Name: Una batería de pruebas de comportamiento para la evaluación repetida de la motricidad, humor y cognición en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-02T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Aprende a evaluar motricidad, estado de ánimo y cognición en ratones mediante una batería de pruebas conductuales repetibles. Este método optimiza la eficiencia y reduce el estrés en los animales.

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Los autores agradecen a Dr. Cora SW Lai de la escuela de Ciencias Biomédicas de la Universidad de Hong Kong, para prestar el elevado además de prueba de laberinto y el Departamento de Anestesiología de la Universidad de Hong Kong para el préstamo del aparato de prueba del rotarod.

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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Análisis del comportamiento de los ratones son fundamental para la investigación de la neurodegeneración. Mientras que la función cognitiva es a menudo más susceptibles de dominio del comportamiento afectado en enfermedades neurodegenerativas, disfunción del estado de ánimo, como depresión y ansiedad, es a menudo comorbid. Por otra parte, la función motora afecta a menudo la interpretación de los resultados en algunas pruebas, como la prueba de reconocimiento de objetos nuevos, la elevada plus prueba de laberinto y la pr...

Enfermedades neurodegenerativas presentó síntomas conductuales devastadoras, incluyendo deterioro cognitivo, disfunciones del estado de ánimo tales como ansiedad y depresión o de disfunción del motor1. La patogenia de diversos tipos de enfermedades neurodegenerativas es claro2. Estudios acumulativos indican que factores genéticos y ambientales pueden tanto contribuir a la patogenesia de las enfermedades neurodegenerativas. Identificar el factor de riesgo de la neurodegeneración requiere de análisis de conducta. Aunque cada tipo de enfermedad neurodegenerativa tiene su síntoma conductual de la firma (por ejemplo, la enfermedad de Alzheimer [AD] se presenta con deterioro cognitivo y la enfermedad de Parkinson [EP] con disfunción motora). Con la progresión de la enfermedad, los pacientes manifiestan comorbilidad de diferentes anormalidades del comportamiento3. Por ejemplo, pacientes con EA muestran síntomas de la disfunción del estado de ánimo en la etapa avanzada4,5. Pacientes con EP pueden progresar a demencia relacionada con el PD y desarrollar deterioro cognitivo6. Basado en estas características, el análisis del comportamiento en modelos de neurodegeneración suele ser amplia y repetida.
Para lograr este objetivo, una batería que contiene pruebas de comportamiento clásicas y ampliamente utilizadas con excelente validez fue diseñada para análisis de comportamiento en el motor, el estado de ánimo y la cognición. La función motora puede comprobarse por la prueba de campo abierto7,8 y la aceleración rotarod. Disfunción del estado de ánimo, incluyendo la disfunción social, depresión y ansiedad, se ven más comúnmente en neurodegenerativas enfermedades5. Por lo tanto, esta batería incluye una interacción social sociabilidad9, el elevado más prueba de laberinto para ansiedad10y la prueba de nado forzado para depresión11. Deterioro cognitivo es uno de los síntomas más característicos en enfermedades neurodegenerativas, como AD y demencia lobar de frontotemporal12. Dominios cognitivos, memoria a corto plazo como memoria episódica, son susceptibles a la neurodegeneración13,14,15. Por lo tanto, la prueba del laberinto de agua Morris para el aprendizaje espacial y memoria16 y la prueba de reconocimiento de objeto novedoso para la memoria a corto plazo17 están incluidos en la batería. Estas pruebas son compatibles entre sí. El orden de las pruebas fue diseñado para maximizar la habituación y a minimizar la interferencia, para aumentar la compatibilidad de la batería. Puesto que cada función es probado por los menos dos pruebas independientes que son diferentes en principio y de método, pueden validarse aún más los resultados de cada prueba. Por otra parte, se destacan los protocolos de pruebas para prueba repetida, facilita el estudio longitudinal del desarrollo de enfermedades neurodegenerativas. Por lo tanto, esta batería de pruebas de comportamiento estudia diferentes subdominios de cambios en el comportamiento vistos en las distintas etapas de la neurodegeneración y costando un número mínimo de animales. Esta batería ha sido utilizada en un estudio longitudinal que evaluó los cambios del comportamiento en adultos (3 meses de edad) machos C57BL/6N ratones jóvenes después de la exposición respiratoria a nanopartículas de sílice, un peligro ocupacional que es un factor de riesgo potencial de neurodegeneración18. Sin embargo, otras cepas o modelos, como de ratones y manipulados genéticamente ratones, pueden comportarse de forma diferente que los jóvenes ratones C57BL/6N. Por lo tanto, cuidado puede ser necesario usar esta batería en estos ratones.

