo una campana de cultivo estériles para tejidos.<ol>
<li>Esterilizar la campana con etanol al 70% y guantes estériles.</li>
		<li>Esterilice las pinzas de acero inox con etanol al 70% (uso una gasa estéril).</li>
		<li>Retire la película de parafina el envase de la orina y descartar.</li>
		<li>Lave el exterior del contenedor de orina con etanol al 70%.</li>
		<li>Abrir una caja de Petri cuadrada.</li>
		<li>Abra el envase de la orina y transferir a las muestras de tumor en la placa Petri cuadrada utilizando las pinzas esterilizadas de acero inox.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Lavar a las muestras de tumor con PBS dos veces.</li>
	<li>Abrir un bisturí quirúrgico estéril.<ol>
<li>Triturar finamente las muestras de tumor en pedazos de3 1-2 mm.</li>
		<li>Recoger un cuarto de la muestra total en un tubo de 2 mL.</li>
		<li>Añadir 1 mL del reactivo de trizol (comprado) en el tubo y congelar inmediatamente a-80 ° C (la muestra se utilizará en el análisis posterior para la evaluación de expresión del gene del STS).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Recoger el resto del material finamente triturado tumor en un tubo de 15 mL.<ol>
<li>Añadir 4 mL de colagenasa tipo I solución (tipo colagenasa está disuelta en PBS, en una concentración de 4 μg/mL).</li>
		<li>Diluir la colagenasa tipo I solución con 4 mL de DMEM alta cultura media (concentración final de colagenasa tipo es 2 μg/mL).</li>
		<li>Cierre el tubo de 15 mL y sellar con la película de parafina.</li>
		<li>Poner el tubo de 15 mL en un agitador balanceo en una incubadora a 37 ° C en condiciones de agitación de 15 minutos activar la digestión.</li>
		<li>Después de 15 min guardar el tubo en el agitador balanceo bajo agitación condiciones a temperatura ambiente durante la noche.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Al día siguiente pone el tubo de 15 mL debajo de la cubierta estéril.</li>
	<li>Suavemente, filtrar la suspensión de células a través de un filtro estéril de 100 μm a la parte superior de un tubo de 50 mL.</li>
	<li>Lave el filtro con medios de cultivo alta DMEM suplementado con 10% suero fetal bovino, glutamina 1% y 1% de penicilina/estreptomicina.</li>
	<li>Descarte el filtro estéril de 100 μm, cerrar el tubo de 50 mL y centrifugar a 225 x g durante 5 minutos a temperatura ambiente.</li>
	<li>Eliminar el sobrenadante por inversión del tubo.</li>
	<li>Resuspender las células con DMEM alta 1-2 mL medio de cultivo suplementado con suero bovino fetal 10%, glutamina 1% y 1% de penicilina/estreptomicina. Nota: El volumen depende de la cantidad de tumor muestra procesada.</li>
	<li>Contar las células con una cámara de Neubauer.<ol>
<li>Diluir la muestra 1:2 en trypan azul y 10 μl de la dilución para contar las células.</li>
		<li>Contar por lo menos dos veces y calcular el promedio de las repeticiones para saber el número medio total de las células recogidas.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Células de la placa en una cultura estándar monocapa a una densidad de 80.000 células/cm2. Nota: Siempre incluyen controles en los experimentos. Realizar al menos 3 repeticiones técnicas para cada condición. Realizar al menos 2 réplicas biológicas. Farmacología Preclínica, expresión génica y análisis de expresión de la proteína, experimentos deben llevarse a cabo con un bajo número de pasajes de la cultura dentro de 30-45 días de siembra celular para evitar perder cáncer de fenotipos de células.</li>
