Name: Caracterización hemodinámica invasiva del síndrome de hipertensión Portal en cirróticos ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: Aprenda a medir la presión portal directamente en ratas cirróticas mediante cateterización y sondas de flujo. Este protocolo permite evaluar parámetros hemodinámicos completos para estudiar la hipertensión portal y probar intervenciones farmacológicas.

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Agradecemos a los veterinarios, enfermeras y cuidadores de animales en el centro de investigación biomédica por su continuo apoyo en nuestros proyectos de investigación. Los autores reconocen la importante entrada de todos los revisores del presente Protocolo. Algunas de las investigaciones fue financiado por el premio"joven Ciencia" de la Sociedad austríaca de Gastroenterología y Hepatología (ÖGGH) PS y el "Skoda Award" de la Sociedad austríaca de medicina interna TR.

<ol><li>Ripoll, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+venous+pressure+gradient+predicts+clinical+decompensation+in+patients+with+compensated+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis.</a> Gastroenterology. 133 (2), 481-488 (2007).</li>
<li>Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+in+the+understanding+of+the+pathophysiological+basis+of+portal+hypertension%3A+How+changes+in+paradigm+are+leading+to+successful+new+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments.</a> J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).</li>
<li>Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+burden+of+liver+disease+in+Europe%3A+a+review+of+available+epidemiological+data%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data.</a> J Hepatol. 58 (3), 593-608 (2013).</li>
<li>Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+Changes+in+Splanchnic+Blood+Vessels+in+Portal+Hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Integrative+Anatomy+and+Evolutionary+Biology%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension.</a> Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291 (6), 699-713 (2008).</li>
<li>Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+hypertension%3A+from+pathophysiology+to+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+International%22%5BJournal%5D)">Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice.</a> Liver International. 25 (6), 1079-1090 (2005).</li>
<li>Franchis, R. d <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Updating+Consensus+in+Portal+Hypertension%3A+Report+of+the+Baveno+III+Consensus+Workshop+on+definitions%2C+methodology+and+therapeutic+strategies+in+portal+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension.</a> Journal of Hepatology. 33 (5), 846-852 (2000).</li>
<li>Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasive+and+non-invasive+techniques+for+detecting+portal+hypertension+and+predicting+variceral+bleeding+in+cirrhosis%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+medicine%22%5BJournal%5D)">Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review.</a> Annals of medicine. 46 (1), 8-17 (2014).</li>
<li>Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+venous+pressure+gradient+measurement%3A+time+to+learn%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn.</a> Indian J Gastroenterol. 27 (2), 74-80 (2008).</li>
<li>Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24480518">Liver cirrhosis.</a> Lancet. 383 (9930), 1749-1761 (2014).</li>
<li>Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17075968">Animal models of portal hypertension.</a> World Journal of Gastroenterology : WJG. 12 (41), 6577-6584 (2006).</li>
<li>Reiberger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sorafenib+attenuates+the+portal+hypertensive+syndrome+in+partial+portal+vein+ligated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats.</a> Journal of Hepatology. 51 (5), 865-873 (2009).</li>
<li>Schwabl, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pioglitazone+decreases+portosystemic+shunting+by+modulating+inflammation+and+angiogenesis+in+cirrhotic+and+non-cirrhotic+portal+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats.</a> Journal of Hepatology. 60 (6), 1135-1142 (2014).</li>
<li>Reiberger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nebivolol+treatment+increases+splanchnic+blood+flow+and+portal+pressure+in+cirrhotic+rats+via+modulation+of+nitric+oxide+signalling%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+International%22%5BJournal%5D)">Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling.</a> Liver International. 33 (4), 561-568 (2013).</li>
<li>Schwabl, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+FXR+agonist+PX20606+ameliorates+portal+hypertension+by+targeting+vascular+remodelling+and+sinusoidal+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction.</a> Journal of Hepatology. 66 (4), 724-733 (2017).</li>
<li>Mandorfer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+virologic+response+to+interferon-free+therapies+ameliorates+HCV-induced+portal+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension.</a> J Hepatol. 65 (4), 692-699 (2016).</li>
<li>Schwabl, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interferon-free+regimens+improve+portal+hypertension+and+histological+necroinflammation+in+HIV%2FHCV+patients+with+advanced+liver+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Aliment+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease.</a> Aliment Pharmacol Ther. 45 (1), 139-149 (2017).</li>
<li>Reiberger, T., Mandorfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta+adrenergic+blockade+and+decompensated+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis.</a> Journal of Hepatology. 66 (4), 849-859 (2017).</li>
<li>Reiberger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carvedilol+for+primary+prophylaxis+of+variceal+bleeding+in+cirrhotic+patients+with+haemodynamic+non-response+to+propranolol%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol.</a> Gut. 62 (11), 1634-1641 (2013).</li>
<li>Reiberger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Austrian+consensus+guidelines+on+the+management+and+treatment+of+portal+hypertension+%28Billroth+III%29%5BTitle%5D)+AND+%22Wiener+klinische+Wochenschrift%22%5BJournal%5D)">Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III).</a> Wiener klinische Wochenschrift. 129 (3), 135-158 (2017).</li>
<li>de Franchis, R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26047908">Expanding consensus in portal hypertension.</a> Journal of Hepatology. 63 (3), 743-752 (2015).</li>
<li>Pinter, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+sorafenib+on+the+portal+hypertensive+syndrome+in+patients+with+liver+cirrhosis+and+hepatocellular+carcinoma+-+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Alimentary+Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma - a pilot study.</a> Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35 (1), 83-91 (2012).</li>
<li>Schwabl, P., Laleman, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+treatment+options+for+portal+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterol+Rep+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Novel treatment options for portal hypertension.</a> Gastroenterol Rep (Oxf). 5 (2), 90-103 (2017).</li>
<li>Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKlein%2C+S+%22Mouse+and+Rat+Models+of+Induction+of+Hepatic+Fibrosis+and+Assessment+of+Portal+Hypertension%22">Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension</a>. , (2017).</li>
<li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRussell%2C+WMS+%22The+Principles+of+Humane+Experimental+Technique%22">The Principles of Humane Experimental Technique</a>. , (1959).</li>
<li>Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ltk.uzh.ch/dam/jcr:e86fe1b1-8b69-40b3-8260-33161bca506b/RAUP_16-06-2016_update.pdf">Routine animal use procedures</a>. , Institute of Veterinary Physiology, University of Zurich, Physiology and Behavior Laboratory, Institute of Food, Nutrition and Health, ETH Zurich. (2016).</li>
<li>Animal Care and Use Program. <a target="_blank" href="https://animalcare.ubc.ca/sites/default/files/documents/Guideline%20-%20Rodent%20Anesthesia%20Analgesia%20Formulary%20%282016%29.pdf">Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information</a>. , The University of British Columbia. (2016).</li>
<li>Davis, J. A. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/0471142301.nsa04bs15/abstract;jsessionid=A71C3C638748DE5A350CD9F88C90533B.f03t01">Current Protocols in Neuroscience</a>. , John Wiley & Sons, Inc. (2001).</li>
<li>Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane%2C+ketamine-xylazine+and+a+combination+of+medetomidine%2C+midazolam+and+fentanyl+on+physiological+variables+continuously+measured+by+telemetry+in+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Veterinary+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats.</a> BMC Veterinary Research. 10 (1), 198(2014).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+anesthetic+agent%2C+depth+of+anesthesia+and+body+temperature+on+cardiovascular+functional+parameters+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat.</a> Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).</li>
<li>Becker, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.gv-solas.de/fileadmin/user_upload/pdf_stellungnahme/Statement_on_anaesthesia_methodologies_2016.pdf">Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits</a>. , GV-SOLAS - German veterinary association for animal welfare. (2016).</li>
</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

