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Controles de antígenos sintéticos para inmunohistoquímica
Controles de antígenos sintéticos para inmunohistoquímica
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JoVE Journal Medicine
Synthetic Antigen Controls for Immunohistochemistry

Controles de antígenos sintéticos para inmunohistoquímica

Full Text
3,053 Views
09:30 min
August 23, 2021

DOI: 10.3791/62819-v

Charles A. Havnar1, Kathy J. Hötzel1, Charles A. Jones1, Carmina M. Espiritu1, Linda K. Rangell1, Franklin V. Peale1

1Research Pathology,Genentech, Inc.

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This work documents a simple method to create synthetic antigen controls for immunohistochemistry. The technique is adaptable to a variety of antigens in a wide range of concentrations.

Key Study Components

Area of Science

  • Immunohistochemistry
  • Biological Standards
  • Laboratory Techniques

Background

  • BSA antigen gels are reproducible IHC standards.
  • These standards can supplement existing controls.
  • They allow for calibration and standardization of IHC assays.
  • Finding a suitable solvent for peptides or proteins is crucial.

Purpose of Study

  • To create synthetic antigen controls for IHC.
  • To improve intra- and inter-assay performance assessment.
  • To provide a reference for reproducibility in assays.

Methods Used

  • Preparation of a 25% BSA solution using PBS.
  • Mixing antigen and formaldehyde solutions.
  • Utilizing standard histology and IHC reagents.
  • Creating reproducible standards of known composition.

Main Results

  • Development of a reliable method for creating antigen controls.
  • Establishment of a protocol that can be adapted for various antigens.
  • Demonstration of the importance of solvent selection.
  • Provision of tools for labs to standardize IHC assays.

Conclusions

  • Synthetic antigen controls enhance assay reliability.
  • Standardization is crucial for diagnostic relevance.
  • The method is versatile and can be widely applied.

Frequently Asked Questions

What is the significance of synthetic antigen controls?
They provide a reference for assessing assay performance and reproducibility.
How can this method be adapted?
It can be modified for various antigens and concentrations.
What are BSA antigen gels?
They are well-characterized standards used in immunohistochemistry.
Why is solvent selection important?
A suitable solvent is crucial for dissolving peptides or proteins effectively.
What reagents are used in this protocol?
Standard histology and IHC reagents are utilized.
Can different labs use these controls?
Yes, they can help labs calibrate and standardize their IHC assays.

Este trabajo documenta un método simple para crear controles de antígenos sintéticos para la inmunohistoquímica. La técnica es adaptable a una variedad de antígenos en una amplia gama de concentraciones. Las muestras proporcionan una referencia con la que evaluar el rendimiento y la reproducibilidad intra e interensayo.

Los geles de antígenos BSA son estándares IHC reproducibles bien caracterizados que pueden complementar los controles existentes. Este protocolo utiliza histología estándar y reactivos y métodos de IHQ para hacer estándares reproducibles de composición conocida. Estos controles brindan la oportunidad a diferentes laboratorios de calibrar y estandarizar los ensayos IHQ para muchos ensayos relevantes para el diagnóstico.

Es importante encontrar un disolvente adecuado para disolver el péptido o proteína. Puede ser difícil mezclar soluciones de antígeno y formaldehído rápidamente sin introducir burbujas. Para comenzar, prepare 20 mililitros de una solución de BSA de 25% de peso por volumen mezclando cinco gramos de polvo de BSA en 14 mililitros de PBS, en un tubo cónico de 50 mililitros hasta que se distribuya uniformemente.

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