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DOI: 10.3791/64215-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes a method using lucifer yellow in an apical-out enteroid model to assess intestinal permeability. It is particularly relevant for studying inflammatory bowel diseases like necrotizing enterocolitis.
El presente protocolo describe un método que utiliza lucifer amarillo en un modelo enteroide apical-out para determinar la permeabilidad intestinal. Este método se puede utilizar para determinar la permeabilidad paracelular en enteroides que modelan enfermedades inflamatorias intestinales como la enterocolitis necrosante.
La aplicación de Lucifer Yellow a los medios de enteroides apicales proporciona un método simple para el análisis cuantitativo y cualitativo de las tres principales vías de permeabilidad intestinal paracelular en un modelo 3D. Es una técnica relativamente sencilla que nos permite evaluar la permeabilidad utilizando un modelo enteroide. Estamos trabajando con esta técnica en nuestros estudios de enterocolitis necrosante.
Sin embargo, esta técnica puede ser útil en el estudio de cualquier enfermedad intestinal humana, utilizando un modelo enteroide. Demostrando los procedimientos hoy estarán nuestros becarios de investigación postdoctorales, el Dr. Tyler Leiva y la Dra. Alena Golubkova, así como Camille Schlegel, la Supervisora Asistente de Investigación de nuestro laboratorio. Para comenzar, cultive los androides integrados en BMM durante siete a 10 días con 50% de medios acondicionados LWRN para la generación enteroide apical-out o AO.
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