PP es el parámetro de resultado principal para la evaluación del síndrome de hipertensión portal y refleja la severidad de la cirrosis subyacente. Deposición de la matriz (es decir, fibrosis) y la vasoconstricción sinusoidal (debido al aumento de expresión hepática de vasoconstrictores y disminución de respuesta a los vasodilatadores) causan mayor IHVR. La importancia de la PP y su impacto en la enfermedad hepática crónica se ha demostrado en múltiples preclínicos11,<sup class=...

PHT se define como presión arterial patológicamente creciente en el sistema venoso portal que puede causar complicaciones graves en pacientes con cirrosis como sangrado variceal y ascitis1. Mientras que la hepática (p. ej., trombosis de la vena porta) y post hepática (p. ej., síndrome de Budd-Chiari) PHT son raros, PHT intrahepática debido a la cirrosis hepática representa la causa más común de ALT2.
En la cirrosis hepática, PP se aumenta sobre todo como consecuencia de la elevada IHVR3. En etapas avanzadas, PHT se agrava por el mayor PVBF debido a mayor gasto cardiaco y disminución de la resistencia vascular sistémica y esplácnica, definiendo el síndrome de hipertensión portal4. Ley de Ohm (ΔP = Q * R) implica que el IHVR y el flujo sanguíneo es proporcional a PP5. En pacientes, la medición directa de los PP es arriesgado y no rutinariamente realizadas; por el contrario, el gradiente de presión venosa hepática (HVPG) se utiliza como una medida indirecta de PP6,7. La HVPG se calcula restando la presión venosa hepática libre (FHVP) de la presión venosa hepática cuña (WHVP), que se miden utilizando un catéter con balón colocado en la vena hepática8. La HVPG fisiológico oscila entre 1 – 5 mmHg, mientras que un HVPG ≥10 mmHg define hipertensión portal clínicamente significativa (CSPH) e indica mayor riesgo de complicaciones relacionadas con el Alt, como sangrado por várices, ascitis y encefalopatía hepática9 . Aunque el PP (es decir, HVPG) es el parámetro más relevante para severidad PHT, información sobre otros componentes de PHT, incluyendo la gravedad de la circulación hiperdinámica (HR, mapa), flujo de sangre arterial esplácnica/mesentérica y IHVR, son fundamentales para obtener una comprensión global de lo distinto mecanismo subyacente de PHT.
Así, en contraste con mediciones indirectas de PP en los seres humanos, la metodología introducida para las ratas ofrece la ventaja de una medida directa de PP y permite la grabación de parámetros hemodinámicas adicionales caracterizan el síndrome de hipertensión portal. Además, la medida directa del PP es una excelente lectura integradora de la cantidad de fibrosis hepática (un determinante de IHVR) y supera algunas limitaciones de cuantificación de la fibrosis relacionada con errores de muestreo de tejido del hígado.
Los modelos de roedores más comúnmente utilizados de PHT cirrótico incluyen ligadura quirúrgica del conducto biliar (BDL), toxina-inducida por la lesión del higado (es decir, por tetracloruro de carbono, tioacetamida o administración de Dimetilnitrosamina) y hígado metabólica inducida por la dieta modelos de la enfermedad. Prehepatic Alt (no cirróticos) puede ser inducida por parcial de la vena porta ligadura (PPVL)10.
Pequeños roedores están bien adaptados para el método presentado, incluyendo ratones, hámsters, ratas o conejos y se asocian con relativamente bajos costos de mantenimiento. A pesar de todas las evaluaciones hemodinámicas son factibles de realizar en ratones, la mejor exactitud y reproducibilidad de los resultados se ven con las ratas o los roedores más grandes debido a la evidente ventaja del tamaño del animal. Además, micro-instrumentos específicos y dispositivos son necesarios para obtener los parámetros hemodinámicos similares en ratones. Por último, las ratas son más robustas con mortalidad y baja morbilidad asociada y por lo tanto, la deserción es probable que baje en ratas que en los ratones.
La metodología presentada es adecuada para la evaluación de tratamientos específicos de enfermedad hepática (es decir, drogas anti-fibróticas o antiinflamatorias) o farmacológica novela acerca de influencia el tono vascular y endotelial biología; y así, probable efecto parámetros hemodinámicos en alt.

