Name: Radioinmunoterapia pretargeted basada en la reacción de Diels-Alder de demanda electrónica inversa (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-29T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 44 s
Description: Aprende radioinmunoterapia pretargeted usando anticuerpos modificados con TCO y radioligandos de tetrazina marcados con 177Lu en modelos murinos de cáncer colorrectal. Este método mejora la eficacia terapéutica.

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Los autores agradecen a Dr. Jacob Houghton para conversaciones útiles. Los autores quisieran agradecer a los NIH para su financiación generosa (R00CA178205 y U01CA221046).

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</ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

Uno de los puntos fuertes de este enfoque en vivo pretargeting — especialmente en lo referente a estrategias basadas en anticuerpos tienen y radiactiva haptenos, es su modularidad: transporte- cyclooctene fracciones pueden ser añadidos a cualquier anticuerpo, y tetrazina radioligands puede ser radiactiva con una extraordinaria variedad de radionucleidos sin deteriorar su capacidad de reaccionar con sus socios de clic. Sin embargo la adaptación de este enfoque a otros sistema de antígeno anticuerpo no es...

La radioinmunoterapia (RIT), el uso de anticuerpos para la entrega de los radionucleidos terapéuticos para tumores — ha sido un enfoque atractivo para el tratamiento de cáncer1,2. De hecho, esta promesa ha sido puesto de relieve por la aprobación de los Estados Unidos administración de alimentos y drogas de dos radioimmunoconjugates para el tratamiento de linfoma no-Hodgkin: 90Y-ibritumomab tiuxetan y 131-tositumomab3 , 4. sin embargo, incluso desde sus primeros días, las perspectivas clínicas de RIT han visto obstaculizadas por una complicación crítica: las tasas de dosis alta de radiación a tejidos sanos5,6. En general, radioimmunoconjugates de RIT están marcados con radionucleidos de larga vida (p. ej., 131I [t½ = 8,0 días] y 90Y [t½ = 2,7 días]) con vida media física que encajar bien con la largo farmacocinética vida media de las inmunoglobulinas. Esto es esencial, como asegura que eso suficiente radiactividad sigue siendo una vez que el anticuerpo ha alcanzado su biodistribución óptimos después de varios días de circulación. Sin embargo, esta combinación de tiempos de residencia largos en la sangre y vida media larga física resulta inevitablemente en la irradiación de los tejidos sanos, lo que reducir la relación terapéutica y limitar la eficacia de la terapia7. Se han explorado diversas estrategias para evitar este problema, incluyendo el uso de fragmentos de anticuerpos truncado como Fab, Fab', F(ab')2, minibodies y nanobodies8,9,10. Una de las más prometedoras y fascinante, pero indudablemente complejos enfoques alternativos es en vivo pretargeting11.
En vivo pretargeting es una aproximación a la proyección de imagen nuclear y la terapia que busca aprovechar la exquisita afinidad y selectividad de anticuerpos mientras bordeando sus inconvenientes farmacocinéticos11,12,13. Para ello, los anticuerpos radiactivos utilizados en la radioinmunoterapia tradicional es deconstruido en dos componentes: un radioligando de molécula pequeña y un immunoconjugate que puede enlazar tanto un antígeno de tumor y el ya mencionado así. El immunoconjugate se inyecta primero y da una ventaja, a menudo varios días, durante el cual se acumula en el tejido diana y elimina de la sangre. Posteriormente, se administra el radioligando de molécula pequeña y combina con el immunoconjugate en el tumor o elimina rápidamente del cuerpo. En esencia, en vivo pretargeting se basa en realizar radiochemistry dentro del propio cuerpo. Al reducir la circulación de la radiactividad, este enfoque reduce la dosis de radiación a los tejidos sanos y simultáneamente facilita el uso de radionucleidos (p. ej., 68Ga, t½ = min 68211; Como t½ = 7,2 h) con vida media que normalmente se considera incompatible con vectores basados en anticuerpos.
