Name: Un modelo mínimamente invasivo para analizar la fractura endocondral en ratones en condiciones biomecánicas estandarizadas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-22T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: Aprende una técnica quirúrgica mínimamente invasiva con tornillo intramedular para estabilizar fracturas de fémur en ratones CD-1. Este método estandarizado permite analizar la curación ósea endocondral en condiciones biomecánicas controladas.

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Este trabajo fue apoyado por RISystem AG, Davos, Suiza.

Todos los procedimientos fueron realizados según las directrices de institutos nacionales de salud para la utilización de animales de experimentación y siguieron directrices institucionales (Landesamt für Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher Dienst, Saarbrücken, Alemania).
1. preparación de instrumental quirúrgico e implantes
<ol><li>Seleccione una hoja de bisturí (tamaño 15), una esponja pequeña, pinzas finas, una aguja de 27 G, una sutura no reabsorbible 5-0, tijeras y un sostenedor de la aguja en el cuadro de instrumentos microquirúrgicos.</li>
	<li>Desembale el tornillo intramedular, el alambre de guía (0.3/0.2 mm de diámetro, 10 cm de longitud), la broca de centrado (0,5 mm de diámetro) y el taladro de mano (figura 1; véase Tabla de materiales). Nota: El tornillo intramedular (0,5 mm de diámetro, longitud de 17,2 mm) se hace del acero inoxidable de grado médico para su implantación retrógrada en el fémur. El tornillo tiene rosca proximal (0,5 mm de diámetro, 4 mm de longitud) con una nariz (0,2 mm de diámetro, 0,4 mm de longitud) en la punta y el distal en forma de cono cabeza (diámetro de 0,8 mm, 0,9 mm de longitud) para lograr la compresión de la fractura así como estabilidad axial y rotacional.</li>
	<li>Exponer los implantes y los instrumentos quirúrgicos en una solución desinfectante (alcohol de 96%) durante 5 minutos o esterilización (esterilización por vapor, 130 ° C, 25 min.). Después de la desinfección o esterilización, colocar los instrumentos en un paño de operación. Coloque la tela de operación directamente adyacente a la tabla de operación de animales pequeños.</li>
</ol>2. los animales, la anestesia y Analgesia
<ol><li>Elegir la cepa, edad y sexo de los ratones según la pregunta de estudio que se trata. Nota: Para este estudio se emplearon ratones CD-1 machos de 12 a 14 semanas de edad. El peso corporal adecuado para utilizar el tornillo intramedular es entre 25-35 g.</li>
	<li>Anestesiar los ratones con una inyección intraperitoneal de 15 mg/kg xilacina y 75 mg/kg de ketamina. Confirmar la anestesia por presión del dedo del pie. Aplique lubricante ocular para proteger los ojos de los animales de secado durante la anestesia. Después de la inducción de la anestesia, colocar el ratón en un radiador de calor para mantener la temperatura corporal constante. Durante el procedimiento, los animales fueron monitoreados con pizca de repetida del dedo del pie para garantizar un adecuado plano de anestesia.</li>
	<li>Clorhidrato de tramadol en el agua potable (1.0 mg/mL) se aplican para la analgesia desde 1 día antes de la cirugía hasta 3 después de la cirugía. Nota: Prevención infección y Analgesia debe estar de acuerdo con las directrices respectivas del país y de la institución donde los experimentos deben realizarse.</li>
</ol>3. intervención e implantación tornillo intramedular
<ol><li>Antes de la cirugía, afeitarse la pata trasera derecha toda y aplicar una crema depilatoria. Después de 5 min, retirar la crema y limpie la pierna con agua. Luego, aplicar una solución desinfectante con alcohol de 96%. Betadine o clorhexidina puede añadirse al alcohol para garantizar asepsia completa.</li>
	<li>Bajo condiciones asépticas, coloque el ratón en la posición supina sobre la mesa de operación de animales pequeños. Doble la rodilla derecha para permitir un abordaje anterior de los cóndilos de la rodilla. Realizar una incisión de 5 mm parapatelar medial en la rodilla derecha con la hoja de bisturí.</li>
