Name: Un modelo de asa Intestinal ligados en pollos libre anestesiados patógenos específicos para el estudio de virulencia de Clostridium Perfringens (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-11T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 21 s
Description: Aprende a crear asas intestinales ligadas en pollos Leghorn libres de patógenos específicos para comparar la virulencia de Clostridium perfringens in situ. Este método quirúrgico reduce significativamente el número de animales necesarios.

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Este trabajo fue financiado por la Cátedra de investigación de aves de corral (M. Boulianne) de la Facultad de medicina veterinaria de la Université de Montréal. Padres y los doctores Boulianne desarrollaron el modelo. Drs. Boulianne y padres realizaron las cirugías. El Dr. Burns ayudó a desarrollar el protocolo de anestesia. Dr. Parent había editado el video y escribió el manuscrito. DRS de Burns, Desrochers y Boulianne editan el manuscrito.

Todos los procedimientos con el uso de animales vivo fueron autorizados por el Comité de ética de la Facultad de medicina veterinaria de la Université de Montréal (CÉUA, 'Comité d' éthique de Deutsch des Animaux').
1. consideraciones antes de la cirugía
<ol><li>Seleccionar pollos de Livorno (SPF) libres de 10 semanas de edad de patógenos específicos para la cirugía. Nota: Su peso debe estar entre 1.0 y 1.2 kg.</li>
	<li>Retirar la alimentación 12 horas antes de los procedimientos para vaciar el tracto intestinal.</li>
	<li>Antes de la cirugía, poner los pollos bajo anestesia general, siguiendo un protocolo verificado por un anestesiólogo. Premedicate cada pollo 15 minutos antes de la cirugía con una inyección intramuscular (IM) de midazolam 1 mg/kg y butorfanol 4 mg/kg. Repetir cada 4 h, la inyección de butorfanol 4 mg/kg IM o cuando los cambios de patrones de respiración y la frecuencia aumenta durante la anestesia. Para la anestesia general, durante todos los procedimientos, administrar isoflurano con una concentración entre 1.5 y 2.5% con un tubo endotraqueal. Nota: El uso de premedicación para sedación y analgesia se recomienda como ellos serán significativamente mejorar la profundidad de la anestesia, reducir la cantidad de anestésicos durante todos los procedimientos, así como permiten a los investigadores controlar los niveles de dolor.</li>
	<li>Monitor de la anestesia mediante el registro de la temperatura corporal, frecuencia cardíaca y Electrocardiograma (ECG), respiratorio tasa y ritmo, saturación de oxígeno, vencidos bióxido de carbono (CO2) y reflejos neurológicos. Nota: Una persona debe asignarse para controlar estos parámetros a lo largo de todos los procedimientos.</li>
	<li>Siga principios de esterilidad a través de los procedimientos quirúrgicos. Asegúrese de que el cirujano y el cirujano asistente vestido con batas estériles, guantes, una máscara y gafas de acuerdo a los protocolos preoperatorios institucionales. Asegúrese de que el cirujano friega las manos con un cepillo estéril de clorhexidina gluconato impregnado hasta el codo con énfasis en cada superficie de dedos y uñas.</li>
	<li>Esterilizar los instrumentos quirúrgicos con un esterilizador.</li>
</ol>2. preparación del terreno quirúrgico
<ol><li>En primer lugar, eliminar manualmente las plumas del abdomen con una tracción suave.</li>
	<li>Limpiar el sitio quirúrgico con un clorhexidina gluconato detergente impregnado estéril cepillo. Frote suavemente la piel desde el centro hacia el exterior para un tiempo total de contacto de 5 minutos sin volver al centro.</li>