A partir de la década de 1980, un puñado de diferentes enfoques en vivo pretargeting han sido desarrollados, incluyendo estrategias basadas en la interacción estreptavidina-biotina, tienen anticuerpos y la hibridación de complementarios oligonucleótidos14,15,16,17,18. Pero cada uno se ha celebrado nuevamente en diversos grados por complicaciones, más famosa la inmunogenicidad potente de anticuerpos modificados de estreptavidina19,20. En los últimos cinco años, nuestro grupo y otros han desarrollado un enfoque en vivo pretargeting basa en la ligadura rápido y bioorthogonal inversa electrónica demanda Diels-Alder entre transporte- cyclooctene (TCO) y tetrazina (Tz) 2122,de,23,24. La más exitosa de estas estrategias ha utilizado un anticuerpo modificado de TCO y un radioligando Tz-cojinete, como TCO es normalmente más estable en vivo que su Tz socio (figura 1)25,26. Como en otras metodologías pretargeting, el immunoconjugate mAb-TCO es administrado en primer lugar y dado el tiempo para borrar de la circulación y se acumulan en el tejido del tumor. Posteriormente, se inyecta el radioligando Tz de molécula pequeña, después de lo cual hace clic con el immunoconjugate dentro del tejido de destino o elimina rápidamente del cuerpo. Esta en vivo pretargeting estrategia ha demostrado ser altamente eficaz para PET y SPECT proyección de imagen con varios sistemas diferentes anticuerpos/antígeno, constantemente produciendo imágenes con alto contraste y que permite el uso de radionuclides de breve duración tales como 18 F (t½ = 109 min) y 64(t1/2 = 12,7 h)21,22,24. Más recientemente, la eficacia de la base haga clic en la radioinmunoterapia pretargeted (PRIT) ha demostrado en modelos murinos de la adenocarcinoma ductal pancreática (PDAC) y carcinoma colorrectal27,28. Para ello, la terapéutica con radionúclidos 177Lu (βmax = 498 keV, t1/2 = 6,7 días) fue empleado junto con dos anticuerpos diferentes: 5B1, que apunta a antígeno carbohidrato 19.9 (CA19.9) ubicuo expresado en PDAC , y huA33, que dirige el A33, una glicoproteína transmembrana expresa en > 95% de los cánceres colorrectales. En ambos casos, este enfoque 177Lu-PRIT produjo concentraciones de alta actividad en tejido tumoral creó un efecto terapéutico dependiente de la dosis y al mismo tiempo reduce las concentraciones de actividad en los tejidos sanos en comparación con el tradicional directamente-con la etiqueta radioimmunoconjugates.
En este artículo, describimos protocolos por PRIT usando un radioligando de 177Lu-DOTA-labeled tetrazina (Lu-DOTA-PEG [177Lu]7- Tz) y una variante modificada de TCO del anticuerpo huA33 (huA33-TCO). Más específicamente, se describe la construcción de huA33-TCO (figura 2), la síntesis y de Lu-DOTA-PEG radiolabeling de [177Lu]7- Tz (figura 3 y figura 4) y el rendimiento de en vivo biodistribución y estudios longitudinales terapia en modelos murinos de carcinoma colorrectal. Además, en los resultados representativos y discusión, presentamos un conjunto de datos de muestra, posibles estrategias de dirección para la optimización de este enfoque y considerar esta estrategia en el contexto más amplio de en vivo pretargeting y PRIT. Por último, es importante tener en cuenta que si bien hemos optado por centrarse en pretargeting con huA33-TCO y [177Lu] Lu-DOTA-PEG7- Tz en este protocolo, esta estrategia es altamente modular y se puede adaptar a una amplia gama de anticuerpos y radionúclidos.

