Digestión de proteínas, ultrafiltración y cromatografía por exclusión de tamaño para optimizar el aislamiento de exosomas de suero y Plasma de sangre humana

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13 de abril de 2018

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Aquí, presentamos un protocolo para purificar exosomas de plasma y suero con menor Co purificación de proteínas de la sangre no exosomal. El protocolo optimizado incluye tratamiento con proteasas y ultrafiltración y cromatografía por exclusión de tamaño. Mayor purificación de exosomas beneficios aguas abajo los análisis, incluyendo la cuantificación más exacta de las vesículas y caracterización proteómica.

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Aislamiento de exosomas

Chapters in this video

0:04

Título

1:06

Preparación de la muestra bruta (ya sea plasma o suero) mediante el pelletizado de vesículas grandes y restos celulares

2:04

Digestión de proteínas sanguíneas no exosomales y eliminación de proteínas/péptidos pequeños mediante ultrafiltración por centrifugación

4:21

Purificación de vesículas mediante cromatografía de exclusión molecular (SEC)

5:45

Concentración de exosomas purificados/cuantificación de proteínas totales y cuantificación/determinación del tamaño de los exosomas mediante análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA)

7:09

Resultados: Aumento del rendimiento de vesículas y de marcadores específicos de exosomas tras la purificación

8:15

Conclusión

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