<table><tbody><tr><td>Instruments</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>LabChart 7 Pro software</td><td>ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA</td><td>&nbsp;-</td><td>Software</td></tr><tr><td>ML870 PowerLab 8/30</td><td>ADInstruments, Colorado Springs, CO,</td> <td>USA&nbsp;-</td><td>Grabador electrónico multicanal</em</td></tr><tr><td>>MLT0380/D</td><td>ADInstruments, Colorado Springs, CO,</td> <td>USA&nbsp;-</td><td>Transductor de presión (x2: para Presión Portal y Presión Arterial)</td></tr><tr><td>ML112 Amplificador de puente cuádruple</td><td>ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA</td><td>&nbsp;-</td><td>Amplificador de puente</td></tr><tr><td>TS420</td><td>Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA</td>&<td>nbsp;-</td><td>Módulo de caudal</td></tr><tr><td>Investigación Biológica Aparato 7025</td><td>UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italia</td><td>&nbsp;-</td><td>Ventilador</td></tr><tr><td>Vapor 2000</td><td>Dr&auml; ger Medical AG & Co. KG, L&uuml; beck, Alemania</td><td>&nbsp;-</td><td>Vaporizador de isoflurá</td></tr><tr><td>Sondas perivasculares (rata) para sistemas transónicos (arteria mesentérica superior)</td><td>Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, EE. UU.</td><td></td>#MA1PRB<td>Sonda de flujo ultrasónica (1 mm)</td></tr><tr><td>Sondas perivasculares (rata) para sistemas transónicos (vena porta)</td><td>Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, EE. UU.</td><td></td>#MA2PSB<td>Sonda de flujo ultrasónica ( 2mm)</td></tr><tr><td>1º para intubación y 2º para incisiones de piel limpia</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>tijera de Mayo [x2]</td></tr><tr><td>tijera Metzenbaum</td><td>&nbsp;-&nbsp;-</td><td></td><td></td></tr><tr><td>tijera para cutículas</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-&nbsp;-</td><td>p</td></tr><tr><td>. ej. Pinza</td> <td>de tejido Adson Brown&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>Pinzas de tejido</td></tr><tr><td>Pinza de punta ancha de ángulo de 45 grados de alta precisión [x2]</td><td>&nbsp;-&nbsp;-</td><td>&nbsp</td><td>;-</td></tr><tr><td>Hemostático [x4]</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-&nbsp;-</td><td>p</td></tr><tr><td>. ej. Pinza peritoneal Mikulicz</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-<</td><td>em>Pinza curva</td></tr><tr><td>p. ej. pinza Dieffenbach</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>Micro pinza</td></tr>p<tr><td>. ej. microespátula con extremos planos, ancho 4 mm,</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>Micro espátula metálica</td></tr><tr><td>para sutura transbucal en la intubación</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>Portaagujas</em</td></tr><tr><td>>Empuñadura de bisturí</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td></tr><tr><td>selfmade</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>Mesa de intubación</td></tr><tr><td>blut, flexible y con un diámetro adecuado para cánula arterial y venflow</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>Alambre de acero romo</línea</td></tr> <tr><td>arterial modificada em> 20G con Flowstich</td><td>Becton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK</td><td>#682245</td><td>Línea arterial</td></tr><tr><td>Almohadilla térmica</td><td>&nbsp;-&nbsp;-</td><td>&nbsp</td><td>;-</td></tr><tr><td>Sonda de temeratura rectal</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp</td><td>;-</td></tr><tr><td>Calentador salino</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-&nbsp</td><td>;-</td></tr><tr><td>Laringoscopio (específico para el tamaño de un animal, por ejemplo, rata)</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp</td><td>;-&nbsp;-</td></tr><tr><td>Caja de inducción para anestesia inhalatoria</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp</td>;-&<td>nbsp;-</td></tr><tr><td>Escala (capaz de medir