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DOI: 10.3791/59025-v
Lien Anh Ha Do1,2, Reuben Tse1, Jordan Nathanielsz1, Jeremy Anderson1, Darren Suryawijaya Ong1, Keith Chappell3, Kim Mulholland1,2,4, Paul V. Licciardi1,2
1Murdoch Children's Research Institute, 2Department of Paediatrics,University of Melbourne, 3School of Chemistry and Molecular Bioscience,University of Queensland, 4London School of Hygiene and Tropical Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a high throughput, imaging-based micro-neutralization assay designed to measure the titer of neutralizing antibodies against respiratory syncytial virus (RSV). The assay has been validated across various sample types and demonstrates high reproducibility.
Este estudio describe un alto rendimiento, basado en la proyección de imagen de neutralización micro ensayo para determinar el título de anticuerpos neutralizantes específicos para virus sincicial respiratorio (VSR). Este formato de ensayo ha sido probado en tipos diferentes de la muestra.
Es necesario un método preciso y de alto rendimiento para medir los anticuerpos neutralizantes del VHS, como un marcador importante de protección contra el virus respiratorio sincitial. Este método es altamente reproducible con variaciones entre ensayos para el antisuero de referencia que son inferiores al 10%Creemos que este ensayo se puede establecer fácilmente en muchos laboratorios de todo el mundo a un costo relativamente bajo. Aquí describimos un ensayo de microneutralización basado en imágenes que se ha probado en el subgrupo A del RSV, y también se puede adaptar para el subgrupo B del RSV y diferentes tipos de muestras.
Demostrando el procedimiento estará Reuben Tse, miembro del equipo de investigación de MCRI. Para sembrar placas en el primer día, primera resuspendición A549 células en medios DMEM, con 10%FCS y 1.000 unidades de mezcla de penicilina-estreptomicina a una concentración de 400.000 células por mililitro. Luego siembra placas estériles de fondo plano de 96 pozos con 40.000 células A459 a una densidad de 100 microlitros por pozo.
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