La extracción de moléculas de glucógeno hepático para la determinación de la estructura del glucógeno

Este protocolo permite la extracción de las moléculas de glucógeno hepático de una manera que preserva su estructura y limita la cantidad de pequeñas partículas de glucógeno perdidas. Con investigaciones anteriores que muestran que la diabetes altera la estructura del glucógeno, este método podría ayudar a estudiar la diabetes y las diversas enfermedades de almacenamiento de glucógeno. Para extraer glucógeno del hígado, comience transfiriendo un gramo de tejido hepático congelado a un tubo de 15 mililitros que contenga seis mililitros de tampón de aislamiento de glucógeno.

Mientras se mantiene en hielo, homogeneice el tejido hepático con un homogeneizador de tejidos. Cuando esté listo, transfiera la mitad o tres mililitros de la suspensión celular a un tubo nuevo, seguido de ebullición durante 10 minutos. Mantenga la otra mitad de la suspensión en hielo para extraer las proteínas asociadas que contienen glucógeno que no están desnaturalizadas.