	<li>Realizar 3 pasos alternativos en el sitio quirúrgico con solución de gluconato de clorhexidina y alcohol isopropílico utilizando gasas estériles. Nota: El paso debe comenzar desde el centro del campo quirúrgico a las fronteras para evitar la contaminación de las áreas no desinfectados al sitio quirúrgico.</li>
	<li>Coloque el paño quirúrgico estéril sobre el pollo.</li>
</ol>3. extracción del intestino de la cavidad Abdominal
<ol><li>Incidir el paño quirúrgico con unas tijeras para exponer sólo la piel del sitio quirúrgico.</li>
	<li>Haga una incisión en la piel mediante la realización de una incisión de línea media bajo forma de '' L'' con una hoja de bisturí #3.<ol>
<li>Iniciar la primera incisión de 1 cm caudal al esternón y extremo a 1 cm craneal a la cloaca.</li>
		<li>Realizar la segunda incisión perpendicular a la primera incisión. Comenzar desde el extremo caudal de la primera incisión y continuar 5 cm en el lado izquierdo del abdomen siguiendo la línea de la pelvis. Nota: Esta apertura va a crear un colgajo que permite una fácil extracción de los intestinos.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Con las tijeras de cirugía, cortar el peritoneo y los músculos abdominales con el mismo patrón de forma de '' L'' para abrir la cavidad abdominal. Nota: Esto lo expondrá los sacos de aire. Los intestinos se encuentran por debajo de estas estructuras. Sacos de aire debe ser humidificados con gasas saturadas con solución salina estéril 0,85% para evitar la desecación y la posible ruptura durante el procedimiento.</li>
	<li>Esterilización de un robalo gancho en la cavidad abdominal después de la pared abdominal izquierda y funcionan de la manera alrededor de los sacos de aire abdominales.</li>
	<li>Exteriorizar el intestino y estos repartidos en el campo quirúrgico. Nota: Mantenga los intestinos humidificados rociando frecuentemente solución salina estéril 0,9% durante todo el procedimiento. También, pueden colocarse gasas humedecidos con solución salina estéril en los intestinos para evitar desecación.</li>
	<li>Agarra los intestinos con una gasa estéril seca y extraiga con cuidado el intestino por la tracción manual para exponer el yeyuno. Nota: Los recipientes mesentéricos son frágiles y una tensión excesiva que puede conducir a lesiones isquémicas intestinales y afectar grandemente el resultado del procedimiento puede romperse.</li>
</ol>4. fabricación de asas intestinales
<ol><li>Creación de lazo no. 1.<ol>
<li>Colocar una ligadura simple con Poliglactina multifilamento absorbible material sintético en el yeyuno proximal, evitando la ligadura de los vasos mesentéricos principales.</li>
		<li>Colocar una ligadura distal de 2 cm de la ligadura proximal. Nota: Simples ligaduras hechas con material de sutura multifilamento se colocan a lo largo del tracto intestinal para crear segmentos herméticos. Un esquema (figura 1) describe la ubicación de todas las ligaduras. Los lazos consisten en una ligadura proximal y distal, separada por 2 cm.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Creación de interloop Nº 1.<ol>
<li>Colocar una ligadura simple 0,5 cm aborally a la ligadura distal de lazo n º 1. Nota: Entre los bucles sucesivos, hay interloops de 1 cm, es decir, segmentos que una separación física entre los lazos. Para probablemente reducir el posible riesgo de contaminación cruzada de un circuito a otro, una ligadura simple se coloca en medio del interloop (0,5 cm de la ligadura distal y proximal de 2 bucles adyacentes). Esto reduce el riesgo de un posible contaminante se filtró desde un lazo para llegar a la ligadura de un asa adyacente. Estos segmentos no son obligatorios pero disminuirán el riesgo de contaminación cruzada.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Creación de lazos posteriores y interloops.<ol>