mg)</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;</td><td></td>-</tr><tr><td>Cortapelo</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td><td>&nbsp;-</td></tr><tr><td>Nombre </td><td>Company </td><td>Número de catálogo</td><td>Comentarios</td></tr><tr><td>Consumibles </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>p. ej. modificado BD Venflon Pro Safety 14GA</td><td>Becton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Suecia</td><td>#393230</td><td>Catéter venoso periférico (14G)</td></tr><tr><td>Tubo de polietileno de diámetro fino, diámetro interior 0,58 mm, diámetro exterior 0,96 mm, Portex,Smiths</td> <td>Medical International Ltd., Kent, Reino Unido</td><td>#800/100/200</td><td>Tubo de catéter (PE-50)</td></tr><tr><td>p. ej. Omnifix-F Solo</td><td>B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Alemania</td><td>#9161406V</td><td>Jeringa 1 ml</td></tr><tr><td>p. ej. Injekt Solo</td><td>B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Alemania</td><td>#4606051V</td><td>Jeringa 5mL</td></tr><tr><td>p. ej. Injekt Solo</td><td>B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Alemania</td><td>#4606205V</td><td>Jeringa 20mL</td></tr>p<tr><td>. ej. BD Microlance 3, 18G - 1 1/2"</td><td>Becton Dickinson S.A., Fraga, España</td><td>#304622</td><td>Cánula (18G)</td></tr><tr><td>p. ej. BD Microlance 3, 23G - 1"</td><td>Becton Dickinson S.A., Fraga, España</td><td>#300800</td><td>Cánula (23G)</em</td></tr><tr><td>>p. ej. BD Microlance 3, 30G - 1/2"</td> <td>Becton Dickinson S.A., Fraga, España</td><td>#304000</td><td>Cánula (30G) </td></tr><tr><td>p. ej. Leukoplast S</td><td>BSN medical GmbH, Hamburgo,&nbsp; Alemania</td><td>#47619-00</td><td>Cinta adhesiva</td></tr><tr><td>p. ej. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm)</td><td>Lohmann & Rauscher, Viena, Austria</td><td>#10972</td><td>Compresa de gasa (pequeña)</em</td></tr><tr><td>>p. ej. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm)</td><td>Lohmann & Rauscher, Viena, Austria</td><td>#10961</td><td>Compresa de gasa (grande)</td></tr><tr><td>Seda Trenzada negra, USP 4/0, EP 1.5</td><td>SMI AG, St. Vith, Bélgica</td><td>#2021-04</td><td>Sutura (Seda 4/0, EP 1.5)</td></tr><tr><td>e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime</td><td>Johnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Alemania</td><td>#EH7552</td><td>Sutura transbucal</td></tr><tr><td>p. ej. Bastoncillos de algodón (2,2 mm, 15 cm)</td><td>Paul Hartmann AG, Heidenheim, Alemania</td><td>#967936</td><td>Bastoncillos de algodón</td></tr><tr><td>p. ej. Vue Ultrasoundgel</td><td>Optimum Medical Limited, UK#</td><td>1157</td><td>Gel de ultrasonido</td></tr><tr><td>p. ej. Glubran 2</td><td>Gem srl, Viareggio, Italia</td><td>#G-NB2-50</td><td>Pegamento para tejidos</td></tr>p<tr><td>. ej. Bisturí quirúrgico Nr. 10 - acero al carbono</td><td>Swann-Morton, Inglaterra, B.S.</td><td>#202</td><td>Cuchillo de bisturí</td></tr><tr><td>heparina, 5000 i.E./mL (Natriumheparina)</td><td>Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im M&uuml; rztal, Austria</td><td>&nbsp;-</td><td>Heparina</td></tr><tr><td>Florane</td><td>Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, Reino Unido</td><td>&nbsp;-</td><td>Isoflurano</td></tr><tr><td>OeloVital (5g)</td><td>Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria</td><td>&nbsp;-</td><td>Eye gel</td></tr><tr><td>Ketasol</td><td>aniMedica GmbH, Senden-B&ouml; sensell, Alemania</td><td>&nbsp;-</td><td>Ketamina</td></tr><tr><td>Rompun</td><td>Bayer Austria Ges.m.b.H., Viena, Austria</td><td>&nbsp;-</td><td>xilacina</td></tr><tr><td>xilocaína 10% Pumpspray</td><td>AstraZeneca &Ouml; sterreich GmbH, Viena, Austria</td><td>&nbsp;-</td><td>Lidocaine pump spray</td></tr><tr><td>Dipidolor</td><td>Jansen-Cilag Pharma GmbH, Viena, Austria</td><td>&nbsp;-</td><td>Piritramida</td></tr><tr><td>NaCl 0.9% Fresenius, 1L</td><td>Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria</td><td>#13LIP132</td><td>Solución salina fisiológica</td></tr></tbody></table>

