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JoVE Journal Biochemistry
Quantitative Microtubule Fractionation Technique to Separate Stable Microtubules, Labile Microtubules, and Free Tubulin in Mouse Tissues

Técnica de fraccionamiento cuantitativo de microtúbulos para separar microtúbulos estables, microtúbulos lábiles y tubulina libre en tejidos de ratón

Full Text
2,802 Views
07:21 min
November 17, 2023

DOI: 10.3791/63358-v

Ayaka Hagita-Tatsumoto1,2, Tomohiro Miyasaka1,2,3

1Department of Neuropathology, Faculty of Life and Medical Sciences,Doshisha University, 2Center for Research in Neurodegenerative Diseases,Doshisha University, 3Laboratory of Physiology and Anatomy, School of Pharmacy,Nihon University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Los microtúbulos, que son polímeros de tubulina, desempeñan un papel crucial como componente del citoesqueleto en las células eucariotas y son conocidos por su inestabilidad dinámica. Este estudio desarrolló un método para fraccionar microtúbulos para separarlos en microtúbulos estables, microtúbulos lábiles y tubulina libre para evaluar la estabilidad de los microtúbulos en varios tejidos de ratón.

Nuestro nuevo protocolo ayuda a distinguir y cuantificar tres estados de los anillos tubulares, como los microtúbulos estables, los microtúbulos lábiles y los túbulos libres en tejidos animales. Esta técnica se compone de pasos simples y puede evaluar la estabilidad estructural de la tubería, que no se puede detectar mediante la cuantificación de la modificación traslacional posterior a la tubería. Este método es esencial para la investigación y el desarrollo de vías terapéuticas para enfermedades en las que la estabilidad de los microtúbulos es crítica, como la enfermedad de Alzheimer y los cánceres.

Comience el procedimiento preparando la ropa de laboratorio para la disección de tejidos. Llene una caja con hielo picado y coloque dos placas de Petri sobre ella. Llene un plato con una solución tampón de fosfato helada o PBS para el lavado y almacenamiento transitorio de los tejidos disecados.

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