	<li>Preparación de la muestra citológica.<ol>
<li>Recoger 100.000 células en 200 μL de DMEM alto medio de cultivo suplementado con suero bovino fetal 10%, glutamina 1% y 1% de penicilina/estreptomicina.</li>
		<li>Pipeta de la solución (una pipeta de 200 μL) en un embudo desechable equipada con un filtro y montado con un portaobjetos de vidrio.</li>
		<li>Abra la Citocentrifuga y coloque las muestras.</li>
		<li>Ejecute la Citocentrifuga 18,6 x g por 20 min.</li>
		<li>Deseche el embudo equipado con el filtro.</li>
		<li>Fije los portaobjetos en acetona durante 10 min seguida de cloroformo durante 5 minutos.</li>
		<li>Almacenar las diapositivas a-20 ° C. Nota: Descongelar e hidratar las muestras antes de la tinción y realizar la tinción siguiendo las instrucciones del fabricante. Preparar al menos 3 repeticiones técnicas.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. las culturas STS de la célula:
<ol><li>Cambiar los medios de comunicación una vez por semana (DMEM alto medio de cultivo suplementado con suero bovino fetal 10%, glutamina 1% y 1% de penicilina/estreptomicina).<ol>
<li>Descartar el medio de cultivo utilizando una pipeta de 200-1.000 μl.</li>
		<li>Agregar nuevo medio natural utilizando una pipeta de 200-1.000 μl.</li>
		<li>Paso de la célula:<ol>
<li>Separar las células cuando la confluencia es alrededor del 90%: Nota: Amplificación de la cultura de célula de STS debe realizarse una vez por semana sobre la base de las condiciones de cultivo.</li>
			<li>Deseche el medio, lavar con PBS y añadir 2-3 mL de tripsina 1 x en PBS Nota: El volumen de la tripsina utilizado depende de la cantidad de células cultivadas obtenidas.</li>
			<li>Incube las células 3-5 min a 37 ° C.</li>
			<li>Recoger las células separadas de la placa con una pipeta de 200-1.000 μl.</li>
			<li>Pipetear las células separadas en un tubo de 15 mL y añadir 4 mL de DMEM alto medio de cultivo suplementado con suero bovino fetal 10%, glutamina 1% y 1% de penicilina/estreptomicina para detener la reacción enzimática.</li>
			<li>Centrifugue a 225 x g durante 5 min a temperatura ambiente.</li>
			<li>Deseche el sobrenadante.</li>
			<li>Resuspenda el precipitado de células mediante la adición de 1 mL de DMEM alto medio de cultivo suplementado con suero bovino fetal 10%, glutamina 1% y 1% de penicilina/estreptomicina.</li>
			<li>Las células en una placa de cultivo nuevo o un frasco con un volumen final según las instrucciones del fabricante de la semilla. Nota: No dividir las células más que 1:3.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. posteriores análisis:
Nota: Una variedad de diferentes experimentos puede llevarse a cabo utilizando este modelo (ver más abajo). Por lo tanto, es crucial decidir durante la fase de diseño del estudio que analiza se realizará por lo que se puede preparar un número suficiente de muestras y repeticiones.
<ol><li>Ensayos de proliferación como el bromuro de 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium MTT</li>
	<li>Análisis de apoptosis como la transferasa terminal del deoxynucleotidyl (TdT) nick final etiquetado ensayo (TUNEL)</li>
	<li>Análisis de Immunohistochemical</li>
	<li>Análisis de expresión génica</li>
	<li>Análisis de Western blot</li>
	<li>Ensayo ELISA</li>
	<li>Celular activado por fluorescencia clasificación análisis (FACS)</li>
	<li>
En vivo el modelo de xenoinjerto</li>
</ol>