<table><tbody><tr><td>cámaras en prueba de interacción social</td><td>casera</td><td></td> <td>(8 cm (L) x 6 cm (W) x 12 cm (H)), transparentes con agujeros,</td></tr><tr><td>tanques cilíndricos de plástico utilizados en la prueba</td><td></td><td></td> de natación forzada casera de <td>30 cm de altura, 20 cm de diámetro, vidrio</td></tr><tr><td>elevado más laberinto</td><td>casero</td><td></td><td>brazos abiertos (30 cm x 5 cm x 0,5 cm), brazos cerrados (30 cm x 5 cm x 16 cm), plataforma central (5 cm x 5 cm x 0,5 cm), 40 cm de altura. Aparato</td></tr><tr><td>de roto-rod IITC</td> de plástico, no transparente, <td>IITC ciencias de la vida Inc.</td><td>755, serie 8</td><td></td></tr><tr><td>arena de campo abierto</td><td>hecha</td><td></td> en casa <td>60 cm (L) x 60 cm (W) x 40 cm (H), plástico,</td></tr><tr><td>laberinto acuático</td> no transparente <td>hecho</td><td></td> en casa <td>120 cm de diámetro, 60 cm de profundidad, acero</td></tr></tbody></table>

una batería de pruebas de comportamiento para la evaluación repetida de la motricidad, humor y cognición en ratones

A Behavioral Test Battery for the Repeated Assessment of Motor Skills, Mood, and Cognition in Mice

Estudios farmacológicos y toxicológicos en neurodegeneración requieren análisis integral del comportamiento en los ratones debido a trastornos motores y trastornos de ánimo y la cognición son comunes y compartieron a menudo los síntomas en enfermedades neurodegenerativas. Se muestra aquí es una batería de pruebas de comportamiento para el motor, estado de ánimo y la cognición, que puede ser repetidamente probada en un estudio longitudinal. Esta batería evalúa el fenotipo general comportamiento en ratones mediante el examen de cada dominio de la conducta con al menos dos pruebas bien aceptados independiente (es decir, prueba de campo abierto y prueba del rotarod para motricidad, prueba de interacción social, elevado más prueba del laberinto, y prueba de nado forzado para función emocional y prueba de laberinto de agua de Morris y prueba de reconocimiento de objeto nuevo para la función cognitiva). Por lo tanto, esta batería de pruebas sensibles e integral es una poderosa herramienta para el estudio del comportamiento alternancia en neurodegeneración.

Esta batería de pruebas conductuales fue diseñada para el análisis del comportamiento integral y válido de motor, el estado de ánimo y la cognición, que comúnmente son afectadas en la neurodegeneración5. Hemos aplicado esta batería para estudiar los cambios conductuales en ratones C57BL/6N adultos jóvenes después de la exposición respiratoria a nanopartículas de sílice para 1 mes y 2 meses18. Los resultados revelaron que ratones C57BL/6N exp...

Una batería de pruebas de comportamiento integral de las habilidades motoras, estado de ánimo, incluyendo la interacción social, depresión y ansiedad — y cognición está diseñada para la evaluación repetida de cambios de comportamiento relacionados con la neurodegeneración en ratones.

Una batería de pruebas de comportamiento para la evaluación repetida de la motricidad, humor y cognición en ratones

Pharmacological and toxicological studies in neurodegeneration require comprehensive behavioral analysis in mice because motor dysfunctions and ...

