Name: Estimación del rendimiento de compuestos en la placa TLC mediante la técnica de iluminación Blue-LED (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-06T13:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 14 s
Description: Aprende a estimar el rendimiento de compuestos en placas TLC mediante iluminación blue-LED. Este método seguro, económico y eficaz permite medir múltiples muestras simultáneamente en investigación de productos naturales.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este estudio fue apoyado por el Ministerio de Ciencia y Tecnología de Taiwán (MOST 108-2320-B-110-007-MY3).

El presente protocolo se describe utilizando lovastatina como ejemplo. La lovastatina se extrajo de Aspergillus terreus de una semana de edad.
1. Extracción de compuestos
NOTA: Para obtener detalles sobre la extracción de compuestos, consulte la Figura 1.
<ol><li>Cultivo de Aspergillus terreus en el medio de agar dextrosa de patata (PDA, ver Tabla de materiales) a 30 °C.</li>
	<li>Secar el cultivo a 40 °C durante 24 h. Transfiera el cultivo seco a un tubo de 50 ml con pinzas esterilizadas y agregue 15 ml de acetato de etilo.</li>
	<li>Agitar vigorosamente la mezcla haciendo vórtice durante 1 min e incubar durante 1 h a 40 °C agitando a 200 rpm.</li>
	<li>Sonicar la mezcla con un baño ultrasónico de 40 kHz (ver Tabla de materiales) a 40 °C durante 1 h.</li>
	<li>Centrifugar la mezcla a 5.000 x g durante 1 min a temperatura ambiente y filtrar a través de un papel de filtro de 11 μm.</li>
	<li>Extraiga el filtrado con un volumen igual de agua estéril en un embudo separador.</li>
	<li>Después de la separación de fases, recoja la capa orgánica y luego evapore en un evaporador rotativo (consulte la Tabla de materiales). Disolver el residuo en 2 mL de acetato de etilo.</li>
</ol>2. Separación del extracto crudo por columna de adsorción en fase normal (NP)
<ol><li>Empaque la columna con gel de sílice NP como fase estacionaria y use n-hexano: acetato de etilo: ácido trifluoroacético (H: E: T; 80: 20: 0.1, v / v / v) como fase móvil.</li>
	<li>Cargue 2 ml del extracto (paso 1) en la columna y agregue el disolvente de fase móvil a un caudal de 1 ml / min para eluyir el extracto. NOTA: El caudal se controló manualmente mediante una llave de paso.</li>
	<li>Verifique el efluente mediante TLC para confirmar la presencia de lovastatina y luego evapore en un evaporador rotativo a 45 °C hasta que se elimine el disolvente. Este paso dura aproximadamente 20-25 min.</li>
	<li>Disuelva el residuo en 1 ml de acetato de etilo y luego mezcle con un volumen igual de ácido trifluoroacético al 1%.</li>
	<li>Centrifugar la mezcla a 5.000 x g durante 1 min a temperatura ambiente y recoger la capa orgánica en un nuevo tubo de vidrio.</li>
</ol>3. Preparación y carga de placas de cromatograma en capa fina (TLC)
<ol><li>Coloque 5 μL de muestras y patrones de lovastatina (ver Tabla de materiales) en la línea de base de la placa TLC usando una pipeta capilar, dejando un borde de 1 cm en los lados de la placa TLC.</li>
	<li>Seque la placa TLC en una campana extractora durante 5 minutos a temperatura ambiente.</li>
	<li>Coloque la placa suavemente con pinzas en una cámara de vidrio saturado que contenga el disolvente de fase móvil. Cubra la cámara con una tapa de vidrio y permita que la placa se desarrolle completamente.</li>
	<li>Retire la placa de la cámara cuando la línea de disolvente alcance 1 cm de la parte superior de la placa.</li>
</ol>4. Análisis por el iluminador LED-azul
<ol><li>Marque la línea del disolvente con un lápiz. Seque la placa en la campana extractora durante 10 minutos a temperatura ambiente.</li>
	<li>Después del secado, remoje inmediatamente la placa en un disolvente deH2SO4 al 10% y luego seque en la campana extractora durante 10 minutos a temperatura ambiente.</li>
	<li>Coloque la placa en el panel calefactor hasta que aparezcan las manchas marrones. Asegúrese de que la placa no esté sobrecalentada, ya que esto podría dificultar la visualización de lovastatina.</li>
	<li>Transfiera la placa al iluminador LED azul y escanee utilizando un software gratuito compatible (MiBio Fluo) (consulte la Tabla de materiales).</li>
</ol>5. Estimación del rendimiento por el modelo de regresión
<ol><li>Mida la dimensión de las bandas utilizando el software ImageJ (consulte Tabla de materiales).</li>
	<li>Establecer un modelo de regresión utilizando software de análisis de datos y gráficos (consulte la Tabla de materiales) basado en las concentraciones descendentes de los estándares de lovastatina, incluidos 1 mg / ml, 0.75 mg / ml, 0.5 mg / ml y 0.25 mg / ml.</li>
	<li>Aplicar el modelo de regresión para estimar el rendimiento de las muestras.</li>
</ol>