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.3322/caac.21387/full">Cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 66 (1), 7-30 (2016).</li>
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<li>Fletcher, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolving+classification+of+soft+tissue+tumours+-+an+update+based+on+the+new+2013+WHO+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Histopathology%22%5BJournal%5D)">The evolving classification of soft tissue tumours - an update based on the new 2013 WHO classification.</a> Histopathology. 64 (1), 2-11 (2014).</li>
<li>De Vita, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+classification%2C+treatment+options%2C+and+new+perspectives+in+the+management+of+adipocytic+sarcomas%5BTitle%5D)+AND+%22Onco+Targets+Ther%22%5BJournal%5D)">Current classification, treatment options, and new perspectives in the management of adipocytic sarcomas.</a> Onco Targets Ther. 9 (12), 6233-6246 (2016).</li>
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<li>Ducimetière, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+sarcoma+histotypes+and+molecular+subtypes+in+a+prospective+epidemiological+study+with+central+pathology+review+and+molecular+testing%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Incidence of sarcoma histotypes and molecular subtypes in a prospective epidemiological study with central pathology review and molecular testing.</a> PLoS One. 6 (8), 20294(2011).</li>
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<li>Zhong, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+vegf+gene+knockdown+on+growth+of+the+murine+sarcoma+cell+line+MS-K%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Effect of vegf gene knockdown on growth of the murine sarcoma cell line MS-K.</a> Cells. 16 (6), 625-638 (2011).</li>
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<li>Daigeler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneous+in+vitro+effects+of+doxorubicin+on+gene+expression+in+primary+human+liposarcoma+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Heterogeneous in vitro effects of doxorubicin on gene expression in primary human liposarcoma cultures.</a> BMC Cancer. 29 (8), 313(2008).</li>
</ol>