	<li>Movilizar el ligamento patelar con cuidado con la hoja de bisturí y el hisopo. A continuación, cambie la rótula lateralmente con las pinzas finas para exponer la muesca intercondílea del fémur.</li>
	<li>Abra la muesca intercondílea exactamente en el centro del fémur entre ambos cóndilos. Asegúrese de que no debe exceder de 1,0 mm de profundidad para la perforación.<ol>
<li>Inicio manual de perforación a una velocidad lenta y una compensación de 45 ° ventralmente al eje del fémur usando 0,5 mm centrado broca y el taladro de mano (figura 1C y D, figura 2). Durante la perforación, reducir continuamente el ángulo 0 ° de offset (paralela al eje del hueso del fémur). Pare cuando se alcanza una profundidad de 1,0 mm de perforación.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Después de abrir el hueso en la muesca intercondílea, inserte la aguja de 27 G en la cavidad intramedular sobre toda la longitud del fémur. Escarie la cavidad intramedular del fémur manualmente mediante movimientos rotatorios de la aguja de 27 G. Empuje la aguja hacia adelante para perforar el hueso cortical en el mayor trocánter proximal.</li>
	<li>Retire la aguja de 27 G y aplicar la guía a través de la parte distal del fémur.<ol>
<li>Hacer una incisión en la piel con una hoja de bisturí (tamaño 15) proximal sobre el alambre guía y avanzar la guía hasta que ambos extremos de la guía están fuera. Asegúrese de que mantenga el alambre guía en su lugar.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Crear una fractura cerrada definida mediante la guillotina.<ol>
<li>Coloque el ratón en posición lateral con la pierna derecha debajo de la guillotina. Asegúrese de que la parte diafisaria del fémur se coloca en medio de la guillotina.</li>
		<li>Soltar el peso (200 g) de la distancia definida de 25,5 cm.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Controlar la configuración de la fractura y la posición de la fractura así como la posición del alambre guía (figura 3) utilizando el aparato de rayos x (véase Tabla de materiales).</li>
	<li>Conecte el tornillo intramedular con la nariz en el extremo distal de la guía de 0,2 mm e inserte en el fémur bajo presión continua y rotación a la derecha.<ol>
<li>Corte del eje impulsor cuando se logra el suficiente esfuerzo de torsión.</li>
		<li>Retire el alambre guía proximal.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Vuelva a colocar la rótula y fijar el tendón de la rótula a los músculos con una sola sutura utilizando un sintético 5-0, monofilamento, sutura no absorbible de polipropileno. Utilizar suturas individuales del mismo material y tamaño para cerrar la herida. La reducción de los fragmentos y la posición del tornillo radiológico utilizando el aparato de rayos x de control (véase Tabla de materiales).</li>
	<li>Mantener los animales bajo el radiador de calor hasta que se recuperen de la anestesia. No descuide los animales hasta que ha recuperado la conciencia suficiente para mantener el recumbency ventral. Devolver los animales a las jaulas individuales en el Animalario. No devolver los animales a la compañía de otros animales durante las primeras 24 h, aunque han recuperado de la anestesia.</li>
	<li>Controlar los animales con cuidado cada día. Mantener analgesia postoperatoria con tramadol clorhidrato en el agua potable con una dosis de 1.0 mg/mL durante los primeros tres días. Continuar la analgesia si, el día 4 después de la cirugía, los animales aún muestran evidencia de dolor, indicado por vocalización, inquietud, falta de movilidad, falta de novio, postura anormal y la falta de interés normal en un entorno. Terminar la analgesia cuando los animales están libres de dolor.</li>
	<li>Al final del experimento eutanasia al animal por una sobredosis de barbitúricos.</li>
</ol>

