Aislamiento de adipocitos viables y fracción vascular estromal a partir de tejido adiposo visceral humano adecuado para análisis de ARN y fenotipado de macrófagos

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27 de octubre de 2020

10.3791/61884-v

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Este protocolo proporciona un método eficiente de digestión de colagenasas para el aislamiento de adipocitos viables y células de la fracción vascular estromal-SVF de grasa visceral humana en un solo proceso, incluida la metodología para obtener ARN de alta calidad de los adipocitos y la fenotipificación de los macrófagos SVF mediante la tinción de múltiples marcadores unidos a la membrana para su análisis por citometría de flujo.

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Aislamiento de tejido adiposo

Chapters in this video

0:00

Introduction

0:46

Visceral Adipose Tissue Collection and Enzymatic Digestion

2:10

RNA Extraction from Mature Adipocytes and microRNA Quantification Assay

3:16

Characterization of Macrophage Subsets from Stromal Vascular Fraction

4:42

Results: Identification of Macrophages from Visceral Adipose Tissue

6:02

Conclusion

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