Los autores no tienen conflictos de interés divulgar.

Modelos preclínicos bien definidos son necesarios para dilucidar el fondo molecular de tumores, predecir pronóstico pobre y desarrollar nuevas estrategias terapéuticas para pacientes con cáncer. Esto es especialmente importante para los tumores raros como STS cuya alta heterogeneidad en términos de morfología, comportamiento agresivo de la clínico y potencial desafía nuestra comprensión de la biología de STS y tratamiento del paciente21. Por otra parte, las líneas de células de sarcoma comercial p...

Sarcomas de tejidos blandos (STB) incluyen un espectro de lesiones heterogéneas de origen mesenquimal representa 1% de todos los tumores sólidos1,2, y la nueva clasificación de la Organización Mundial de la salud reconoce la presencia de más de 50 diferentes subtipos3. Entre estos, los histotypes más comunes son sarcoma del adipocito o liposarcoma y el leiomiosarcoma, representando el 15% y 11% de todos adultos STS, respectivamente4,5. Aunque STS puede desarrollar en diferentes partes del cuerpo, las extremidades y retroperitoneo son los sitios más comunes, que ocurren en el 60% y el 20% de los casos, respectivamente6.
La piedra angular de la terapia para la enfermedad localizada es la resección quirúrgica amplia, mientras que los beneficios de la quimioterapia adyuvante y neoadyuvante aún no están claros y son considerados sólo en casos seleccionados7. En el entorno metastásico, la quimioterapia es el estándar de cuidado pero muestra resultados limitados8. Una mejor comprensión de la biología molecular de STS ayudaría a mejorar el diagnóstico diferencial actual, optimizar los tratamientos disponibles e identificar nuevas dianas para el tratamiento.
En este contexto, se ha realizado investigación en cáncer durante muchos años con líneas de células inmortalizadas9. Estos modelos experimentales normalmente son cultivados en monocapa estándar soporta o implantados en roedores inmunodeficientes para establecer modelos de xenoinjerto en vivo 10. Líneas celulares inmortalizadas representan un material manejable y fácil a las tiendas con las que se puede realizar un amplio número de experimentos de investigación. Son, de hecho, el menos costoso y más ampliamente utilizado herramienta de estudios preclínicos11.
Sin embargo, modelos de línea celular en cáncer también tienen algunas limitaciones, por ejemplo prolongada cultura en un sistema de monocapa junto con un número cada vez mayor de pasajes induce fenotípica y deriva genética, que hace menos probable células recapitular tumor clave características. Por otra parte, cultivos de la línea de celulares no reproducir la interacción célula a célula y señalización interferencia de molécula que imitan el comportamiento biológico de los tumores y caracterizar el microambiente tumoral. Estos temas constituyen la base de la brecha existente entre los resultados preclínicos y clínicos12.
Dado lo anterior, ha aumentado el interés en cultivos primarios derivados del paciente13. De hecho, la supresión del tejido maligno y normal reduce el riesgo de perder el fenotipo de la célula de cáncer y de la heterogeneidad, ofreciendo material de partida que es más representativo del microambiente tumoral. Por otra parte, el uso de muestras de tumor fresco cosechado de pacientes sometidos a resección quirúrgica nos permite investigar los tumores individuales y comparar diversas lesiones de la misma parte del cuerpo de un paciente14. Por las razones expuestas, cultivos de células derivadas de tejido proporcionan un valioso material para estudiar tumor Fisiopatología y Farmacología15,16,17, especialmente en el STB en que líneas de células de sarcoma comercialmente disponibles son limitado18. Así hemos optimizado un método para establecer una cultura de célula primaria de STS paciente derivado a partir de la excisión quirúrgica del tumor tejido13,19,20. Nuestro método consiste en desagregar a la muestra de tumor en los fragmentos pequeños de tejido seguidas por la disociación enzimática de tejido durante la noche para obtener una suspensión unicelular. Al día siguiente, la digestión enzimática se detiene mediante la adición de medio fresco de cultivo y la suspensión obtenida se filtra para remover fragmentos de tejido, agregados de la célula y exceso de matriz material o escombros. Por último, una fracción de las células tumorales aisladas es cytospinned sobre portaobjetos de vidrio, fijos y almacenados para análisis posteriores destinadas a confirmar el establecimiento del cultivo primario STS cytomorphological, immunohistochemical y evaluación citogenética molecular (p. ej. análisis de los pescados de MDM2 amplificación representa el estándar diagnóstico diferencial de un liposarcoma bien diferenciado y liposarcoma dedifferentiated) 4. las células restantes se siembran en una cultura estándar monocapa para estudios farmacológicos y perfiles de expresión génica. Todos los experimentos se realizan con bajos pasajes cultivos primarios para evitar la selección de subclones de cáncer específico y analizan por un patólogo experimentado sarcoma. Así hemos creado un humano STS vivo ex modelo13,19,20. Este versátil, fácil de manija modelo podría representar una herramienta útil para diferentes tipos de investigación preclínica, por ejemplo, para identificar nuevos marcadores moleculares para el diagnóstico y pronóstico o para obtener una comprensión más profunda de la actividad y los mecanismos de acción de estándar y nuevos fármacos utilizados en el tratamiento del STB.

<table><tbody><tr><td>DMEM Alta glucosa</td><td>EuroClone</td><td>ECB7501L</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino</td><td>EuroClone</td><td>ECS0180D</td><td></td></tr><tr><td>Glutamina</td><td>Gibco</td><td>25030-024</td><td></td></tr><tr><td>Solución acuosa de paraformaldehído al 4%, grado EM</td><td>Ciencias de la Microscopía Electrónica</td><td>157-4-100</td><td></td></tr><tr><td>Penicilina estreptomicina</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Reactivo de triazol</td><td>Ambion Life-Technologies</td><td>15596018</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina</td><td>EuroClone</td><td>ECB3052D</td><td></td></tr></tbody></table>

establecimiento de un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente

Establishment of a Primary Culture of Patient-derived Soft Tissue Sarcoma

Sarcomas de tejidos blandos (STB) representan un espectro de neoplasias heterogéneas con un difícil diagnóstico, clasificación y gestión. Hasta la fecha, se han identificado más de 50 subtipos histológicos de estos raros tumores sólidos. Así, debido a su extraordinaria diversidad y baja incidencia, nuestra comprensión de la biología de estos tumores es todavía limitada. Paciente derivados de culturas representan la plataforma ideal para el estudio de la farmacología y patofisiología de STS. Así desarrollamos un modelo humano de preclínico de STS a partir de muestras tumorales de pacientes sometidos a resección quirúrgica. Paciente derivado STS cultivos celulares fueron obtenidos de los especímenes quirúrgicos por digestión de colagenasa y aislados por filtración. Las células cuentan, semillas y quedaban durante 14 días en cultivos monocapa estándar y luego procesadas por análisis aguas abajo. Antes de realizar el análisis moleculares o la farmacia, el establecimiento de cultivos primarios STS fue confirmado a través de la evaluación de características cytomorphologic y, cuando esté disponible, marcadores immunohistochemical. Este método representa una herramienta útil 1) para estudiar la historia natural de estas neoplasias pobremente explorados y 2) para probar los efectos de diferentes fármacos en un esfuerzo para aprender más sobre sus mecanismos de acción.