<li>Repita los pasos 4.1 y 4.2 para obtener el número de bucles deseados. Nota: En este experimento, se crearon lazos de 9 y 8 interloops. Longitud total ascendió a 26 cm. El número de bucles se puede ajustar según el estudio.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. inyección de cepas de Clostridium perfringens en los lazos
<ol><li>Inyectar con una jeringa estéril y una aguja de 26 G el patógeno en lazo n º 1. Inserte suavemente la aguja en el lado saculaciones del intestino en un ángulo de 45°. Nota: En este experimento, se inyectó 0,2 mL de infusión de cerebro corazón (BHI) que contiene 1 x 106 UFC (unidades formadoras de colonias) de C. perfringens en la fase de crecimiento de registro medio en cada bucle. se inyectaron 5 cepas diferentes en 5 circuitos diferentes y los 4 restantes loops fueron inyectadas con un control negativo que contiene ningunas bacterias (BHI estéril), alternancia de patógenos y bucles BHI estériles.</li>
	<li>Repita el paso 5.1 para inyectar todos los bucles.</li>
	<li>Vuelva a colocar el tracto intestinal en la zona dorsal de la cavidad abdominal, por debajo de los sacos de aire.</li>
</ol>6. cierre de la cavidad Abdominal
<ol><li>La sutura del peritoneo y los músculos abdominales.<ol>
<li>Suturar el peritoneo y los músculos abdominales a lo largo de la pelvis (hecho en el paso 3.3) con un patrón de sutura continua simple con Poliglactina multifilamento absorbible material sintético.</li>
		<li>Suturar el peritoneo y los músculos abdominales desde el esternón a la cloaca (hecha en el paso 3.3. con un patrón de sutura continua simple con Poliglactina multifilamento absorbible material sintético.</li>
	</ol>
</li>
	<li>La sutura de la piel.<ol>
<li>Usando un material multifilamento sintético de Poliglactina y un patrón de sutura continua simple, cerrar la incisión de la piel a lo largo de la pelvis hecha en el paso 3.2.</li>
		<li>Usando el mismo material de ligadura multifilamento y un patrón de sutura continua simple, cerrar la incisión de la piel desde el esternón a la cloaca hecha en el paso 3.2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. conclusión
<ol><li>Después de los procedimientos quirúrgicos, mantenga el pollo bajo anestesia general con el uso apropiado de analgésicos para minimizar el dolor animal durante el tiempo de infección. Continuar la vigilancia anestésica para asegurar un nivel adecuado de anestesia.</li>
	<li>Después de la hora deseada infección, eutanasia humanamente el pollo por dislocación cervical bajo anestesia general. Nota: Para estos procedimientos, el tiempo requerido para inducir lesiones microscópicas con cepas patógenas de C. perfringens fue 7 h.</li>
	<li>Con una hoja de bisturí #3, corte un cm 0,5 a sección de bucle largo de 1 cm y colocarla en formol al 10% para fijación durante la noche e histopatológicos más análisis.</li>
	<li>Con la misma hoja de bisturí, cortar la sección de bucle restante y colocar en un tubo de microcentrífuga estéril para el aislamiento de las cepas de C. perfringens en cada análisis bacteriológicos más lazo para su caracterización genética.</li>
	<li>Repita los pasos 7.2 y 7.3 para todos los bucles cambiando la hoja de bisturí entre cada lazo.</li>
</ol>