<ol><li>Pyka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+progress+of+selected+drugs+in+TLC%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Detection progress of selected drugs in TLC.</a> BioMed Research International. 2014, 732078(2014).</li>
<li>Hess, A. V. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digitally+enhanced+thin-layer+chromatography%3A+An+inexpensive%2C+new+technique+for+qualitative+and+quantitative+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Education%22%5BJournal%5D)">Digitally enhanced thin-layer chromatography: An inexpensive, new technique for qualitative and quantitative analysis.</a> Journal of Chemical Education. 84 (5), 842-847 (2007).</li>
<li>Ullah, Q., Mohammad, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitamins+determination+by+TLC%2FHPTLC-a+mini-review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Planar+Chromatography+-+Modern+TLC%22%5BJournal%5D)">Vitamins determination by TLC/HPTLC-a mini-review.</a> Journal of Planar Chromatography - Modern TLC. 33 (5), 429-437 (2020).</li>
<li>Chen, Z., Tao, H., Liao, L., Zhang, Z., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quick+identification+of+xanthine+oxidase+inhibitor+and+antioxidant+from+Erycibe+obtusifolia+by+a+drug+discovery+platform+composed+of+multiple+mass+spectrometric+platforms+and+thin-layer+chromatography+bioautography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Separation+Science%22%5BJournal%5D)">Quick identification of xanthine oxidase inhibitor and antioxidant from Erycibe obtusifolia by a drug discovery platform composed of multiple mass spectrometric platforms and thin-layer chromatography bioautography.</a> Journal of Separation Science. 37 (16), 2253-2259 (2014).</li>
<li>Duncan, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chiral+separations%3A+A+comparison+of+HPLC+and+TLC%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Liquid+Chromatography%22%5BJournal%5D)">Chiral separations: A comparison of HPLC and TLC.</a> Journal of Liquid Chromatography. 13 (14), 2737-2755 (1990).</li>
<li>Sherma, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thin-layer+chromatography+in+food+and+agricultural+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Thin-layer chromatography in food and agricultural analysis.</a> Journal of Chromatography A. 880 (1-2), 129-147 (2000).</li>
<li>Bocheńska, P., Pyka, A., Bocheńska, P., Bocheńska, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+acetylsalicylic+acid+in+pharmaceutical+drugs+by+TLC+with+densitometric+detection+in+UV%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Liquid+Chromatography%22%5BJournal%5D)">Determination of acetylsalicylic acid in pharmaceutical drugs by TLC with densitometric detection in UV.</a> Journal of Liquid Chromatography. 35 (10), 1346-1363 (2012).</li>
<li>Poole, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planar+chromatography+at+the+turn+of+the+century%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Planar chromatography at the turn of the century.</a> Journal of Chromatography A. 856 (1-2), 399-427 (1999).</li>
<li>Rapid Johnson, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((simple+quantitation+in+thin-layer+chromatography+using+a+flatbed+scanner%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Education%22%5BJournal%5D)">simple quantitation in thin-layer chromatography using a flatbed scanner.</a> Journal of Chemical Education. 77 (3), 368-372 (2000).</li>
<li>El-Gindy, A., Ashour, A., Abdel-Fattah, L., Shabana, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+derivative+spectrophotometric%2C+TLC-densitometric%2C+and+HPLC+determination+of+acebutolol+HCL+in+presence+of+its+acid-induced+degradation+product%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">First derivative spectrophotometric, TLC-densitometric, and HPLC determination of acebutolol HCL in presence of its acid-induced degradation product.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 24 (4), 527-534 (2001).</li>
<li>Elkady, E. F., Mahrouse, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversed-phase+ion-pair+HPLC+and+TLC-densitometric+methods+for+the+simultaneous+determination+of+ciprofloxacin+hydrochloride+and+metronidazole+in+tablets%5BTitle%5D)+AND+%22Chromatographia%22%5BJournal%5D)">Reversed-phase ion-pair HPLC and TLC-densitometric methods for the simultaneous determination of ciprofloxacin hydrochloride and metronidazole in tablets.</a> Chromatographia. 73 (3-4), 297-305 (2011).</li>
<li>Musharraf, S. G., Ul Arfeen,, Shoaib, Q., M, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+TLC-densitometric+method+for+the+quantification+of+a+steroidal+drug%2C+danazol+in+its+pharmaceutical+formulations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Planar+Chromatography+-+Modern+TLC%22%5BJournal%5D)">Development and validation of TLC-densitometric method for the quantification of a steroidal drug, danazol in its pharmaceutical formulations.</a> Journal of Planar Chromatography - Modern TLC. 25 (4), 331-337 (2012).</li>
</ol>