Hemos diseñado un método sencillo para obtener el establecimiento de un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente e informar aquí un ejemplo de los resultados obtenidos en un determinado histotype de STS13. El protocolo fue utilizado para el establecimiento de cultivos primarios de diferentes histotypes de STS como liposarcoma bien-distinguido, dedifferentiated liposarcoma, liposarcoma mixoide, liposarcoma pleomórfico, myxofibrosarcoma, ...

El siguiente protocolo se centra en el establecimiento de un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente (STS). Este modelo podría ayudarnos a entender mejor el fondo molecular y perfil farmacológico de estos raros tumores malignos y podría representar un punto de partida para futuras investigaciones destinadas a mejorar la gestión de STS.

Establecimiento de un cultivo primario de Sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente

Soft tissue sarcomas (STS) represent a spectrum of heterogeneous malignancies with a difficult diagnosis, classification, and management. To date, more ...

El objetivo general de este modelo preclínico humano derivado de tejido tumoral resecado quirúrgicamente es lograr el establecimiento de un cultivo primario de sarcoma de tejido blando derivado del paciente. Este método puede ayudar a responder preguntas clave sobre la fisiopatología del sarcoma de tejido blando y representa una herramienta preclínica importante para predecir la respuesta al tratamiento. La principal ventaja de esta técnica es que se trata de un modelo preclínico totalmente humano.Las implicaciones de esta técnica se extienden hacia el tratamiento del sarcoma de tejidos blandos, ya que este modelo preclínico se puede probar con fármacos innovadores convencionales para investigar su actividad y mecanismo de acción. Aunque este método puede proporcionar información sobre el sarcoma de tejido blando, también se puede aplicar al estudio de la interacción de las células blandas de las células cancerosas. Las personas nuevas en este método tendrán dificultades debido a la heterogeneidad de los tejidos tumorales y al aislamiento de las células tumorales.La demostración visual de este método es fundamental, ya que los pasos iniciales de selección de células de sarcoma de t

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Research

Investigación

JoVE Journal

Cancer Research

Investigación del cáncer

En este artículo se describe la preparación de tejido de melanoma recién obtenido en cultivos de células primarias, y cómo eliminar contaminaciones de los eritrocitos y los fibroblastos de las células tumorales. Por último, se describe cómo...

Paciente celulares derivadas Cultura y aislamiento de CD133<sup&gt; +</sup&gt; Putativos células madre del cáncer de melanoma

Se describen los métodos para crear los tejidos tumorales 3D humanos como sistemas de prueba. Estas tecnologías se basan en un descelularizado Biológica vascularizado Andamios (BioVaSc), las células humanas primarias y una línea de células tumorales, que pueden ser cultivadas bajo condiciones estáticas, así como en condiciones dinámicas en un biorreactor de flujo.

Ingeniería de tejidos de un humano 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Sistema de Prueba de Tumores

Se describe un protocolo para extraer células humanas primarias de un tumor de colon quirúrgico y tejidos normales. A continuación, las células aisladas se cultivan en sustratos elásticos blandos (hidrogeles de poliacrilamida) funcionalizados por una proteína de la matriz extracelular e incrustados con microesferas fluorescentes. La citometría de tracción se realiza para evaluar las tensiones contráctiles celulares.

