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Medida sensible de la mitofagia por reportero fluorescente flujo Cytometry usando el pH-dependien...
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JoVE Journal Biology
Sensitive Measurement of Mitophagy by Flow Cytometry Using the pH-dependent Fluorescent Reporter mt-Keima

Medida sensible de la mitofagia por reportero fluorescente flujo Cytometry usando el pH-dependiente mt-Keima

Full Text
15,755 Views
09:13 min
August 12, 2018

DOI: 10.3791/58099-v

Jee-Hyun Um*1,2, Young Yeon Kim*1,2, Toren Finkel3, Jeanho Yun1,2

1Peripheral Neuropathy Research Center, College of Medicine,Dong-A University, 2Department of Biochemistry, College of Medicine,Dong-A University, 3Aging Institute, Department of Medicine,University of Pittsburgh School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Mitofagia, la degradación selectiva de las mitocondrias, se ha implicado en la homeostasis mitocondrial y desregulado en varias enfermedades humanas. Sin embargo, convenientes métodos experimentales para medir la actividad de la mitofagia son muy limitados. Presentamos un ensayo sensible para medir la actividad de la mitofagia mediante citometría de flujo.

El objetivo general de este procedimiento es proporcionar una técnica sensible para medir la actividad de la mitofagia celular mediante citometría de flujo. Aquí demostramos que este método se utilizó con éxito para evaluar el aumento dramático en la mitofagia de las células HeLa, después del tratamiento con CCCP, un desacoplador mitocondrial. Esta técnica permite medir la actividad de los mitófagos de forma muy rápida y sencilla.

La principal ventaja de esta técnica es que se puede medir con sensibilidad la actividad de los mitófagos en células vivas sin necesidad de tinción adicional. Por lo tanto, esta técnica podrá, en última instancia, ayudar a comprender el mecanismo y el papel fisiológico de los mitófagos. Jee-Hyun Um y Young Yeon Kim de mi laboratorio demostrarán el procedimiento.

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