<ol><li>Jacenko, O., Olsen, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+mouse+models+in+studies+of+skeletal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Rheumatol+Suppl%22%5BJournal%5D)">Transgenic mouse models in studies of skeletal disorders.</a> J Rheumatol Suppl. 43, 39-41 (1995).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+bone+healing+models%3A+standards%2C+tips%2C+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li>
<li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> J Orthop Res. 2 (1), 97-101 (1984).</li>
<li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+stable+closed+femoral+fracture+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Development of a stable closed femoral fracture model in mice.</a> J Surg Res. 153 (1), 71-75 (2009).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+analysis+of+rotational+stiffness+of+different+osteosynthesis+techniques+in+mouse+femur+fracture%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Ex vivo analysis of rotational stiffness of different osteosynthesis techniques in mouse femur fracture.</a> J Orthop Res. 27 (9), 1152-1156 (2009).</li>
<li>Claes, L., Augat, P., Suger, G., Wilke, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+size+and+stability+of+the+osteotomy+gap+on+the+success+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Influence of size and stability of the osteotomy gap on the success of fracture healing.</a> J Orthop Res. 15 (4), 577-584 (1997).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+healing+process+in+non-stabilized+and+stabilized+femur+fractures+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Orthop+Trauma+Surg%22%5BJournal%5D)">Characterization of the healing process in non-stabilized and stabilized femur fractures in mice.</a> Arch Orthop Trauma Surg. 136 (2), 203-211 (2016).</li>
<li>Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+intramembranous+ossification+during+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">A model for intramembranous ossification during fracture healing.</a> J Orthop Res. 20 (5), 1091-1098 (2002).</li>
<li>Cheung, K. M., Kaluarachi, K., Andrew, G., Lu, W., Chan, D., Cheah, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+externally+fixed+femoral+fracture+model+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">An externally fixed femoral fracture model for mice.</a> J Orthop Res. 21 (4), 685-690 (2003).</li>
<li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+technique+for+internal+fixation+of+femoral+fractures+in+mice%3A+impact+of+stability+on+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">A new technique for internal fixation of femoral fractures in mice: impact of stability on fracture healing.</a> J Biomech. 41 (8), 1689-1696 (2008).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+internal+locking+plate+to+study+intramembranous+bone+healing+in+a+mouse+femur+fracture+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">An internal locking plate to study intramembranous bone healing in a mouse femur fracture model.</a> J Orthop Res. 28 (3), 397-402 (2010).</li>
<li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+LockingMouseNail-a+new+implant+for+standardized+stable+osteosynthesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">The LockingMouseNail-a new implant for standardized stable osteosynthesis in mice.</a> J Surg Res. 169 (2), 220-226 (2011).</li>
<li>Histing, T., Klein, M., Stieger, A., Stenger, D., Steck, R., Matthys, R., Holstein, J. H., Garcia, P., Pohlemann, T., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+to+analyze+metaphyseal+bone+healing+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A new model to analyze metaphyseal bone healing in mice.</a> J Surg Res. 178 (2), 715-721 (2012).</li>
<li>Histing, T., Menger, M. D., Pohlemann, T., Matthys, R., Fritz, T., Garcia, P., Klein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Intramedullary+Locking+Nail+for+Standardized+Fixation+of+Femur+Osteotomies+to+Analyze+Normal+and+Defective+Bone+Healing+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">An Intramedullary Locking Nail for Standardized Fixation of Femur Osteotomies to Analyze Normal and Defective Bone Healing in Mice.</a> J Vis Exp. (117), (2016).</li>
<li>Hiltunen, A., Vuorio, E., Aro, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standardized+experimental+fracture+in+the+mouse+tibia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">A standardized experimental fracture in the mouse tibia.</a> J Orthop Res. 11 (2), 305-312 (1993).</li>
<li>Manigrasso, M. B., O'Connor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+closed+femur+fracture+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Characterization of a closed femur fracture model in mice.</a> J Orthop Trauma. 18 (10), 687-695 (2004).</li>
<li>Holstein, J. H., Menger, M. D., Culemann, U., Meier, C., Pohlemann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+locking+femur+nail+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Development of a locking femur nail for mice.</a> J Biomech. 40 (1), 215-219 (2007).</li>
<li>Claes, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mechanical+factors+on+the+fracture+healing+process%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of mechanical factors on the fracture healing process.</a> Clin Orthop Relat Res. 355 Suppl, S132-S147 (1998).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen intereses financieros que compiten.