Aislamiento de células tumorales de colon humanos primarios de tejidos quirúrgicos y cultivándolas Directamente en Elastic sustratos blandos de tracción Citometría

La presencia de células madre del cáncer (CSC) en sarcomas óseos se ha vinculado recientemente a su patogénesis. En este artículo, presentamos el aislamiento de células madre cancerosas a partir de cultivos celulares primarios obtenidos de biopsias humanas de osteosarcoma convencional (OS) utilizando la capacidad de las células madre cancerosas de crecer bajo condiciones no adherentes.

Establecimiento de Cultivos Celulares del Cáncer Humano de osteosarcoma convencional Tallo

Los tumores cutáneos se descartan a menudo después de la cirugía micrográfica de Mohs. Se describe aquí un protocolo que permite al personal de soporte clínico procesar y almacenar eficazmente muestras de tumores cutáneos ( por ejemplo, carcinoma de células escamosas, carcinoma basocelular y melanoma) para aplicaciones de laboratorio aguas abajo sin interferir con las operaciones clínicas.

Establecimiento de un Biorepository basado en la Clínica

Describimos un protocolo detallado para el aislamiento de células que inician tumores de xenoinjertos derivados del paciente de sarcoma humano mediante la clasificación celular activada por fluorescencia, utilizando el antígeno leucocito humano-1 (HLA-1) como marcador negativo, y para la validación y caracterización de estas células que inician tumores HLA-1 negativos.

Aislamiento y caracterización de células que inician tumores a partir de xenoinjertos derivados del paciente de sarcoma

Nos proporcionan un método para la generación, cultivo y análisis sistemático de rebanadas organotypic derivadas de tumores de pulmón murino. También se describe cómo optimizar el grosor de corte y cómo seleccionar las concentraciones de la droga para el tratamiento de rodajas de tumor.

Establecimiento y análisis de segmento de Tumor explantes como prerrequisito para la prueba de diagnóstico

El presente protocolo describe la generación de modelos de cultivo tumoral 3D a partir de células cancerosas primarias y la evaluación de su sensibilidad a los fármacos mediante ensayos de viabilidad celular y exámenes microscópicos.

Establecimiento de esferoides tridimensionales a partir de muestras tumorales derivadas de pacientes y evaluación de su sensibilidad a los fármacos

Aquí se proporciona un protocolo detallado para establecer organoides mamarios humanos a partir de resecciones de tumores de mama derivados de pacientes o tejido mamario normal. El protocolo proporciona instrucciones completas paso a paso para el cultivo, la congelación y la descongelación de organoides mamarios derivados de pacientes humanos.

Establecimiento y cultivo de organoides mamarios derivados de pacientes

Los organoides tumorales han revolucionado la investigación del cáncer y el enfoque de la medicina personalizada. Representan un modelo tumoral clínicamente relevante que permite a los investigadores estar un paso por delante del tumor en la clínica. Este protocolo establece organoides tumorales a partir de muestras frescas de tejido tumoral pancreático y xenoinjertos derivados de pacientes de origen adenocarcinoma de páncreas.

Establecimiento de organoides tumorales derivados del cáncer de páncreas y fibroblastos a partir de tejido fresco

El protocolo describe un método para crear un modelo de organoide de cáncer colorrectal (CCR) derivado del paciente cocultivado con linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) para estudiar sus interacciones y potencial terapéutico. Este modelo proporciona una plataforma preclínica para explorar las respuestas inmunitarias en el microambiente tumoral y predecir la eficacia de la terapia basada en TIL para el tratamiento personalizado del CCR.

Establecimiento de un sistema de cocultivo de organoides tumorales colorrectales derivados de pacientes y linfocitos infiltrantes de tumores (TIL)

Aprenda a establecer un cultivo primario de sarcoma de tejidos blandos derivado de paciente. Este modelo preclínico humano permite estudiar la patofisiología tumoral y evaluar respuestas terapéuticas in vitro.

Establecimiento de un cultivo primario de Sarcoma de tejidos blandos derivados del paciente

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