caracterización hemodinámica invasiva del síndrome de hipertensión portal en cirróticos ratas

Invasive Hemodynamic Characterization of the Portal-hypertensive Syndrome in Cirrhotic Rats

Se trata de un protocolo detallado que describe mediciones hemodinámicas invasivas en cirróticas ratas para la caracterización del síndrome de hipertensión portal. Hipertensión portal (PHT) debido a la cirrosis es responsable de las complicaciones más severas en pacientes con enfermedad hepática. El cuadro completo del síndrome de hipertensión portal se caracteriza por aumento de la presión portal (PP) debido a la resistencia vascular intrahepática aumentada (IHVR), circulación hiperdinámica y el flujo sanguíneo esplácnico mayor. La vasodilatación arterial esplácnica progresiva y aumento gasto cardiaco con elevada frecuencia cardiaca (FC), presión arterial baja pero caracteriza el síndrome de hipertensión portal.
Nuevas terapias se están desarrollando ese objetivo disminuir PP por o dirigida a IHVR o aumento del flujo sanguíneo esplácnico, pero pueden ocurrir efectos secundarios en la hemodinámica sistémica. Por lo tanto, una caracterización detallada del portal venoso, esplácnico y parámetros hemodinámicos sistémicos, incluyendo medición de PP, flujo de la sangre venosa portal (PVBF), flujo de sangre arterial mesentérica, presión arterial mala (mapa) y HR es necesario para la preclínica evaluación de la eficacia de nuevos tratamientos de PHT. Nuestro artículo video provee al lector con un protocolo estructurado para la realización de mediciones hemodinámicas invasivas en cirróticas ratas. En particular, describimos la cateterización de la arteria femoral y la vena porta a través de una vena ileocólica y la medida del portal venosa y arterial esplácnica flujo mediante sondas de flujo perivascular Doppler-ultrasonido. Se muestran resultados representativos de los modelos de ratón diferentes de PHT.