<table><tbody><tr><td>(E)-Ciclooct-4-enil 2,5-dioxo-1-pirrolidinilo carbonato (TCO-NHS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>764523</td><td>Tienda a -80 &deg; C</td></tr><tr><td>2,5-Dioxo-1-pirrolidinil 5-[4-(1,2,4,5-tetrazin-3-il)bencilamino]-5-oxopentanoato (Tz-NHS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>764701</td><td>Almacenar a -80 &0 grados; C</td></tr><tr><td>Acetonitrilo (MeCN)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A998-4</td><td></td></tr><tr><td>Acetato de amonio (NH4OAc)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A639-500</td><td></td></tr><tr><td>Boc-PEG7-amina (O-(2-aminoetil)-O&prime;-[2-(Boc-amino)etil]hexaetilenglicol)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>70023</td><td>Almacenar en -20 &deg; C</td></tr><tr><td>Diclorometano (DCM)</td><td>Fisher Scientific</td><td>D143-1</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido (DMSO), anhidro</td><td>Fisher Scientific</td><td>D12345</td><td></td></tr><tr><td>EMD Millipore Amicon Ultra-2 Unidad de filtro centrífugo</td><td>Fisher Scientific</td><td>UFC205024</td><td></td></tr><tr><td>GE Healthcare Columnas de desalinización desechables PD-10</td><td>Fisher Scientific</td><td>45-000-148</td><td></td></tr><tr><td>N, N-dimetilformamida (DMF), anhidra</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC610941000</td><td></td></tr><tr><td>solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Fisher Scientific</td><td>70-011-044</td><td>10x</td></tr><tr><td>p-SCN-Bn-DOTA</td><td>Macrocíclicos</td><td>B-205</td> concentrados <td>Almacene a -20 & grados; C</td></tr><tr><td>Trietilamina (TEA)</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC157911000</td><td></td></tr><tr><td>Ácido trifluoroacético (TFA)</td><td>Fisher Scientific</td><td>A116-50</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo de medición de tumores</td><td>Peira TM900</td><td>Peira TM900</td><td></td></tr></tbody></table>

radioinmunoterapia pretargeted basada en la reacción de diels-alder de demanda electrónica inversa

Pretargeted Radioimmunotherapy Based on the Inverse Electron Demand Diels-Alder Reaction

La radioinmunoterapia (RIT) es un enfoque prometedor para el tratamiento del cáncer, la vida media larga farmacocinética de anticuerpos radiactivos puede resultar en altas dosis de radiación a los tejidos sanos. Tal vez no es de extrañar varias estrategias diferentes se han desarrollado para eludir esta limitación preocupante. Uno de los más prometedores de estos enfoques es pretargeted radioinmunoterapia (PRIT). PRIT se basa en disociar el radionúclido de la inmunoglobulina, inyectarlas por separado y luego lo que les permite combinar en vivo en el tejido diana. Este enfoque aprovecha las propiedades excepcionales de tumor targeting de anticuerpos mientras que bordea sus inconvenientes farmacocinéticos, bajar las dosis de radiación a los tejidos no Diana y facilitar el uso de radionúclidos con vidas medias que son considerado demasiado corto para uso en radioimmunoconjugates tradicional. En los últimos cinco años, nuestro laboratorio y otros han desarrollado un enfoque en vivo pretargeting basa en la reacción de Diels-Alder (IEDDA) de demanda electrónica inversa entre transporte- cyclooctene (TCO) y tetrazina (Tz). Esta estrategia se ha aplicado con éxito a pretargeted tomografía por emisión de positrones (PET) y computarizada por emisión de fotón único tomografía (SPECT) proyección de imagen con una variedad de sistemas antígeno-anticuerpo. En un par de publicaciones recientes, hemos demostrado la eficacia de PRIT IEDDA basado en modelos murinos de adenocarcinoma ductal de páncreas y carcinoma colorrectal. En este protocolo, describimos protocolos por PRIT usando un radioligando de 177Lu-DOTA-labeled tetrazina (Lu-DOTA-PEG [177Lu]7- Tz) y una variante modificada de TCO del cáncer colorrectal a anticuerpo huA33 (huA33-TCO). Más concretamente, vamos a describir la construcción de huA33-TCO, la síntesis y de Lu-DOTA-PEG radiolabeling de [177Lu]7- Tz y el rendimiento de biodistribución en vivo y estudios longitudinales terapia en modelos murinos de carcinoma colorrectal.

La conjugación de TCO a huA33 se basa en el acoplamiento entre el amina reactiva TCO-NHS y los residuos de lisina en la superficie de la inmunoglobulina. Este método es altamente robusta y reproducible y fiable produce un grado de-etiquetas de 2-4 TCO/mAb. En este caso, espectrometría de masas MALDI-ToF se empleó para confirmar un grado de etiquetado de aproximadamente 4.0 TCO/mAb; se obtuvo un valor similar utilizando un tetrazina fluoróforo modificado como un reportero...

Este protocolo describe la síntesis y caracterización de un transporte- cyclooctene (TCO)-modifica un radioligando de Lu-labeled tetrazina (Tz) 177para radioinmunoterapia pretargeted (PRIT) y el anticuerpo. Además, detalla el uso de estas dos construcciones en vivo biodistribución y estudios longitudinales de la terapia en un modelo murino de cáncer colorrectal.