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<li>Cooper, K. K., Songer, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virulence+of+Clostridium+perfringens+in+an+experimental+model+of+poultry+necrotic+enteritis%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Virulence of Clostridium perfringens in an experimental model of poultry necrotic enteritis.</a> Veterinary Microbiology. 142 (3-4), 323-328 (2010).</li>
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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Modelos de asas intestinales se han descrito en numerosas especies para estudiar la interacción huésped-patógeno y patogenia de las enfermedades causadas por varios patógenos intestinales, como Clostridium perfringens, Clostridium difficile y Enterica de las salmonelas7,9,13,14,15. También se ha utilizado para analizar la respuesta i...

El uso de modelos animales para estudiar enfermedades infecciosas que afectan a los seres humanos y animales es una herramienta central en la evaluación de factores de virulencia, regulación de la patogenia de una enfermedad específica, así como a elaborar estrategias para prevenir o curar enfermedades1. A pesar de numerosas ventajas de la utilización de modelos animales para estudiar diversas enfermedades, han surgido preocupaciones éticas con respecto a esta práctica. Los investigadores deben minimizar el uso de animales y obtención de resultados significativos y válidos. El concepto de los 3 principios de Rs (reemplazar, reducir y refinar) fue elaborado para asegurar que en dichos estudios se abordaron temas de bienestar. En estudios de NE de pollo, en vivo pollo modelos se utilizan para investigar la etiología, prevención y tratamientos de esta condición2,3,4,5. Las cepas patógenas de C. perfringens que llevan factores de virulencia específicos, tales como la RedB toxina6, son administradas para causar enteritis necrótica en pollos7. Por lo tanto, el principio de sustitución es difícil de lograr en este caso como estos factores de virulencia pueden no ser tan críticos en otras especies animales. Mayoría de los modelos de enteritis necrótica en los pollos utiliza una combinación de factores de riesgo, tales como coccidiosis y alterado dieta para inducir enteritis necrótica seguida por sonda nasogástrica del caldo de cultivo que contienen grandes cantidades de C. perfringens2. Estos modelos inducirán la enfermedad en un gran número de pollos, y la mortalidad puede ser importante en estos ensayos8, así levantando preocupaciones acerca de los principios de reducción y refinamiento en la investigación animal.
Modelos de lazos ligados intestinal son una alternativa deseable para el estudio de enfermedades inducidas por patógenos intestinales en relación con el principio de reducción y refinamiento. En estos modelos, se crean segmentos de intestino llamados 'loops' mediante la colocación de ligaduras a lo largo del tracto intestinal para formar compartimentos independientes y herméticos donde patógenos pueden inyectar solo9 o con otras moléculas, tales como candidatos vacunales 10 , 11. los patógenos de interés estén en estrecho contacto con las células intestinales y que después de algunas horas de tiempo de infección, las muestras intestinales pueden ser recuperadas para su posterior análisis. Esto permite el uso de múltiples grupos de control y tratamiento en el mismo animal. Análisis estadístico puede realizarse con modelos de medidas repetidas, que aumenta el poder de discriminación entre grupos y reduce el número de gallinas necesarios en comparación con los ensayos orales gavage. También, procedimientos quirúrgicos y los tiempos de infección subsecuente se realizan bajo anestesia general continua y analgesia, por lo tanto, reducir al mínimo el dolor animal. Trompas de lazo cerrado están una plantilla ideal para reducir el número de host y crear un sistema más humano en la investigación animal.
Modelos de lazos ligados intestinal son bien descritos en varias especies, tales como terneros, conejos y ratones2,9, pero mal descritos en pollos7. Para un uso óptimo de este modelo quirúrgico, ejecución y la técnica adecuada son esenciales para la creación de bucles intestinales ligados para evitar daños a la integridad intestinal. El objetivo de este manuscrito es describir un método paso a paso en la creación de múltiples asas intestinales en un modelo de pollo. Esta técnica está limitada por la habilidad del cirujano y la experiencia, como procedimientos precisos son esenciales para el éxito del proyecto.