Pasos críticos de la intervención quirúrgica son encontrar el punto de entrada correcto para la implantación de tornillo en el centro de los cóndilos del fémur en la muesca intercondílea, así como la óptima orientación de la aguja paralela al eje del hueso para el escariado de la cavidad intramedular. Para evitar una posición de entrada incorrecta, el cirujano debe preparar la muesca hasta que se logra una vista óptima. Para controlar la orientación durante el fresado, el fémur de los ratones se debe sostener con los ded...

Hueso curativos estudios en ratones están en gran demanda debido a un amplio espectro de anticuerpos y animales modificados genéticamente. Estos hechos permiten para estudiar los mecanismos moleculares del hueso curativo1. En los últimos años, diferentes hueso curativo modelos para ratones se han desarrollado2. Estos modelos pueden dividirse en modelos abiertos, en que el hueso es osteotomized usando un acercamiento quirúrgico lateral abierto y en modelos cerrados, en el que se fractura el hueso basados en el modelo de fractura introducido por Bonnares y Einhorn3. Usando esta técnica, una fractura transversal estandarizada puede ser producida por un dispositivo de flexión de 3 puntos e implantes intramedulares pueden insertarse a través de una incisión parapatelar medial pequeño en una técnica mínimamente invasiva, evitando un trauma de tejidos blandos importantes.
El tornillo intramedular puede aplicarse para la estabilización de la fractura cerrada en ratones. El tornillo ofrece estabilidad rotacional y axial. Esto se logra por la compresión de la fractura a través de un hilo proximal y una distal de la cabeza4. Otras ventajas de los tornillos son la simple técnica quirúrgica, implante del bajo grado de invasivity, el bajo peso y, en particular, una mayor estabilidad de condiciones biomecánicas estandarizados y controlados en comparación con otros intramedular implantes de5. De hecho, en los modelos más cerrados de la fractura, los fragmentos se estabilizan por pernos simples, que se asocia con una total falta de estabilidad rotacional y axial y un alto riesgo de pin y también la fractura luxación. Esto puede influir notablemente el proceso de curación, que puede resultar en cicatrización o la formación de la Unión no.
Es bien sabido que la estabilidad de la fijación de la fractura tiene un tremendo impacto en el proceso curativo6,7. Una alta fijación rígida resulta en curación intramembranosa, mientras que una fijación menos rígida, que puede permitir micromovements en la brecha de la fractura, los resultados en la curación endocondral. Estabilización de la fractura con el tornillo intramedular muestra predominante un endocondral la curación con una gran cantidad de tejido de callo, particularmente después de 2 semanas de la curación de la fractura. La posibilidad de cosechar una gran cantidad de tejido de callo permite el análisis de múltiples parámetros mediante diferentes técnicas.
Aquí, Divulgamos sobre el diseño y la aplicación del tornillo intramedular en ratones, así como sus ventajas y desventajas en los estudios experimentales en curación de hueso endocondral normal.

<table><tbody><tr><td>Tornillo de ratón</td><td>RISystem AG</td><td>221.100</td><td></td></tr><tr><td>Alambre guía</td><td>RISystem AG</td><td>521.100</td><td></td></tr><tr><td>Broca de centrado</td><td>RISystem AG</td><td>590,205</td><td></td></tr><tr><td>Taladro manual</td><td>RISystem AG</td><td>390,130</td><td></td></tr><tr><td>Hisopo de algodón (150 mm, cabeza pequeña)</td><td>Fink Walter GmbH</td><td>8822428</td><td></td></tr><tr><td>Sutura (5-0 Prolene)</td><td>Ethicon</td><td>8614H</td><td></td></tr><tr><td>Pinza</td><td>Braun Aesculap AG & CoKG</td><td>BD520R</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras</td><td>Braun Aesculap AG & CoKG</td><td>BC100R</td><td></td></tr><tr><td>Portaagujas</td><td>Braun Aesculap AG & CoKG</td><td>BM024R</td><td></td></tr><tr><td>27 G aguja</td><td>Braun Melsungen AG</td><td>9186182</td><td></td></tr><tr><td>Hoja de bisturí tamaño 15</td><td>Braun Aesculap AG & CoKG</td><td>16600525</td><td></td></tr><tr><td>Radiador de calor</td><td>Sanitas</td><td>605.25</td><td></td></tr><tr><td>Crema depilatoria</td><td>Asid bonz GmbH</td><td>NDXZ10</td><td></td></tr><tr><td>Lubricante ocular</td><td>Bayer Vital GmbH</td><td>2182442</td><td></td></tr><tr><td>Xilacina</td><td>Bayer Vital GmbH 1320422</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>Serumwerke Bernburg</td><td>7005294</td><td></td></tr><tr><td>Tramadol</td><td>Gr& uuml; nenthal GmbH</td><td>2256241</td><td></td></tr><tr><td>Solución de desinfección (SoftaseptN)</td><td>Braun Melsungen AG</td><td>8505018</td><td></td></tr><tr><td>ratones CD-1</td><td>Charles River</td><td>22</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo de rayos X</td><td>Faxitron MX-20, Faxitron X-ray Corporation</td><td>2321A0988</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo de fractura pequeño</td><td>RISystem AG</td><td>891,100</td><td></td></tr></tbody></table>

un modelo mínimamente invasivo para analizar la fractura endocondral en ratones en condiciones biomecánicas estandarizadas