Radioinmunoterapia pretargeted basada en la reacción de Diels-Alder de demanda electrónica inversa

While radioimmunotherapy (RIT) is a promising approach for the treatment of cancer, the long pharmacokinetic half-life of radiolabeled antibodies can ...

Este protocolo describe cómo aplicar una metodología preestirigida a la radioterapia dirigida de xenogramas de cáncer en el modelo de ratón. La radioinmunoterapia precalentada o PRIT nos permite inyectar el anticuerpo y radioligand por separado, y dejar que los dos combinen in vivo usando la química de clics. Mientras presentamos PRIT utilizando un modelo de xenografía de cáncer colorrectal, esta técnica se puede aplicar a cualquier anticuerpo de objetivo de antígeno superficial.Es importante seleccionar un antígeno que no se internalice rápidamente o se desborde extensamente, ya que estos pueden reducir la eficacia del enfoque. Para sintetizar huA33-TCO primero prepare una solución de 125 microlitros de 40 miligramos por mililitro TCO-NHS en metilformamida seca en un tubo de microcentrífuga de 1,7 mililitros. Esta solución se puede alicuar y congelar a 80 grados centígrados para su uso en experimentos futuros.En un tubo de microcentrífuga de 1,7 mililitros separado, prepare una solución de cinco miligramos por mililitro de huA33 en un mililitro de solución salina tamponada con fosfato. Con pequeñas alícuotas de carbonato sódico molar 0,1, ajuste el pH de la solución de anticuerpos a entre 8,8 y 9,0. Utilice papel de pH o un medidor de pH con un microelectrodo para controlar el pH, y tenga cuidado de que el pH no exceda de 9,0.Añadir un volumen correspondiente a 40 equivalencia molar de TCO-NHS a la solución de anticuerpos. Para evitar la precipitación del TCO-NHS hidrófobo, agréguelo lentamente y con agitación. Deje que la reacción se incuba a 25 grados centígrados en un mezclador térmico durante una hora con agitación leve.Antes de purificar el inmunoconjugado huA33-TCO utilizando una columna de desaladora de exclusión de tamaño desechable preenvasada, equilibre la columna de exclusión de tamaño según lo descrito por el proveedor para eliminar los conservantes presentes en la columna durante el almacenamiento, lo que normalmente implica lavar la columna cinco veces con un volumen de PBS que corresponde al volumen de la columna. Añadir la mezcla de reacción a la columna de exclusión de tamaño, observando el volumen de la mezcla de reacción. Después de que la mezcla de reacción ha entrado en la columna añadir una cantidad adecuada de PBS para llevar el volumen total de solución añadido a la columna hasta 2,5 mililitros.Recoger el producto utilizando dos mililitros de PBS como eluyente. Mida la concentración del huA33-TCO utilizando un espectrofotómetro UV vis que monitorea la longitud de onda a 280 nanómetros. Si se desea una solución con una mayor concentración de inmunoconjugado, concentre la solución huA33-TCO utilizando una unidad de filtro centrífugo con un corte de peso molecular de 50.000 siguiendo las instrucciones del fabricante.Almacene el inmunoconjugado huA33-TCO completado en 4 grados centígrados en la oscuridad. Si se va a utilizar más de cuatro días en el futuro almacenarlo a 80 grados centígrados en la oscuridad. En un tubo centrífugo de 1,7 mililitros añadir 200 microlitros de 0,25 tampón de acetato de amonio molar ajustado a pH 5,5.Agregue la cantidad deseada de cloruro de lutecio-177 a la solución tampón. La cantidad añadida dependerá del número de sujetos en el experimento y de las dosis radiactivas que se administren. Añadir Tetrazine PEG7-DOTA en DMSO a la mezcla radiactiva.La cantidad añadida depende del número de sujetos que se están probando. Deje que la solución se incuba a 37 grados centígrados durante 20 minutos. Verifique que el radioetiquetado esté completo utilizando cromatografía de capa fina radio instantánea con 50 pH EDTA milimétricas 5.5 como fase móvil.El Lutecio-177-DOTA-PEG7-Tetrazine etiquetado permanecerá en la línea de base, mientras que el Lutecio-177 libre será coordinado por