Dependiendo del modelo animal y la gravedad de la enfermedad del hígado, el grado de PHT y la gravedad del síndrome de hipertensión portal es diferente (figura 7).
El modelo BDL causa cirrosis biliar debido a la colestasis. En consecuencia, PP aumenta con el tiempo y un hiperdinámico circulación desarrolla, como se ha visto un aumento de la HR y disminución del mapa. En los animales cirróticos, SMAB...

Aquí describimos un protocolo detallado para las mediciones invasivas de parámetros hemodinámicos como la presión portal, el flujo sanguíneo esplácnico y hemodinámica sistémica para caracterizar el síndrome de hipertensión portal en ratas.

Caracterización hemodinámica invasiva del síndrome de hipertensión Portal en cirróticos ratas

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. ...

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la fibrosis hepática avanzada y la hipertensión portal. Ofrece una oportunidad única para evaluar enfoques farmacológicos que se dirigen al tono vascular, la fibrogénesis o la disfunción endotelial en ratas con síndrome hipertensivo portal. Las principales ventajas de esta técnica incluyen la medición directa de la presión portal y la oportunidad de obtener parámetros hemodinámicos adicionales en contraste con la medición indirecta de la presión portal por gradiente de presión venosa hepática, HVPG, en pacientes.Comience por sedar a la rata, usando anestesia con isoflurano de corta duración y, opcionalmente, anestésicos adicionales. Proceda rápidamente a la intubación, utilizando un tubo endotraqueal adecuado de fabricación propia. Usa dos dedos para agarrar la lengua y tira de ella suavemente.A continuación, humedece cuidadosamente la zona laríngea con un bastoncillo de algodón empapado en spray de lidocaína. A continuación, inserte suavemente el tubo endotraqueal entre las cuerdas vocales y dentro de la tráquea. Fije el asa endotraqueal mediante una sutura transbucal a través de la mejilla y el asa de cinta adhesiva del tubo.Después de administrar analgesia y anestesia inyectable, aplique ungüento para los ojos. Luego, corte el vello corporal en la región abdominal y ambos muslos internos, y desinfecte la piel. Evalúe la profundidad de la anestesia mediante el reflejo de cierre del párpado y la prueba de pellizco de los dedos del pie antes de cualquier intervención o cirugía.Use pinzas de tejido para levantar la piel de uno de los muslos afeitados por encima de la supuesta ubicación de la arteria femoral. Usa unas tijeras Mayo para extirpar un área de dos centímetros de piel. Luego, use un hemostático para diseccionar sin tamura el complejo arteria-vena-nervio del tejido conectivo.Para una mejor visibilidad del complejo arteria-vena-nervio, la tijera de cutícula se puede usar para eliminar partes de tejido graso. A continuación, utilice dos pinzas de punta amplia de alta precisión, con un ángulo de 45 grados, para separar la arteria femoral de la vena y el nervio femoral. La vena femoral es la estructura más medial y la arteria femoral se encuentra más lateral.Coloque una ligadura en la arteria femoral lo más distal posible y use una pinza curva en la sutura para aplicar una tracción longitudinal suave a la arteria femoral. A continuación, coloque una segunda sutura preanudada en la arteria femoral lo más proximal posible. Comprima la arteria femoral en el extremo proximal de la sección expuesta, utilizando una micropinza para detener temporalmente el flujo sanguíneo arterial.Luego, coloque una espátula de micrometal de soporte debajo de la arteria femoral y use una cánula doblada de calibre 23 para perforar la pared arterial anterior distal a la sección ocluida. Cateterizar cuidadosamente la arteria femoral a través de la perforación con la punta inclinada del catéter hacia arriba. Avance el catéter hasta que llegue a la micropinza.Fije el catéter en su ubicación intraluminal cerrando la ligadura proximal preparada alrededor de la arteria femoral y su catéter introducido. A continuación, abra la micropinza y compruebe si hay flujo sanguíneo arterial pulsátil en el catéter. Fije la posición del catéter a lo largo del vaso, utilizando los extremos de la ligadura distal para evitar la dislocación y asegurar una posición longitudinal del catéter.Utilice la interfaz digital para iniciar el registro de la frecuencia cardíaca y la presión auricular media. Comience por realizar una laparotomía mediana. Primero, levante la capa de piel con pinzas de tejido de cinco a seis centímetros por debajo del xifoides, y use una tijera Mayo para quitar una tira delgada de piel, usándola por encima de la línea alba hasta alcanzar el xifoides.Luego, use pinzas de tejido para levantar la capa muscular en el centro de la línea alba