Estudio de la remodelación inversa del ventrículo izquierdo por desbanding aórtico en roedores

La banda aórtica es un modelo experimental útil para estudiar la remodelación inversa miocárdica en roedores y para una nueva visión de los mecanismos de regresión de cardiomiocitos y recuperación funcional iso lic. Estos metales facilitan la evolución de la crítica de modelado inverso en VIVO y la recogida de muestras biológicas para estudios in vitro y moleculares en diferentes momentos de progresión de la enfermedad. Esta técnica imita la progresión de la remodelación miocárdica y la remodelación inversa y permite explorar los mecanismos de recuperación miocárdica incompleta.

Este protocolo proporciona penetraciones en los mecanismos y la línea que remodela del miocardio remaesca completa e incompleta en patologías relacionadas sobrecarga de presión crónica tales como pretensión del ojo o estenosis aórtica. Conecte el tubo orotraqueal al ventilador para iniciar la ventilación mecánica y ajuste el ventilador a una frecuencia de 160 respiraciones por minuto y un volumen corriente de 10 mililitros por kilogramo. Antes de comenzar el procedimiento de la venda, confirme una carencia de la respuesta al reflejo del dolor en un ratón negro seis de seis a ocho semanas de seis semanas, afeite y aplique la crema depilatoria de la línea del cuello al nivel medio del pecho del ratón y aplique el ungüento a los ojos del animal.

Coloque una sonda rectal y el oxímetro para controlar la temperatura de oxigenación de la sangre y la frecuencia cardíaca. Coloque el ratón en el decúbito lateral derecho en una almohadilla térmica y pegue las extremidades al sistema de retracción del fijador magnético para mantener al animal en la posición correcta durante el procedimiento. Luego, desinfecte el pecho con 70% consecutivos de alcohol y solución de povidona yodada y abra el músculo de la piel y las costillas para realizar la banda a la aorta.

Al final del procedimiento aplicar solución de povidona-yodo en el sitio de sutura de la piel y administrar analgesia dos veces al día durante dos a tres días, A continuación, inyectar lea intraperitoneal solución salina estéril para prevenir la deshidratación en casos de sangrado significativo durante la cirugía y colocar al animal en una incubadora con seguimiento hasta la recuperación completa. Siete semanas después de la cirugía de bandas, diseccione suavemente los tejidos, la adhesión y la fibrosis alrededor de la aorta en la mitad de los animales con bandas hasta que la constricción se haga visible. Diseccione cuidadosamente la aorta y separe la sutura del vaso, luego use tijeras para cortar la sutura.

Tenga en cuenta que es una oclusión prolongada del agua índigo del hacha durante la unión o demoníaca puede conducir a edema pulmonar, una activación excesiva de las vías inflamatorias. Cierre la pared torácica con una simple interrupción o continua de seis suturas de polipropileno viejas utilizando el mínimo número de puntos de sutura posibles y cierre la piel con una sutura de polipropileno de seis O en un patrón de sutura continua, luego realice el cuidado postoperatorio como se demuestra. Cada dos o tres semanas después de la cirugía retire el pelaje de la línea del cuello hasta el nivel medio del pecho como se ha demostrado y coloque al animal en una almohadilla térmica en la posición supina Coloque electrodos de ECG sobre la piel expuesta y confirme la presencia de una buena traza de ECG y una frecuencia cardíaca entre 300 y 350 latidos por minuto.

Controle la temperatura y aplique el gel de eco en la región torácica. Coloque los ratones en reclinación dorsal ligeramente girado a la derecha y comience el ecocardiógrafo utilizando los ajustes apropiados. A continuación, coloque una sonda de ultrasonido sobre el tórax y evalúe el gradiente de presión a través de la aorta.

Registre imágenes guiadas bidimensionales de la aorta que muestren la presencia o ausencia de la constricción de la aorta ascendente para visualizar anatómicamente la eficacia de las bandas y la desbandación. Para evaluar la hipertrofia, coloque la sonda en un eje corto del ventrículo izquierdo a nivel del músculo papilar y presione el botón de trazado de modo para visualizar la pared anterior del ventrículo izquierdo, el diámetro del ventrículo izquierdo y la pared posterior del ventrículo izquierdo en diacetilo y sístila. A continuación, evalúe la función sistólica y calcule la fracción de eyección y el acortamiento fraccionario de acuerdo con los protocolos estándar.

Para evaluar la función diastólica, determine el pico del Doppler de la onda del poste de la velocidad de flujo mitral temprano y de la hoja usando una visión anormal de cuatro compartimientos apenas sobre los prospectos mitrales y registre las velocidades sistólicas diastólicas y sistólicas tempranas diastólicas y máximas del miocardio anulares laterales usando proyección de imagen de doppler del tejido del poste y la visión apical de cuatro compartimientos. El éxito de la constricción aórtica se puede verificar por un ventrículo izquierdo creciente y una presión sistólica. Y por Doppler velocidades de flujo aórtico superiores a 2,5 metros por segundo.

Comparado a los animales funcionados sham, la hipertrofia inducida flexión del ventrículo izquierdo es demostrada por un aumento de la masa del ventrículo izquierdo y una función diastólica empeorada según lo evidenciado por presiones de relleno más altas y la presión diastólica ventricular izquierda del extremo. Histológico, siete semanas de bandas aórticas induce la hipertrofia y la fibrosis significativas de los cardiomyocytes. En mi sometido a la desbanding, como el retiro acertado de la estenosis aórtica se puede verificar por las velocidades de Doppler del eco.

La desbanding total promueve una disminución significativa de la descarga y de la hipertrofia del ventrículo izquierdo evaluada por la masa del LV. Por otra parte, también se observa una normalización de la función diastólica. Cuando se juega con cuidado la evitación de la colusión ética prolongada con el fin de garantizar que la oxigenación de la sangre se mantenga por encima del 90%Este modelo mínimo nos permite estudiar mi remodelación cardíaca y remodelación inversa en diferentes momentos de la progresión de la enfermedad e incluso despertar las vías más desreguladas en cada momento.

Este procedimiento permite evaluar el potencial terapéutico de fármacos prometedores, así como estudiar el impacto de varias comorbilidades en el remolding y la recuperación inversa miocárdica.