Establecimiento de un modelo de rata simple y eficaz para la obtención de imágenes intraoperatorias de la glándula paratiroides

La glándula paratiroides es un órgano pequeño con funciones muy importantes. Nuestro protocolo se puede utilizar para desarrollar nuevas tecnologías de identificación de PG que pueden ayudar a los cirujanos a protegerlo durante la tiroidectomía para el cáncer de tiroides. La principal ventaja de este modelo es que puede observar una clara diferencia entre la tiroides y los PG a través de la imagen negativa de IONP.

Además, el costo y la dificultad operativa son considerablemente menores para este modelo de rata que para los modelos de animales grandes. Para comenzar, coloque una almohadilla térmica precalentada en la mesa quirúrgica para mantener la temperatura corporal del animal durante la cirugía, y luego transfiera la rata anestesiada a una cortina quirúrgica colocada en la mesa de operaciones. Usando bandas elásticas, fije las extremidades de la rata a la mesa de operaciones y coloque una almohada cilíndrica hecha de drapeado debajo del hombro de la rata para inclinar la cabeza hacia atrás, exponiendo completamente el área del cuello, luego aplique crema depilatoria en el área del cuello, hasta el espacio submandibular, hasta el proceso xifoideo y en ambos lados hacia el exterior del músculo esternocleidomastoideo.

Después de tres minutos, limpie suavemente el cabello y la crema depilatoria con un pañuelo desechable. Luego, usando una bola de algodón yodóforo, esterilice el centro del cuello y el área circundante. del cual se elimina el vello.

Cubra al animal con una cortina quirúrgica, manteniendo el orificio alineado con el área desinfectada. Usando el bisturí, haga aproximadamente una incisión longitudinal de cinco centímetros en la línea media anterior del cuello de la rata. Levante la piel a lo largo de ambos lados de la incisión y usando tijeras, corte longitudinalmente a lo largo de la línea alba cervicalis.

Use fórceps para separar el músculo esternohioideo y el músculo esternotiroideo. Sujete los músculos separados delante del cuello con fórceps vasculares y tire del tejido sujetado hacia afuera. Con la aguja, pase la sutura a través del tejido sujetado.

Haga un nudo y fije la sutura a la cortina quirúrgica de la mesa de operaciones. Localice el cartílago tiroides en función de su forma de escudo y el cartílago cricoides en función de su forma de anillo como límite superior en el área de operación, luego ubique la tráquea en función de su forma de anillo de cartílago tubular en la parte frontal y media del cuello como el límite inferior en el área de operación. Localice la glándula tiroides, una glándula roja en forma de mariposa en el lado opuesto de la tráquea entre los límites superior e inferior.

A continuación, localice dos glándulas paratiroides en forma fusiforme que son rojizas, pero más claras que la glándula tiroides circundante con un cierto límite en los lados superior y externo de la glándula tiroides. Tome una fotografía frontal de las glándulas paratiroides con la tráquea, la tiroides y la laringe. Diseccionar la parte posterior del esófago y usando un retractor, exponer el lado derecho de las glándulas paratiroides.

Tome una fotografía del lado derecho de las glándulas paratiroides con la glándula tiroides y la tráquea, y de manera similar exponga y capture el lado izquierdo de las glándulas. Use una jeringa de insulina para inyectar localmente 10 microlitros de suspensión de nanopartículas de óxido de hierro negro en el centro de la glándula tiroides, y presione suavemente el sitio de inyección con una gasa durante cinco segundos, luego observe la rápida difusión de las nanopartículas de óxido de hierro negro dentro de las glándulas tiroides, pero no las glándulas paratiroides, ya que tiñe negativamente las glándulas paratiroides y las diferencia de la tiroides circundante. Capture las fotografías frontales, izquierda y derecha de las glándulas paratiroides teñidas negativamente junto con la tráquea, la glándula tiroides y la laringe.

Después de la inyección, el agente de contraste, las nanopartículas de óxido de hierro negro, se difunden fácilmente dentro de la glándula tiroides y la tiñen de negro, pero no pueden infiltrarse en la glándula paratiroides debido a su alta densidad de tejido. El análisis histológico de las nanopartículas de óxido de hierro negro inyectadas en la glándula tiroides reveló que las glándulas paratiroides están enriquecidas con células principales estrechamente alineadas, mientras que la glándula tiroides presenta muchos lúmenes sueltos que indican una densidad tisular mucho menor. Dos cosas importantes deben ser recordadas en este procedimiento.

Primero, la postura de la rata. Recomendamos inclinar las orejas y la cabeza hacia atrás, exponiendo completamente el área del cuello. En segundo lugar, cuando inyectamos los IONPs, debemos usar una aguja de aseguramiento fino porque la superficie tiroidea está llena de vasos sanguíneos.

Este procedimiento también se puede realizar mediante imágenes de autofluorescencia del PG, que no es invasivo, proporciona información en tiempo real y no utiliza colorante como agente de contraste, pero la señal de autofluorescencia es débil y la eficiencia de la imagen también es pobre. Otros investigadores pueden usar este modelo de rata simple y efectivo para desarrollar y evaluar nuevas tecnologías y productos de identificación de PG en lugar de usar animales grandes más complicados y costosos, como perros y cerdos.