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Un modelo con ratones Syngeneic células B linfoma de evaluación preclínica de las células de T au...
Un modelo con ratones Syngeneic células B linfoma de evaluación preclínica de las células de T au...
JoVE Journal
Cancer Research
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JoVE Journal Cancer Research
A Syngeneic Mouse B-Cell Lymphoma Model for Pre-Clinical Evaluation of CD19 CAR T Cells

Un modelo con ratones Syngeneic células B linfoma de evaluación preclínica de las células de T automóvil CD19

Full Text
15,677 Views
12:16 min
October 16, 2018

DOI: 10.3791/58492-v

Gray Kueberuwa1, Weiming Zheng1, Milena Kalaitsidou1, David E. Gilham1,2, Robert E. Hawkins1

1Manchester Cancer Research Centre Building, Department Cancer Sciences,University of Manchester, 2Celyad

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article presents a protocol for producing murine CD19 CAR T cells through retroviral transduction. It explores their application as a therapy against established syngeneic A20 B-cell lymphoma in BALB/c mice, with or without lymphodepleting pre-conditioning.

Key Study Components

Area of Science

  • Immunotherapy
  • Oncology
  • Cellular Biology

Background

  • CAR T-cell therapy is a promising approach in cancer treatment.
  • Understanding the interaction between CAR T-cells and endogenous immune cells is crucial.
  • The study focuses on comparing lympho-replete and lympho-depleted settings.
  • Insights gained may be applicable to solid tumors and other therapeutic targets.

Purpose of Study

  • To develop a protocol for generating CD19 CAR T cells.
  • To evaluate the efficacy of these cells in treating lymphoma.
  • To investigate the role of the immune environment in therapy outcomes.

Methods Used

  • Preparation of media and cells as per the outlined protocol.
  • Seeding of platinum E-Cells in culture dishes.
  • Incubation of cells under controlled conditions.
  • Assessment of CAR T-cell functionality in different immune settings.

Main Results

  • Successful production of murine CD19 CAR T cells.
  • Demonstrated differences in therapeutic efficacy based on immune conditioning.
  • Insights into the role of endogenous immune cells in therapy response.
  • Potential implications for broader applications in oncology.

Conclusions

  • The protocol provides a valuable tool for CAR T-cell research.
  • Findings contribute to understanding CAR T-cell interactions in vivo.
  • Future studies may expand on these findings to improve cancer therapies.

Frequently Asked Questions

What is CAR T-cell therapy?
CAR T-cell therapy involves modifying a patient's T cells to better recognize and attack cancer cells.
How does lymphodepletion affect CAR T-cell therapy?
Lymphodepletion can enhance the efficacy of CAR T-cells by reducing competition from endogenous immune cells.
What are the implications of this study?
The study's findings may inform future CAR T-cell therapies and their application in treating solid tumors.
What model organism is used in this research?
BALB/c mice are used as the model organism for testing the CAR T-cell therapy.
What is the significance of using syngeneic A20 B-cell lymphoma?
Using syngeneic A20 B-cell lymphoma allows for a more accurate assessment of the immune response to the therapy.
What are the next steps for this research?
Future research may focus on optimizing CAR T-cell designs and exploring their use against other cancer types.

Aquí, presentamos un protocolo para la producción y los ensayos preclínicos murinas CD19 coche de células de T por transducción retroviral y utilización como terapia contra establecido syngeneic A20 linfoma en ratones BALB/c con o sin lymphodepleting acondicionamiento previo.

Este método puede ayudarnos a responder preguntas clave en el campo de la terapia inmunitaria de células T CAR, como la modificación genética de las células T CAR y la combinación con otras terapias inmunitarias. La principal ventaja de esta técnica es que permite comparaciones entre el Linfo repleto y los entornos de Lympho agotados. Esto nos permite ver el papel de las células inmunitarias endógenas tanto en la progresión de la enfermedad como en su interacción con células T de CAR terapéuticas.La implicación de esta técnica como 10 a la terapia en el diagnóstico de tumor sólido porque las lecciones aprendidas en este modelo se pueden traducir directamente a la casa de caramelos con otras dianas como CEA. Para comenzar este procedimiento. En primer lugar, prepare todos los medios y celdas necesarios como se describe en el protocolo de texto. En el primer día en DMEM completo a 15 centímetros cuadrados platos de cultura. Semilla 7,5 millones de células electrónicas de platino en estos platos e incubar durante la noche a 37

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Investigación del cáncer número 140 coche T células camiones T-cell terapia adoptiva syngeneic ratón inmunoterapia modelo A20 IL-12 acondicionamiento previo CD19 linfoma

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