Medición activa y pasiva mansedumbre por separado en ratones

Este método puede evaluar el nivel de mansedumbre en cada ratón, y los datos serán muy útiles para estudios posteriores sobre la mansedumbre, como el mapeo genético de genes relacionados con la mansedumbre. La principal ventaja de esta técnica es que puede evaluar dos componentes principales de la mansedumbre: la mansedumbre activa y la mansedumbre pasiva, por separado, mediante el uso de este método. El Sr. Hiromichi Nagayama, estudiante de posgrado, y la Sra. Motoko Nihei, técnica de mi laboratorio, harán una demostración del procedimiento.

Para comenzar, encienda la cámara digital e inicie la grabación. Luego, use un par de pinzas grandes para levantar suavemente al ratón por la cola. Transfiera el ratón de su jaula de origen al centro del aparato de campo abierto.

Después de poner en marcha el cronómetro, coloque una mano en la esquina inferior izquierda del aparato. Con la palma hacia arriba, mueve los dedos, lenta y firmemente. Lentamente, mueva la mano hacia el mouse y deténgase a 10 centímetros del costado del cuerpo del mouse.

Mantenga esta distancia si el ratón intenta alejarse. Si el mouse se acerca a la mano, mantenga la mano en la misma posición y continúe moviendo los dedos lenta y constantemente. Retire el ratón con la mano libre si intenta trepar por el brazo.

Después de un minuto, concluya la prueba. Después de colocar el mouse en el aparato, coloque la mano izquierda en el aparato. Luego, mueva lenta y constantemente la mano hacia el mouse y toque suavemente el mouse con las yemas de los dedos.

Continúe tocando el mouse con las yemas de los dedos hasta que se aleje. Cuando el ratón intente romper el contacto, sígalo con la mano y reinicie el contacto. Concluya la prueba después de un minuto.

Inmediatamente después de que concluya la prueba anterior, use un par de pinzas grandes para levantar el mouse por la cola y colóquelo suavemente en la palma de la mano izquierda. Acaricie suavemente el ratón con el pulgar izquierdo, hasta que salga de la mano. A continuación, vuelva a colocar el ratón en la palma de la mano con las pinzas.

Después de la tercera prueba, detenga la grabación de video y pese el mouse. Después de devolver al ratón a su jaula de origen, registre la cantidad de heces y orina que quedan en el campo abierto del aparato. A continuación, limpie el aparato y los guantes con una toalla de papel empapada en desinfectante de yodóforo al 0,2% y limpie el aparato con la toalla de papel seca.

Después de asignar teclas para cada índice de comportamiento, inicie el software tanaMove. A continuación, arrastre y suelte el archivo de video que se analizará en la ventana. Confirme que el archivo está cargado y que la información del archivo de datos.

La caja CSV es correcta. Haga clic en el botón Listo e introduzca las teclas asignadas para cada índice de comportamiento en la ventana siguiente. Luego, haga clic en el botón Reproducir para iniciar el archivo de video y Detener para pausarlo.

Presione A cuando se observe que el mouse se dirige hacia o se acerca a la mano. Presione R cuando se observe que el mouse se mueve sin dirigirse hacia la mano durante la prueba de mansedumbre activa. Presione y mantenga presionado W cuando se escuche el sonido del temporizador a los 60 segundos para marcar el final de la prueba de mansedumbre activa.

Cuando la mano izquierda entre en el encuadre, inicie el análisis para la prueba de domesticación pasiva. Presione A cuando se observe que el mouse se dirige hacia la mano y R cuando se observa que el mouse se desplaza sin dirigirse hacia la mano. Luego, mantenga presionado W cuando se escuche el sonido del temporizador a los 60 segundos.

Inicie el análisis de mansedumbre pasiva cuando se observe que la mano izquierda entra en el encuadre. Mientras se reproduce el video, presione A cuando se observe que el mouse se acerca a la mano y R cuando se observe que el mouse se mueve sin dirigirse hacia la mano. Una vez más, presione W cuando se escuche el temporizador a los 60 segundos.

Después de esto, presione T cada vez que el mouse permanezca en la mano durante la prueba. Una vez finalizada la prueba, haga clic en Detener. A continuación, haga clic en el botón Atrás para activar una nueva ventana e introduzca un nuevo nombre de archivo para la entrada de datos CSV.

A continuación, haga clic en el botón Listo e introduzca las teclas adecuadas en la nueva ventana. A continuación, haz clic en el botón Reproducir para reiniciar el vídeo e iniciar el análisis de la prueba de domesticación activa. Mientras se reproduce el vídeo, pulse T cada vez que el ratón se ponga en contacto con el controlador de forma voluntaria.

Cuando el temporizador suene a los 60 segundos, mantenga presionado W. Durante la prueba de domesticación pasiva, presione T cuando el mouse permita que el controlador toque su cuerpo. Luego, mantenga presionado W cuando el temporizador suene después de 60 segundos. Después de esto, haga clic en el botón Detener y luego en el botón Atrás antes de ingresar un nombre de archivo para la salida de datos CSV.

A continuación, haga clic en el botón Listo para activar una nueva ventana para ingresar las teclas asignadas. A continuación, haz clic en Jugar para comenzar la prueba de domesticación activa. Cuando se observe que el mouse salta, presione J.Luego, presione W cuando suene el temporizador después de 60 segundos.

Haga clic en el botón Detener para detener la observación de video y el temporizador vuelve a sonar a los 60 segundos. A continuación, haga clic en el botón Atrás e introduzca un nombre de archivo para la salida de datos CSV. A continuación, guarde todos los archivos de datos sin procesar en la carpeta que contiene el archivo complementario dos.

Abra el archivo dos complementario y haga clic en el botón Resumir. Por último, guarde los resultados como un archivo separado para posteriores análisis. Mediante la cría selectiva, se produjeron ratones con un alto nivel de mansedumbre activa.

Los ratones de los grupos de cría selectiva obtuvieron puntuaciones más altas en la prueba de mansedumbre activa, exhibiendo duraciones más largas de contacto con la mano humana que los ratones de control. Los ratones de los dos grupos no difirieron significativamente en el rumbo, la locomoción o la duración del salto. Sin embargo, los ratones seleccionados obtuvieron puntuaciones más altas en la prueba de domesticación pasiva.

Además, los ratones seleccionados permanecieron en una mano humana durante mucho más tiempo que los ratones de control en la prueba Stay-On-Hand. Al intentar este procedimiento, es importante recordar que debe evitar manipular a los ratones hasta realizar la prueba de mansedumbre, ya que la experiencia de manejo puede afectar significativamente la mansedumbre de cada ratón.