Ensayo de transcitosis de células endoteliales como modelo in vitro para evaluar la permeabilidad de la barrera interna sangre-retina

Este protocolo proporciona un modelo basado en células útil para estudiar la función y la permeabilidad de las barreras vasculares selectivas, como la barrera hematoretiniana o la barrera hematoencefálica, con un enfoque específico en la transcitosis endotelial. Este ensayo es fácil de configurar y usar y no requiere animales vivos. Se puede utilizar para investigar varios reguladores moleculares de la permeabilidad de las células endoteliales y la transcitosis que afectan la integridad de la barrera interna sangre-retina.

Este ensayo puede proporcionar información sobre la biología vascular y la investigación ocular y cerebral, lo que permite una mejor comprensión de los mecanismos moleculares subyacentes al control de la BB y explorar la posible administración de fármacos a través de las barreras. Para comenzar, prepare los insertos de filtro de cultivo celular para sembrar células endoteliales microvasculares de la retina humana o HRMEC, recubriendo cada inserto con 200 microlitros de solución de gelatina al 0,1% durante 30 minutos bajo una campana de flujo laminar. Asegúrese de que la solución cubra toda la superficie inferior del inserto del filtro.