La enfermedad neurodegenerativa a menudo se manifiesta con síntomas de comportamiento devastadores, como deterioro cognitivo, disfunciones del estado de ánimo o incluso disfunciones motoras. Este estudio permite evaluar con precisión los fenotipos conductuales con un alto nivel de repetibilidad. Diseñamos una batería completa que se puede utilizar repetidamente en el análisis de comportamiento en ratones.Esta prueba asses funciones motoras, interacción social, función emocional, y la función cognitiva. Al organizar el orden y el intervalo de pruebas en esta batería, aumentamos la eficiencia de las pruebas y disminuimos la interferencia entre las pruebas y el estrés en ratones de manejo frecuente. Para comenzar, organice la prueba de comportamiento en el orden descrito en el protocolo de texto.Realice la prueba de campo abierto en una arena de plástico no transparente, blanca. Inicie la grabación de la cámara y coloque suavemente el ratón junto al centro de una pared de la arena, frente a la pared. Registre el comportamiento del ratón durante 10 minutos y devuélvalo a su jaula de origen.A continuación, divide la arena en cuatro por cuatro cuadrados en la pantalla del ordenador. Cuente el número de veces que el ratón cruza las líneas de cuadrícula en la arena para evaluar la función locomotora. Para medir la ansiedad, mida la cantidad de tiempo que pasa el ratón en la zona central de la arena.Lleve a cabo la prueba elevada más laberinto en el mismo día. Una vez que todos los ratones terminen la prueba de campo abierto, coloque el ratón en la unión de los brazos abiertos y cerrados. Registre el comportamiento del ratón durante cinco minutos antes de devolver el ratón a su jaula de origen.Después de dos días consecutivos de prueba de campo abierto, configure la prueba de reconocimiento de objetos novedosos de acuerdo con el protocolo de texto. Encienda la cámara y coloque el ratón en la arena, mirando hacia el centro de la pared, para familiarizar al ratón. Registre el comportamiento del ratón durante 10 minutos.A continuación, devuelva el ratón a su jaula de origen. 24 horas después de la familiarización, repita la prueba con un objeto novedoso. Mida el tiempo que el ratón interactúa con un nuevo objeto y un objeto familiar por separado.A continuación, calcule la memoria del ratón como la preferencia al objeto novedoso. Para la prueba de interacción social, utilice una arena de campo abierto con dos cámaras transparentes con agujeros en la superficie. Coloque el ratón sujeto en la arena durante un período de exploración de objetos de tres minutos para habituar el ratón a las cámaras.A continuación, devuelva el ratón sujeto a su jaula de inicio y limpie la arena. Pon un ratón novedoso en una de las cámaras. A continuación, reintroducir el sujeto ratón a la arena y grabar durante tres minutos.Al revisar el video, mida la interacción social midiendo la proporción de tiempo que el ratón sujeto pasa interactuando con la novedosa cámara del ratón o la cámara vacía. A continuación, realice la prueba de rotarod de aceleración. En cada ensayo, coloque el ratón sobre la varilla estática frente a la pared opuesta a la máquina.Habituar los ratones a la rotarod entrenándolo durante tres días en los ratones ingenuos antes de la aparición de posibles síntomas, para que el ratón aprenda igualmente la escala. Detenga el dispositivo cuando el ratón caiga y registre el tiempo que el ratón pasó en la varilla. Repita este proceso dos veces más antes de devolver el ratón a su jaula de origen.A continuación, coloque el laberinto de agua en el centro de una sala de comportamiento, y marque la posición del laberinto para asegurar que la posición del laberinto de agua se mantenga constante. Divide el laberinto en cuatro cuadrantes imaginarios. Cuelgue señales visuales en el centro de cada cuadrante.A continuación, coloque una plataforma en el centro del cuarto cuadrante y marque su ubicación. Llene el laberinto con agua, de color blanco con leche en polvo, hasta que el nivel de agua sea un centímetro más alto que la plataforma. Al principio de cada prueba de entrenamiento, iniciar la grabación de vídeo, y suavemente poner el ratón en el laberinto.Manténgase fuera de la vista del ratón. Devuelva el ratón a su jaula de inicio cuando el ratón no pueda localizar la plataforma en 60 segundos o si el ratón localiza la plataforma en 60 segundos y permanece en ella durante 10 segundos. Después de que la prueba haya terminado, detenga el video y coloque el ratón en su jaula de inicio bajo una luz infrarroja.Finalmente realizar la fase de sonda de la prueba de laberinto de agua como se describió anteriormente, sin la plataforma. A continuación, prepare el tanque cilíndrico para la prueba de natación forzada. Inicie la grabación de vídeo y coloque suavemente el ratón en el agua en el centro del tanque.Grabe el ratón durante seis minutos antes de volver a colocar el ratón en su jaula de origen. Revise el video de la prueba de natación forzada. Mida el tiempo de inmovilidad en los últimos cinco minutos del vídeo.Este protocolo era para estudiar los cambios de comportamiento en ratones después de la exposición respiratoria a nanopartículas de sílice. Los resultados en la prueba de campo abierto y la prueba de rotarod acelerada demostraron que las nanopartículas de sílice no afectaban a la función locomotora o motora en ratones. La actividad de interacción social se vio afectada después de la exposición de un mes a nanopartículas de sílice, sin embargo, la prueba de campo abierto, la prueba de laberinto elevada más, y la prueba de natación forzada no indicaron ninguna ansiedad o depresión después de un mes de exposición.Una exposición de dos meses a nanopartículas de sílice resultó en ansiedad, como lo demuestran los resultados de la prueba de laberinto más elevado. El deterioro cognitivo también se detectó en la prueba del laberinto de agua después de dos meses de exposición. Esta batería está diseñada para el análisis integral del comportamiento en neurodegeneración en la cepa del ratón C57.Es más adecuado para estudios longitudinales relacionados con la neurodegeneración en toxicidad de neurotoxinas o factores de riesgo potenciales, o desarrollo de fármacos, que a menudo cuenta con administración a largo plazo y pruebas repetidas.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Behavior

Comportamiento

Aquí se describe un protocolo detallado para el examen de la sociabilidad en ratones mediante el uso de la sociabilidad Crawley y la preferencia para la prueba de la novedad social. Se describen las ventajas y posibles aplicaciones de este procedimiento, incluyendo los detalles críticos importantes para la correcta interpretación de los resultados.