para crear distancia entre la pared abdominal y los órganos esplácnicos. Abrir la cavidad peritoneal mediante una incisión en la pared abdominal con un bisturí en la línea alba. Extienda la incisión a lo largo de la línea alba, a la misma distancia que la capa de piel.A continuación, excave cuidadosamente el intestino con bastoncillos de algodón húmedos. Comience con el ciego y colóquelo sobre una compresa de gasa grande, empapada en solución salina fisiológica estéril colocada junto a la incisión. Envuelva el intestino con la compresa de gasa y asegúrese de que esté humedecido con solución salina fisiológica estéril.El hígado cirrótico ahora debería ser visible. Luego, diseccione la arteria mesentérica superior con dos ganchos de Schwabl romos de fabricación propia, levante la arteria con el primer gancho y coloque el segundo a través del túnel de tejido. Exponga la arteria mesentérica superior a lo largo de una distancia de cinco milímetros para asegurarse de que la sonda de flujo se pueda colocar a su alrededor.A continuación, aplique gel de ultrasonido al sensor de sonda de flujo ultrasónico. Conecte el sensor a la arteria mesentérica esplácnica de modo que quede alineado con la ruta natural de la arteria mesentérica superior. Mida el flujo sanguíneo de la arteria mesentérica superior y evalúe la concordancia de la señal de flujo pulsátil con los picos sistólicos del registro de la arteria femoral.Para medir el flujo sanguíneo de la vena porta, primero ubique y exponga la vena porta en la cara dorsal del mesenterio que está cerca del hilio hepático. Luego, use pinzas de punta ancha de alta precisión, en ángulo de 45 grados, para diseccionar suavemente la vena porta del tejido circundante. Amplíe el túnel de tejido y exponga la vena porta a lo largo de una distancia de cinco a seis milímetros para permitir la colocación de la sonda de flujo perivascular.Aplique gel de ultrasonido al sensor de sonda de flujo ultrasónico y conéctelo a la vena porta alineado con su ruta natural. Luego, cierre la sonda de flujo y comience a registrar el flujo sanguíneo de la vena porta. Para medir la presión portal, humedezca los guantes con solución salina fisiológica y extienda el intestino por los dedos.Optimice la visión del lecho vascular mesentérico cerca del intestino delgado. Insertar el catéter en el tejido mesentérico perforando el peritoneo visceral del mesenterio cerca de la unión vascular elegida para el cateterismo. Luego, avance con cuidado la punta inclinada del catéter más cerca de una unión de la vena ileocólica hasta que se vea una ligera impresión de la unión del vaso.Por último, se debe cateterizar el sistema venoso en línea con la ruta del vaso de unión perforando la pared vascular en el ángulo de cruce de los vasos. Registre todos los parámetros hemodinámicos simultáneamente en condiciones estables durante varios minutos antes de sacrificar al animal. El modelo de ligadura de vías biliares causa cirrosis biliar por colestasis.En consecuencia, la presión portal aumenta con el tiempo y se desarrolla una circulación hiperdinámica, como lo demuestra el aumento de la frecuencia cardíaca y la disminución de la presión arterial media. En los animales cirróticos, la resistencia vascular intrahepática y el flujo sanguíneo arterial mesentérico superior aumentan, mientras que posteriormente el flujo venoso portal aumenta, dependiendo de la cantidad de colateralización portosistémica. Por el contrario, la ligadura parcial de la vena porta causa hipertensión portal prehepática, no cirrótica, que se caracteriza por un aumento inmediato de la presión portal.Sin embargo, durante el curso del tiempo, se desarrollan colaterales portosistémicas que pueden reducir la presión portal. Además, vemos los cambios correspondientes en la presión arterial media y la frecuencia cardíaca. En el caso de los animales sanos operados de forma simulada, sus valores hemodinámicos se mantienen en niveles fisiológicos y no cambian significativamente con el tiempo.La presión portal en animales sanos con SO es de un máximo de cinco a seis milímetros de mercurio. Una vez dominadas, estas técnicas se pueden realizar en 40 a 50 minutos, dependiendo del modelo animal, la necesidad de resolución de problemas y las preparaciones prequirúrgicas óptimas. Durante la realización del procedimiento quirúrgico, es muy importante controlar la temperatura del animal, así como la frecuencia cardíaca y la presión arterial para evaluar el nivel de anestesia.Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo canular la arteria femoral y la vena porta y cómo conectar sondas de flujo de ultrasonido a los vasos sanguíneos esplácnicos de una manera segura que garantice resultados precisos y reproducibles.