Todos los autores declaran que no tienen conflictos de intereses.

El presente estudio describió un nuevo enfoque, el iluminador azul-LED, para cuantificar compuestos sin utilizar equipos costosos y especializados, como HPTLC, HPLC y GC, y el método se comparó con los métodos de bioensayo y UV detectados para evaluar el rendimiento de cuantificación. Como resultado, se concluyó que el método de iluminación blue-LED es un protocolo relativamente seguro y efectivo utilizado para cuantificar el rendimiento de compuestos específicos en la placa TLC.
Estudios prev...

La cromatografía en capa fina (TLC) es ampliamente utilizada como técnica cualitativa y cuantitativa en el campo de la química orgánica 1,2,3. Las principales ventajas de TLC son que proporciona una detección rápida, requisitos de muestra flexibles y no requiere equipos especializados4. Hasta la fecha, a pesar de que se han establecido muchos enfoques avanzados, TLC sigue siendo el método principal para identificar muestras desconocidas en una mezcla. Sin embargo, el desafío de este enfoque es la falta de equipos seguros y económicos para cuantificar el rendimiento de la muestra, especialmente para desarrollar laboratorios con presupuestos limitados. El presente estudio, por lo tanto, tuvo como objetivo desarrollar un método eficiente, seguro y económico combinado con TLC para estimar el rendimiento de las muestras.
A diferencia de la TLC de alta resolución (HPTLC), la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y la cromatografía de gases (GC) con requisitos estrictos de muestra, tiempo y participación de múltiples pasos para la preparación de muestras1,5, TLC mostró varias ventajas. Primero, para la preparación de la muestra, la HPLC y el GC no pueden detectar el extracto crudo porque el extracto crudo puede tapar la columna de HPLC y GC. En segundo lugar, cuando las muestras no son aptas para UV (importante para el análisis de HPLC) o con baja volatilidad (importante para el análisis de GC), se puede aplicar TLC a estas muestras, y el uso de reactivo de visualización hace que las muestras aisladas sean visibles en capas delgadas 6,7,8. En tercer lugar, para los usuarios generales, HPLC y GC generalmente requieren un tiempo relativamente largo de capacitación previa antes de trabajar de forma independiente, en comparación con TLC. Además, el análisis cuantitativo de TLC, conocido como TLC de alto rendimiento (HPTLC), puede digitalizar la información en una placa TLC con un escáner altamente sensible. Sin embargo, el costo del sistema HPTLC es relativamente caro. Como tal, el desarrollo de un enfoque rentable y rápido para cuantificar muestras en la placa TLC es un tema importante.
Se han desarrollado métodos similares para la cuantificación del rendimiento de TLC; por ejemplo, Johnson9 informó de una técnica que permite la cuantificación de las muestras en una placa TLC mediante el uso de un escáner plano conectado a una computadora. En 2001, El-Gindy et al.10 desarrollaron el método TLC-densitométrico, que fue utilizado para detectar el compuesto con densidad óptica, y la técnica también fue aplicada por Elkady et al.11. En 2007, Hess2 presentó el método digitalmente mejorado TLC (DE-TLC) aplicado para detectar el rendimiento de un compuesto en una placa TLC utilizando una cámara digital combinada con luz UV. Hess también comparó las diferencias de costos entre el método HPTLC y el método DE-TLC y concluyó que el método DE-TLC podría usarse en laboratorios de escuelas secundarias y universidades debido a su costo asequible2. Sin embargo, el costo del método TLC-densitométrico seguía siendo caro, y la operación de la luz ultravioleta requiere un entrenamiento previo adecuado en caso de que los usuarios puedan exponerse a la radiación ultravioleta. Por lo tanto, compatible con TLC, es deseable desarrollar un método eficiente, seguro y económico para cuantificar el rendimiento de la muestra.
El presente estudio describió un protocolo para detectar la muestra en una placa TLC utilizando el iluminador LED-azul, y desarrolló un modelo de regresión con alta confiabilidad (alto valor R-cuadrado) para medir las dimensiones de las bandas y luego determinar el rendimiento compuesto. Finalmente, se encontró que el método de iluminación azul-LED es relativamente seguro (vs. Método de detección UV), barato (vs. GC, HPLC y HPTLC), y un enfoque efectivo (frente al método de bioensayo) para la cuantificación del rendimiento.