la EDTA y viajará con el frente del disolvente. Es fundamental que la colocación de los tumores subcutáneos no interfiera con la técnica de restricción. Recomiendo colocarlos en el lado del flanco que es opuesto a su mano de sujeción.Desde que me retendo con la mano izquierda he elegido colocar los tumores en el flanco derecho. Ordene los ratones desnudos athímicos femeninos con xenografía por cáncer colorrectal, de modo que el volumen tumoral promedio en cada cohorte sea aproximadamente igual. Para ello, enumere los números de identificación de los animales, el patrón de muesca y el volumen del tumor en tres columnas separadas de un programa de hoja de cálculo.Ordene los datos del volumen tumoral más pequeño a el más grande. En una cuarta columna asigne a cada animal un número de jaula. Recorre las jaulas en un patrón similar a una serpiente hasta que a todos los animales se les asigne una jaula.Una vez que se asignan a las jaulas, ordene los datos por número de jaula. Para inyectar las dosis de extracción inmunoconjugada de 150 microlitros de solución huA33-TCO en jeringas pretratadas con 1%albúmina sérica bovina en PBS, y almacenar estas jeringas en hielo. Para inyectar la radioligand, primero dibuje dosis en 150 microlitros de 0.9%salina estéril que contenga 1.1 equivalencia molar de la Tetrazine-PEG7-DOTA radiomarcada en relación con la cantidad de huA33-TCO administrada.Utilice pinzas para medir el lado más largo del tumor oblongo, así como el ancho perpendicular a la longitud. Pesar cada ratón en una balanza para realizar un seguimiento del aumento de peso o pérdida de peso con el tiempo. Por último, calcule el volumen utilizando la fórmula para el volumen de un elipsoide suponiendo que la altura es aproximadamente igual a la anchura.Aquí se muestra la biodistribución de una pretargeting in vivo con huA33-TCO y Lutetium-177-DOTA-PEG7-Tetrazine en ratones desnudos athímicos que llevan tumores de caña colorrectáneos en humanos SW1222. Todos los intervalos de inyección producen altas concentraciones de actividad en el tejido tumoral, así como bajas concentraciones de actividad en órganos sanos. El intervalo de inyección de 24 horas ofrece la mayor absorción tumoral a las 120 horas después de la inyección.Sobre la base de estos hallazgos se eligió un intervalo de 24 horas para el posterior estudio de terapia longitudinal. Aquí se muestra un estudio de terapia longitudinal de cinco grupos de ratones con tumores SUBcutáneos SW1222 representados en el volumen tumoral promedio en función del tiempo, y el volumen tumoral normalizado al volumen inicial en función del tiempo. Hay una marcada diferencia en la respuesta de las cohortes experimentales en comparación con los grupos de control.Mientras que los tumores en los ratones que recibieron sólo un componente de la estrategia de radioinmunoterapia pretargeted continuaron creciendo sin control, los tumores de los ratones que recibieron el régimen completo de radioinmunoterapia precalentado dejaron de crecer y, en última instancia, se redujeron. Es importante destacar que no se observaron efectos secundarios tóxicos, y todos los animales mantuvieron un peso dentro del 20% de su masa inicial. Sorprendentemente, los ratones de las cohortes experimentales tenían un registro perfecto de supervivencia al final de la investigación.Al intentar este procedimiento es de suma importancia medir con precisión y reproducibilidad los tumores. Cuando trabaje con radiactividad, consulte al oficial de seguridad radiológica de su institución para desarrollar protocolos e instalaciones seguras. Tener controles de seguridad adecuados en su lugar limitará su exposición y evitará la contaminación.La pretargeting proporciona una dosis de radiación más baja a los órganos de fondo que la radioinmunoterapia tradicional. Al compartir este protocolo esperamos que otros puedan probar sus propios modelos e ideas que conducirán a nuevos y emocionantes avances para el tratamiento del paciente.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Chemistry