A Minimally Invasive Model to Analyze Endochondral Fracture Healing in Mice Under Standardized Biomechanical Conditions

Modelos de curación ósea son necesarios para analizar los complejos mecanismos de fractura cura para mejorar el tratamiento clínico de la fractura. Durante la última década, un mayor uso de modelos murinos en investigación ortopédica observó, probablemente porque los modelos de ratón ofrecen un gran número de cepas genéticamente y anticuerpos especiales para el análisis de los mecanismos moleculares de la curación de la fractura. Para controlar las condiciones biomecánicas, técnicas de osteosíntesis bien caracterizados son obligatorias, también en ratones. Aquí, Divulgamos sobre el diseño y uso de un hueso cerrado modelo de curación para estabilizar las fracturas de fémur en ratones. El tornillo intramedular, de acero inoxidable de grado médico, ofrece a través de la compresión de la fractura una estabilidad axial y rotacional en comparación a los pines intramedulares simple usa principalmente, que demuestran una total falta de estabilidad axial y rotacional. La estabilidad alcanzada por el tornillo intramedular permite el análisis de la curación endocondral. Una gran cantidad de tejido de callo, recibido después de la estabilización con el tornillo ofrece las condiciones ideales para la cosecha de tejido para análisis bioquímicos y moleculares. Otra ventaja del uso del tornillo es el hecho de que el tornillo puede insertarse en el fémur con una técnica mínimamente invasiva, sin provocar daño a los tejidos blandos. En conclusión, el tornillo es un implante único que idealmente puede ser utilizado en fractura cerrada cura modelos ofreciendo condiciones biomecánicas estandarizadas.

El tiempo de funcionamiento de la incisión cutánea al cierre de la herida era 20 minutos. La cirugía puede realizarse sin un microscopio estéreo. Postoperatoriamente, los animales fueron monitoreados diariamente. Analgesia postoperatoria fue terminada después de 2 días porque ninguno de los animales mostraron evidencia de dolor después de este período de tiempo. Los animales demostraron también carga normal dentro de 2 días después de la cirugía. Infecciones de la herida no se observaron ...

Este protocolo describe una técnica de osteosíntesis mínimamente invasiva utilizando un tornillo intramedular para estandardizado estabilización de fracturas de fémur, que puede utilizarse para analizar el hueso endocondral en ratones.

Un modelo mínimamente invasivo para analizar la fractura endocondral en ratones en condiciones biomecánicas estandarizadas

Bone healing models are necessary to analyze the complex mechanisms of fracture healing to improve clinical fracture treatment. During the last decade, an ...

El objetivo general de esta técnica quirúrgica es proporcionar condiciones estandarizadas para el análisis de la cicatrización de fracturas en ratones. Este método puede ayudar a responder preguntas clave en la investigación de la curación de fracturas, como el papel de diferentes factores de crecimiento en los mecanismos de reparación ósea. La principal ventaja de este procedimiento es que se puede utilizar en una técnica mínimamente invasiva y proporcionar condiciones biomecánicas estandarizadas para el estudio de la cicatrización de fracturas endocondrales en ratones.A continuación, Philipp, un estudiante, demostrará el procedimiento quirúrgico. Comience por asegurarse de que todos los instrumentos y materiales quirúrgicos estériles necesarios estén colocados en un paño de operación directamente adyacente a la mesa de operación de animales pequeños. Para este estudio, se utilizaron ratones machos CD-1 de 12 a 14 semanas de edad.Después de inducir la anestesia con un método aprobado, confirme la anestesia por la falta de respuesta a un pinzamiento en el dedo del pie. Aplique lubricante ocular para proteger los ojos de la sequedad durante la anestesia y coloque el ratón anestesiad

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Los modelos animales se emplean con frecuencia para imitar lesiones óseas graves en la investigación biomédica. Debido a su pequeño tamaño, el establecimiento de lesiones óseas estabilizadas en ratones está más allá de las capacidades de la mayoría de los grupos de investigación. En este trabajo, describimos un método simple para establecer y analizar defectos femorales experimentales en ratones.