<table><tbody><tr><td>Agar bacteriológico americano</td><td>Condalab</td><td>1802.00</td><td></td></tr><tr><td>Aspergillus terreus&nbsp; </td><td></td><td>ATCC 20542</td><td></td></tr><tr><td>Iluminador Blue-LED</td><td>MICROTEK</td><td>Bio-1000F</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td>HERAEUS Megafuge 8</td><td></td></tr><tr><td>Lámpara UV compacta</td><td>UVP</td><td>UVGL-25</td><td></td></tr><tr><td>Acetato de etilo</td><td>MACRON</td><td>MA-H078-10</td><td></td></tr><tr><td>Papel de filtro 125mm</td><td>ADVANTEC</td><td>60311102</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>Freeware</td><td>https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td></tr><tr><td>Lovastatin standard</td><td>ACROS</td><td>A0404262</td><td></td></tr><tr><td>MiBio Fluo&nbsp;</td><td>MICROTEK</td><td>V1.04</td><td></td></tr><tr><td>n-Hexano</td><td>C-ECHO</td><td>HH3102-000000-72EC</td><td></td></tr><tr><td>OriginPro</td><td>OriginLab</td><td>9.1</td><td>https://www.originlab.com/origin</td></tr><tr><td>Caldo de patata dextrosa H</td><td>STBIO MEDIA</td><td></td><td></td></tr> 110533 <tr><td>Evaporador rotativo</td><td>EYELA</td><td>SB-1000</td><td></td></tr><tr><td>Ácido sulfúrico</td><td>Fluka</td><td>30743-2.5L-GL</td><td></td></tr><tr><td>TLC gel de sílice 60 F254</td><td>MERCK</td><td>1.05554.0001</td><td></td></tr><tr><td>Ácido trifluoroacético</td><td>Alfa Aesar</td><td>10229873</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de vibración ultrasónica</td><td>DELTA</td><td>DC600</td><td></td></tr></tbody></table>

estimación del rendimiento de compuestos en la placa tlc mediante la técnica de iluminación blue-led

Estimating the Yield of Compounds on the TLC Plate via the Blue-LED Illumination Technique