<table><tbody><tr><td>EZ-Scrub 747</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td></td> 4<td>% gluconato de clorhexidina detergente impregnado de detergente. No hay número de catálogo disponible. Dirección web: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes&nbsp;</td></tr><tr><td>Alcohol isopropílico 70% USP 4 L</td><td>Alcohol isopropílico comercial</td><td>P016IP70</td><td>Dirección web: http://www.comalc.com/products/</td></tr> <tr><td>Solución</td> de gluconato de clorhexidina <td>Sigma-Aldrich</td><td>282227-1G</td><td>, debe diluirse al 4%. Dirección web: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr&region=CA&gclid=EAIaIQ obChMI8vHr4_OY1wIV3rrACh2Z WQKuEAAYAiAAEgLKx_D_BwE</td></tr><tr><td>Cortina quirúrgica pequeña (27 pulgadas x 24 pulgadas) con 3 x 6 pulgadas Fenestración</td><td>Productos Especializados Veterinarios</td><td>32724</td><td>Dirección web: http://www.vetspecialtyproducts.com/index.cfm?fuseaction=ecommercecatalog. detail&productgroup_id=15</td></tr><tr><td>Hojas de bisturí #3</td><td>Swann-Morton</td><td>301</td><td>Dirección web: https://www.swann-morton.com/product/16.php</td></tr><tr><td>Solución salina estéril NaCl 0.9%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8776-100ML</td><td>Dirección web: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s8776?lang=fr&region=CA</td></tr><tr><td>Vicryl 3-0</td><td>Ethicon</td><td>D9003</td><td>Material de sutura absorbible multifilamento de poliglactina. Dirección web: http://www.ethicon.com/healthcare-professionals/products/wound-closure/absorbable-sutures/coated-vicryl-polyglactin-910-suture</td></tr><tr><td>Jeringa de 1 ml con aguja de 26G</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>329652</td><td>Dirección web: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/diabetes-care/insulin-syringes/bd-1-ml-conventional-insulin-syringes</td></tr><tr><td>Brain Heart Infusion</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1104930500</td><td>Dirección web: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/mm/110493?lang=fr&region=CA&cm_sp=Insite-_-prodRecCold_xorders-_-prodRecCold2-1</td></tr><tr><td>tubo Eppendorf</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T9661-500EA</td><td>Tubo de microcentrífuga. Dirección web: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t9661?lang=fr&region=CA&gclid=EAIaIQ obChMI-YizzfiY1wIVRkCGCh 30SQjuEAAYAiAAEgLK5fD_BwE</td></tr><tr><td>Solución de formol, neutro tamponado, 10%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT501128-4L</td><td>Relación tejido: formol de 1:10 para una fijación adecuada. Dirección web: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr&region=CA</td></tr><tr><td>Clostridium perfringens cepas</td><td>Universit&eacute; de Montr&eacute; al, Chaire en recherche avicole</td><td>N/A</td><td>Específico para cada laboratorio, disponible previa solicitud al autor correspondiente</td></tr></tbody></table>

un modelo de asa intestinal ligados en pollos libre anestesiados patógenos específicos para el estudio de virulencia de clostridium perfringens

A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence

Enteritis necrótica fue estudiada en pollos utilizando varios en vivo modelos de infección. La mayoría de éstos utiliza una combinación de factores predisponentes, tales como coccidiosis y dieta, con sonda nasogástrica o administración a través de la alimentación usando Clostridium perfringens. En estos modelos, la comparación de múltiples cepas de C. perfringens para estudios de virulencia requiere un gran número de hosts para obtener resultados significativos. Durante el curso del estudio de la mortalidad puede ser alta dependiendo del modelo experimental, por lo tanto, levantando preocupaciones éticas sobre el bienestar de los animales en la investigación. El desarrollo de nuevos modelos de infección que requieran menos animales para estudiar la patogenesia, pero proporciona resultados válidos y estadísticamente significativos, es importante en la reducción del uso de animales en investigación. Modelos de asa intestinal ligados se han utilizado para estudiar las infecciones clostridiales en diversas especies como ratones, conejos y terneros. Después de procedimientos quirúrgicos para crear segmentos ligados lazo, cepas de C. perfringens se inyectan directamente en los lazos para establecer un contacto cercano entre las bacterias y la mucosa intestinal. Se toman muestras de intestino delgado y contenido luminal en la terminación de los procedimientos después de unas horas. Múltiples cepas bacterianas pueden ser inoculadas en cada animal, por lo tanto reduciendo el número de sujetos necesarios en los experimentos. También, los procedimientos se realizan bajo anestesia general para reducir el dolor animal. En los pollos, este modelo sería más adecuado que la administración oral para comparar la patogenicidad de C. perfringens cepa porque se necesitan menos animales, factores predisponentes no deben inducir a la enfermedad y dolor se controla con analgésicos . El modelo de asa intestinal ligados está pobremente descrito en pollos y estandarización es esencial para su uso óptimo. Este manuscrito ofrece todos los pasos necesarios para crear numerosos bucles ligados intestinales en pollos y aporta información sobre los puntos críticos para obtener resultados válidos.