A-crítico tamaño femoral Defecto sencillo modelo en ratones

Aunque los modelos de ratón son herramientas invaluables para la ingeniería de tejidos óseos, los modelos de defectos de huesos largos son escasos. Esta necesidad motivó el desarrollo del presente protocolo, que utiliza una placa de bloqueo con cuatro tornillos y una plantilla específica para realizar y estabilizar un defecto femoral, reproducible, de tamaño crítico y de baja morbilidad.

Establecimiento de un defecto segmentario Modelo femoral de tamaño crítico en ratones estabilizado por osteosíntesis Plate

Este protocolo describe una técnica de osteosíntesis que utiliza un clavo de bloqueo intramedular para la fijación estandarizada de osteotomías de fémur, que se puede utilizar para analizar la cicatrización ósea normal y defectuosa en ratones.

Un clavo intramedular de bloqueo para estandarizada fijación del fémur osteotomías para analizar normal y defectuoso Bone Healing en ratones

La evaluación del desarrollo de tejido en el callo de fractura durante la cura de hueso endocondral es esencial para monitorear el proceso de curación. Aquí, Divulgamos el uso de una resonancia magnética (MRI)-compatible con fijador externo para fémur de ratón para permitir MRI las exploraciones durante la regeneración ósea en los ratones.

En Vivo Evaluación del desarrollo del callo de fractura durante la cicatrización ósea en ratones usando un dispositivo de osteosíntesis de MRI-compatible para el fémur de ratón

Este protocolo describe un modelo de ratón de cirugía ortopédica que se ha utilizado para estudiar mecanismos de neuroinflamación postoperatoria y cambios de comportamiento y cuando se combina con la parabiosis, para estudiar la regeneración de los tejidos durante el envejecimiento.

Un modelo de ratón de cirugía ortopédica para el estudio de la disfunción cognitiva postoperatoria y regeneración de los tejidos

El modelo murino fractura cerrada de fémur es una poderosa plataforma para el estudio de fracturas y nuevas estrategias terapéuticas para acelerar la regeneración ósea. El objetivo de este protocolo quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas unilaterales en ratones con una varilla intramedular de acero para estabilizar el fémur.

La generación de fracturas femorales cerradas en ratones: un modelo para el estudio del hueso curativo

Se presenta un método para evaluar la extensión espacial de las lesiones o la muerte de la célula en la superficie articular de articulaciones murinas intactas después de la aplicación de cargas mecánicas controladas o impactos. Este método puede utilizarse para investigar cómo osteoartritis, factores genéticos o los regímenes de carga diferentes afectan la vulnerabilidad de los condrocitos en situ .

Visualización en tiempo real y análisis de la lesión de condrocitos debido a cargas mecánicas en explantes de cartílago murino intacta

Este protocolo describe un método para realizar fracturas en ratones adultos y monitorear el proceso de curación.

Fractura transversal del fémur del ratón con pasador estabilizador

Este protocolo describe un procedimiento quirúrgico para el establecimiento de una fractura diafisaria en el fémur de ratones, que se estabiliza con un alambre intramedular, para estudios de cicatrización de fracturas.

Establecimiento de un modelo de fractura de fémur diafisario en ratones

Este protocolo presenta un método completo y eficiente para analizar la reparación del hueso mandibular. Describimos una técnica reproducible para la fractura mandibular no estabilizada en un modelo de ratón, que permite analizar el proceso de reparación ósea endocondral con un mínimo daño tisular y pérdida ósea.

Técnica menos invasiva para la fractura mandibular no estabilizada en modelos murinos

El modelo de lesión de la médula ósea murina es una herramienta útil para estudiar la osteogénesis postnatal a través de la osificación intramembranosa. Este protocolo quirúrgico simplificado describe el procedimiento de ablación de la médula ósea para la evaluación posterior de la formación de hueso nuevo y las respuestas celulares después de una lesión.

Metodología mejorada para el estudio de la osteogénesis postnatal mediante osificación intramembranosa en un modelo de lesión de médula ósea murina

Aprende una técnica quirúrgica mínimamente invasiva con tornillo intramedular para estabilizar fracturas de fémur en ratones CD-1. Este método estandarizado permite analizar la curación ósea endocondral en condiciones biomecánicas controladas.

Un modelo mínimamente invasivo para analizar la fractura endocondral en ratones en condiciones biomecánicas estandarizadas

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