Química

Este vídeo describe la técnica de radioinmunoterapia predirigida o PRIT, en la que se administran inmunoconjugados seguidos de radioligandos para el tratamiento de tumores. Esta radioinmunoterapia reduce las dosis de radiación a los tejidos sanos y utiliza radionúclidos con vidas medias muy bajas incompatibles con los vectores basados en anticuerpos.

Radioinmunoterapia predirigida: un método para la administración dirigida de radionúclidos terapéuticos a los tumores

La cicloadición de Diels-Alder de demanda de electrones inversos bioortogonales se ha aprovechado para crear una estrategia de imagen PET predirigida eficaz y modular para el cáncer. En este protocolo, los pasos de esta metodología se describen en el contexto de un sistema modelo que emplea el anticuerpo dirigido al cáncer colorrectal huA33 y un radioligando marcado con 64Cu.

El aprovechamiento de la demanda Bioorthogonal Inverse Electron Diels-Alder Cicloadición para Pretargeted TEP

Debido a su vida media radiactiva de varios días y a sus propiedades favorables de desintegración, el radiometal emisor de positrones 89Zr es extremadamente adecuado para su uso en radiofármacos basados en anticuerpos para la obtención de imágenes PET. En este protocolo se describirá la bioconjugación, radiosíntesis y aplicación preclínica de 89anticuerpos marcados con Zr.

El bioconjugación y Radiosíntesis de<sup&gt; 89</sup&gt; Los anticuerpos marcados con Zr-DFO

Aquí, describimos un protocolo para el radiomarcaje y las pruebas in vivo de derivados tridentados de quelato-tetrazina de Tc(I) 99mpara la química bioortogonal y de pre-targeting.

Preparación y Evaluación de<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc-etiquetados tridentado Los quelatos de orientación previa Usando Bioorthogonal Química

En este protocolo, se describe la síntesis de las vainas, un reactivo phenyoxadiazolyl metil sulfona-basado para el acoplamiento selectivo sitio de cargos a los tioles de biomoléculas, especialmente de anticuerpos. Además, se describen la síntesis y caracterización de un quelante bifuncional de rodamiento de las vainas y su conjugación a un anticuerpo de modelo.

Síntesis y Bioconjugation de tioles reactivos reactivos para la creación de sitio selectivamente modificados Immunoconjugates

La fotoinmunoterapia de infrarrojo cercano (NIR-PIT) es una estrategia terapéutica emergente contra el cáncer que utiliza un conjugado anticuerpo-fotoabsorbente (IR700Dye) y luz NIR para destruir las células cancerosas. Aquí, presentamos un método para evaluar el efecto antitumoral de NIR-PIT en un modelo de ratón de cáncer de pulmón diseminado pleural y mesotelioma pleural maligno utilizando imágenes de bioluminiscencia.

Fotoinmunoterapia de infrarrojo cercano para modelos de ratón de diseminación pleural

Este protocolo describe la metodología para el seguimiento no invasivo de células T genéticamente modificadas para expresar receptores de antígenos quiméricos in vivo con una plataforma clínicamente disponible.

Imágenes dinámicas de células T receptoras de antígeno quimérico con [18F]Tomografía por emisión de positrones tetrafluoroborato/Tomografía computarizada

Este estudio ilustra el potencial metodológico de la combinación de la radioembolización transarterial con itrio-90 (Y-90 TARE) con un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 como una estrategia neoadyuvante eficaz que conduce a la hepatectomía en pacientes con carcinoma hepatocelular (CHC) con un alto riesgo de recurrencia inicial. Hace hincapié en la seguridad, la viabilidad y la orientación procesal paso a paso de este enfoque.

Radioembolización Y-90 e inhibidor de PD-1 como tratamiento neoadyuvante en el carcinoma hepatocelular

Asistida por microondas dehydrogenative intramolecular Diels-Alder (DA) reacciones proporcionan acceso concisa a ciclopenta funcionalizado...

Asistida por microondas intramoleculares Dehydrogenative Diels-Alder para la síntesis de naftalenos funcionalizados / Tintes solvatocrómico

Se presenta un método para la rápida inmovilización reversible de moléculas pequeñas y las asambleas de nanopartículas funcionalizadas de resonancia de plasmones superficiales (SPR) los estudios, utilizando secuencial en el chip de captura química cicloadición bioorthogonal y anticuerpo-antígeno.

Microfluidic Reacción en el chip de captura-cicloadición para inmovilizar reversiblemente pequeñas moléculas o estructuras de múltiples componentes para aplicaciones de biosensores

Aprende radioinmunoterapia pretargeted usando anticuerpos modificados con TCO y radioligandos de tetrazina marcados con 177Lu en modelos murinos de cáncer colorrectal. Este método mejora la eficacia terapéutica.

Radioinmunoterapia pretargeted basada en la reacción de Diels-Alder de demanda electrónica inversa

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