Evaluación de los comportamientos de interacción social

En las enfermedades y trastornos del movimiento de Parkinson en general, los ensayos de comportamiento sensibles y fiables son esenciales para probar nuevas terapias potenciales. A continuación, describimos una batería manejable de pruebas sensoriomotoras de ratones que son sensibles a los diferentes grados de lesión en el sistema nigroestriatal y útil para los estudios preclínicos.

Evaluación de la función sensoriomotora en modelos de ratón de la enfermedad de Parkinson

Sistema totalmente automatizado para medir propiedades fisiológicamente significativas de los mecanismos que median la localización espacial, la localización temporal, la duración, la frecuencia y la estimación de la probabilidad, la evaluación de riesgos, la impulsividad y la exactitud y precisión de la memoria, con el fin de evaluar los efectos de las manipulaciones genéticas y farmacológicas sobre mecanismos fundamentales de la cognición en ratones.

Automatizado, cuantitativa Cognitiva / Screening de comportamiento de los ratones: Para Genética, Farmacología, Animal Cognition and Instruction Pregrado

Monitoreo prolongado y exhaustivo de los ratones en un ambiente en el hogar jaula proporciona una comprensión más profunda de la conducta aberrante en modelos murinos de enfermedades cerebrales. Este artículo describe la estación del Comportamiento Integrado (InBest) como componente clave del análisis del comportamiento contemporáneo.

Comportamiento Fenotipificación de modelos murinos de enfermedades con la Estación Integrada Comportamiento (InBest)

Presentado es una batería concisa de pruebas motoras neonatales en ratones. Con estas pruebas, se pueden demostrar déficits motores neonatales en una variedad de trastornos motores neonatales. Al tener un conjunto estandarizado de pruebas, se pueden comparar los resultados de diferentes estudios, lo que permite un informe mejor y más preciso entre los grupos.

Una batería de pruebas de motor en un modelo de ratón neonatal de la parálisis cerebral

Pruebas de comportamiento se utilizan en ensayos pre-clínicos para evaluar los efectos fenotípicos de una enfermedad o tratamiento sobre el bienestar de los animales. Para evaluar globalmente el funcionamiento motor, seleccionamos pruebas de locomoción general, fuerza muscular y coordinación: prueba de campo abierto, la malla y la prueba del rotarod, respectivamente.

Batería de comportamiento pruebas evaluación General locomoción, fuerza Muscular y la coordinación en ratones

Se realizó oclusión unilateral de la arteria carótida en día postnatal 7-10 CD-1 ratón cachorros para crear un modelo de (HI) hipóxico-isquémica neonatal e investigó los efectos de la lesión cerebral HI. Estudiamos las funciones neuroconductuales en estos ratones, en comparación con ratones normales no funcionan.

Evaluación neuroconductual en un modelo murino de lesión de cerebro hipóxico-isquémica Neonatal

Este papel describe un protocolo para la evaluación cognitiva de modelos genéticos de la enfermedad de Alzheimer utilizando el sistema IntelliCage, que es un sistema de monitoreo conductual alto rendimiento automatizado con condicionamiento operante.

Automatizado, ensayo conductual a largo plazo para las funciones cognitivas en múltiples modelos genéticos de la enfermedad de Alzheimer, utilizando IntelliCage

Se describe el establecimiento de un modelo murino de la enfermedad de Parkinson con MPTP y evaluaciones conductuales usando el cilindro y abre campo de pruebas para medir función motora. Entonces utilizamos l-dopa como un ejemplo para mostrar cómo aplicar este modelo en el estudio de medicamentos PD.

Evaluación conductual de locomoción espontánea en un modelo murino MPTP-inducido la enfermedad de Parkinson

Los modelos de roedores son herramientas valiosas para estudiar los comportamientos básicos relacionados con el trastorno del espectro autista (TEA). En este artículo, exponemos dos pruebas de comportamiento para modelar las características principales del TEA en ratones: el autoacicalamiento, que evalúa el comportamiento repetitivo, y la prueba de interacción social de tres cámaras, que documenta las deficiencias sociales.

Estrategias para evaluar comportamientos similares al autismo en ratones

Aprende a evaluar motricidad, estado de ánimo y cognición en ratones mediante una batería de pruebas conductuales repetibles. Este método optimiza la eficiencia y reduce el estrés en los animales.

Una batería de pruebas de comportamiento para la evaluación repetida de la motricidad, humor y cognición en ratones

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