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Trasplante ortotópico de hígado en ratas es un modelo experimental indispensable para la investigación biomédica. A continuación les presentamos nuestros procedimientos quirúrgicos de trasplante ortotópico de hígado de rata con la reconstrucción arterial hepática mediante un injerto parcial del 50%.

Procedimientos Quirúrgicos para un modelo de rata de trasplante hepático ortotópico parcial con reconstrucción arterial hepática

Trasplante hepático auxiliar proporciona un soporte temporal en la insuficiencia hepática aguda, hasta que la regeneración del hígado no. El trasplante heterotópico auxiliar hígado (HALT) con arterialización vena porta (PVA) hace una función hepática suficiente. Hemos desarrollado una técnica análoga en la rata, para examinar la influencia de la arterialización de la vena porta en la morfología y la función del injerto.

Heterotópico Rata auxiliar Trasplante de Hígado Con Flujo regulado Portal Vein Arterialización en aguda Insuficiencia Hepática

Esta película muestra cómo adquirir la hemodinámica sistémica y hepática en los ratones. Todo el monitoreo incluye la adquisición de los parámetros vitales, presión arterial sistémica, la presión venosa central, tasa de flujo de la arteria hepática común, y la presión de la vena porta, así como la velocidad de flujo portal en ratones.

Monitoreo de Parámetros sistémicos y hemodinámicos hepática en ratones

La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una enfermedad de las arteriolas pulmonares que conduce a su obliteración y al desarrollo de insuficiencia ventricular derecha. Los modelos de HAP en roedores son fundamentales para comprender la fisiopatología de la HAP. Aquí demostramos la caracterización hemodinámica, con cateterismo cardíaco derecho y ecocardiografía, en ratón y rata.

Hemodinámica Caracterización de roedores modelos de hipertensión arterial pulmonar

Este protocolo describe un procedimiento quirúrgico para crear un modelo de hipertensión arterial pulmonar (HAP) inducida por flujo en ratas y los procedimientos para analizar los principales criterios de valoración hemodinámicos e histológicos en este modelo.

La cirugía de derivación, un cateterismo derecho, y Vascular Morfometría en un modelo de rata de flujo inducido por la hipertensión arterial pulmonar

Inducir la hipertrofia hepática rápida utilizando partición de hígado asociar y ligadura de la vena porta para una hepatectomía Staged (ALPPS) se ha propuesto para la resección de tumores del hígado resecables borderline. Este modelo puede aclarar los mecanismos implicados en la hipertrofia rápida y permite realizar pruebas de drogas que promueven o bloquean la aceleración de la regeneración.

Modelo de la rata de la Asociación de partición hepática y ligadura de la vena porta para procedimiento efectuado hepatectomía (ALPPS)

Aquí, presentamos un protocolo para la medición del gradiente de presión venosa hepática (HVPG), el estándar de oro para diagnosticar la hipertensión del portal clínicamente significativa. Además, describimos cómo realizar una biopsia de hígado transjugular dentro de la misma sesión.

Medición del gradiente de presión venosa hepática y biopsia de hígado transjugular

Aquí, presentamos un protocolo para realizar una evaluación hemodinámica invasiva del ventrículo derecho y la arteria pulmonar en ratones utilizando un enfoque de cirugía de pecho abierto.

Evaluación hemodinámica invasiva para el sistema ventricular derecho y hipertensión arterial pulmonar inducida por hipoxia en ratones

La disfunción hemodinámica en etapa temprana es crítica para el desarrollo de la enfermedad renal. Sin embargo, las metodologías de detección son limitadas. Los avances recientes en la ecografía proporcionan una opción precisa y no invasiva para la detección temprana de la lesión renal. Este estudio describe una metodología ecográfica paso a paso para detectar la disfunción renal utilizando un modelo de nefrotoxicidad inducida por fármacos en ratas.

La detección precoz de la disfunción renal hemodinámico inducido por medicamentos Usando tecnología ecográfica en ratas

Mínimamente invasiva constricción de la aorta transversal (MTC) conserva los elementos esenciales de la constricción de la aorta transversal regular (TAC) al tiempo que elimina el uso de un ventilador con intubación traqueal. Demuestra ser un método altamente deseable para los estudios de alto rendimiento de sobrecarga ventricular izquierda, sobre todo en estudios de traducción.

La constricción aórtica mínimamente invasiva transversal en ratones

Aprenda a medir la presión portal directamente en ratas cirróticas mediante cateterización y sondas de flujo. Este protocolo permite evaluar parámetros hemodinámicos completos para estudiar la hipertensión portal y probar intervenciones farmacológicas.

Caracterización hemodinámica invasiva del síndrome de hipertensión Portal en cirróticos ratas

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