Figura 1muestra un esquema de las asas intestinales 9 y 8 interloops. En este modelo, se crean un total de 9 circuitos y 8 interloops con ligaduras simples. Un bucle consiste en ligaduras proximales y distales, separadas por 2 cm de la ligadura proximal. Dos bucles adyacentes están separados por un interloop de 1 cm. Para disminuir el posible riesgo de contaminación cruzada entre bucles por la fuga de una ligadura, una ligadura interloop se coloca a medio cam...

Aquí presentamos un protocolo quirúrgico crear «loops ligados intestinales» en intestino de pollo. Este procedimiento permite la comparación de virulencia en situ en un único host de varias cepas de Clostridium perfringens . Este método disminuye marcadamente el número de pollos generalmente necesarios para experimentos similares en vivo .

Un modelo de asa Intestinal ligados en pollos libre anestesiados patógenos específicos para el estudio de virulencia de Clostridium Perfringens

Necrotic enteritis was studied in chickens using various in vivo infection models. Most of these use a combination of predisposing factors, such as ...

Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo de la investigación de la enteritis necrótica de pollo. Como comparar la virulencia de cepas específicas de Clostridium perfringens que causan esta enfermedad. La principal ventaja de esta técnica es que reduce notablemente el número de pollos generalmente necesarios para experimentos ambivore similares.Si bien este método puede proporcionar información sobre el potencial de virulencia de las cepas de Clostridium perfringens, también se puede aplicar a otros patógenos intestinales como Clostridium difficile, o Salmonella enterica. Generalmente, los individuos nuevos en este método lucharán porque los procedimientos quirúrgicos necesitan entrenamiento específico y sólo deben ser realizados por aquellos que han adquirido habilidades como suturar, una técnica antes del experimento. Después de anestesiar un pollo sin piernas libre de patógenos de 10 semanas de edad, configure los monitores para mediciones vitales y comience a eliminar manualmente las plumas del abdomen mediante una tracción suave.A continuación, frote el sitio quirúrgico usando gluconato de clorhexidina con un cepillo de cerdas suaves. Frote suavemente la

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Medicine

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Se describe un nuevo método quirúrgico para la cateterización "asas intestinales" en el íleon de los ovinos. Una vez que los animales se han recuperado de la cirugía y han limpiado los antibióticos y analgésicos, múltiples tratamientos pueden ser depositados directamente en los bucles a través de los catéteres.

La cateterización de asas intestinales en rumiantes

El modelo de ratón de la ligadura y punción cecal como una herramienta valiosa para el estudio de la sepsis humana.

La ligadura cecal punción

La sepsis se refiere a un síndrome de respuesta inflamatoria sistémica resultante de una infección microbiana, y puede ser simulado por una técnica quirúrgica denomina ligadura cecal y punción (CLP). Aquí se describe un método para utilizar CLP inducida modelo animal para cribar hierbas medicinales para agentes terapéuticos.

El uso de modelos animales de sepsis para evaluar nuevas terapias a base de plantas

Fuente: Winston, J. A., et al. Modelo murino tratado con cefoperazona de la cepa clínicamente relevante de Clostridium difficile R20291.  J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo muestra el procedimiento para inocular ratones pretratados con antibióticos con esporas de Clostridium difficile para establecer un modelo murino de infección que estudie la patogénesis y las respuestas del huésped.

Establecimiento de un modelo murino de infección por Clostridium difficile

Este video muestra la generación de un modelo de bucle ileal para estudiar la permeabilidad intestinal en un modelo de ratón. Este método proporciona un modelo vivo para comprender la función de la barrera epitelial y la consiguiente respuesta inmunitaria.

Modelo de asa ileal de ratón: un modelo quirúrgico para estudiar la permeabilidad intestinal en el ratón

En este video, describimos un procedimiento quirúrgico para generar un bucle de colon proximal de ratón o un segmento pcLoop seguido de una inyección intraluminal de marcadores fluorescentes en el segmento para estudiar la permeabilidad epitelial intestinal.

Generación de un modelo de asa de colon proximal en ratón: un procedimiento quirúrgico para generar asa de colon proximal y medir la permeabilidad intestinal mediante la detección de marcadores fluorescentes en suero después de la inyección intraluminal

Citrobacter infección rodentium ofrece un valioso modelo para estudiar las infecciones bacterianas entéricas, así como respuestas inmunes del huésped y la colitis en ratones. Este protocolo describe la medición de la integridad de la barrera, la carga de patógenos y el daño histológico que permita la caracterización detallada de las contribuciones patógeno y del huésped a la colitis infecciosa murino.

La<em&gt; Citrobacter rodentium</em&gt; Mouse Modelo: Estudiar Contribuciones patógeno y del huésped a la colitis infecciosa

La sepsis experimental puede ser inducida en ratones usando el método (CLP) ligadura y punción cecal. Los protocolos actuales para evaluar la autofagia in vivo en el contexto de la sepsis inducida por CLP se presentan aquí: Un protocolo para la medición de la autofagia utilizando ratones (GFP)-LC3, y de un protocolo para la medición de la formación de autofagosoma por microscopía electrónica.

La ligadura y punción cecal inducida por sepsis como un modelo para estudiar la autofagia en ratones

La función epitelial intestinal desregulada de la barrera y las inmunorespuestas son sellos de la enfermedad de intestino inflamatoria que siguen siendo investigados mal debido a una carencia de modelos fisiológicos. Aquí, se describe un modelo de asa intestinal de ratón que emplea un segmento intestinal bien vascularizado y exteriorizado para estudiar la permeabilidad de la mucosa y el reclutamiento de leucocitos in vivo.

Evaluación Funcional De La Permeabilidad Intestinal Y La Migración Transepitelial Neutrófilo En Ratones Usando Un Modelo De Bucle Intestinal Estandarizado

Este protocolo presenta los detalles operatorios de la ligadura y punción cecal (CLP) en un modelo de sepsis en ratones. CLP es una de las técnicas más utilizadas para crear un modelo animal de sepsis. Por lo tanto, se requiere un protocolo CLP estandarizado para el logro de resultados de investigación confiables.

Evaluación de un biomarcador fiable en un modelo de sepsis de sepsis inducida por punción cecal y ligadura cecal

Describimos un modelo murino de íleo postoperatorio generado por manipulación intestinal. Se evaluó la función del tránsito gastrointestinal, los cambios patológicos y la activación de las células inmunitarias 24 h después de la cirugía.

Modelo murino de íleo postoperatorio

Aprende a crear asas intestinales ligadas en pollos Leghorn libres de patógenos específicos para comparar la virulencia de Clostridium perfringens in situ. Este método quirúrgico reduce significativamente el número de animales necesarios.

Un modelo de asa Intestinal ligados en pollos libre anestesiados patógenos específicos para el estudio de virulencia de Clostridium Perfringens (Video) | JoVE Journal

Un modelo de asa Intestinal ligados en pollos libre anestesiados patógenos específicos para el estudio de virulencia de Clostridium Perfringens

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