La cromatografía en capa fina (TLC) es una técnica analítica accesible que se ha utilizado ampliamente en la investigación de química orgánica para cuantificar el rendimiento de muestras desconocidas. El presente estudio desarrolló un método efectivo, barato y seguro para estimar el rendimiento de las muestras en una placa TLC utilizando el iluminador LED azul. La lovastatina extraída de Aspergillus terreus fue el compuesto de ejemplo utilizado en el presente estudio. Se utilizaron modelos de regresión basados en el estándar de lovastatina para evaluar el rendimiento de lovastatina. Se compararon tres métodos: bioensayo, detección UV e iluminación LED azul. El resultado mostró que el método de iluminación LED-azul es significativamente más efectivo en el tiempo que los métodos de detección UV y bioensayo. Además, la iluminación LED azul fue una opción relativamente segura debido a la preocupación por los peligros biológicos en el método de bioensayo (por ejemplo, infección microbiana) y la exposición ultravioleta en el método de detección UV. En comparación con los métodos costosos que requieren instrumentos especializados y capacitación a largo plazo antes de trabajar de forma independiente, como GC, HPLC y HPTLC, el uso del iluminador LED azul fue una opción económica para estimar el rendimiento de las muestras de una placa TLC.

Este estudio presentó el método de iluminación azul-LED para estimar el rendimiento de los compuestos, y este método fue validado y comparado con los métodos de bioensayo y detección UV (Tabla 1). Los modelos de regresión se desarrollaron en base a las dimensiones de las bandas y la concentración de patrones para tres métodos, respectivamente, para predecir el rendimiento de las muestras. En primer lugar, en los resultados del método de bioensayo, el R-cuadrado entre las dimensiones de la zona de inhibic...

El presente protocolo desarrolló un método para estimar el rendimiento de compuestos en la placa TLC utilizando la técnica de iluminación azul-LED. Las ventajas de este enfoque son que es seguro, efectivo, económico y permite al investigador medir múltiples muestras simultáneamente.

Estimación del rendimiento de compuestos en la placa TLC mediante la técnica de iluminación Blue-LED

Thin-layer chromatography (TLC) is an accessible analytical technique that has been extensively used in organic chemistry research to quantify the yield ...

Este protocolo desarrolló un método para estimar el rendimiento de compuestos en la placa TLC utilizando la técnica de iluminación azul-LED. Las ventajas de este método son que la técnica de iluminación azul-LED es un método seguro, eficaz y barato, y permite al investigador medir múltiples muestras al mismo tiempo. Este método también se puede aplicar a la bioquímica y la química de productos naturales.Para comenzar, seque el cultivo a 40 grados centígrados durante 24 horas. Transfiera el cultivo seco a un tubo de 50 mililitros con pinzas esterilizadas y agregue 15 mililitros de acetato de etilo. Agitar la mezcla vigorosamente haciendo vórtice durante un minuto e incubar el tubo durante una hora a 40 grados centígrados con agitación a 200 RPM.Luego sonicar la mezcla usando un baño ultrasónico de 40 kilohercios a 40 grados centígrados durante una hora. A continuación, centrifugar la mezcla a 5, 000 G durante un minuto a temperatura ambiente y filtrar a través de un papel de filtro de 11 micrómetros. Extraiga el filtrado con un volumen igual de agua estéril en un embudo separador.Después de la separación de fases, recoja la capa orgánica, evapore en un evaporador rotativo y disuelva el residuo en dos mililitros de acetato de etilo. Empaque la columna con gel de sílice de fase normal como fase estacionaria, y use acetato de etilo de n-hexano y ácido trifluoroacético como fase móvil. Cargue dos mililitros del extracto en la columna y agregue el disolvente de fase móvil a un caudal de un mililitro por minuto para eluyir el extracto.Después de verificar el efluente por TLC para confirmar la presencia de lovastatina, evaporar en un evaporador rotativo a 45 grados centígrados hasta que se elimine el solvente. Disuelva el residuo en un mililitro de acetato de etilo y luego mezcle con un volumen igual de ácido trifluoroacético al 1%. Centrifugar la mezcla a 5, 000 G durante un minuto a temperatura ambiente y recoger la capa orgánica en un nuevo tubo de vidrio.Usando una pipeta capilar se señalan cinco microlitros de muestras y patrones de lovastatina en la línea de base de la placa TLC, dejando un borde de un centímetro en los lados de la placa TLC. Luego seque la placa TLC en una campana extractora durante cinco minutos a temperatura ambiente. Coloque la placa suavemente con pinzas en una cámara de vidrio saturado que contenga el disolvente de fase móvil.Cubra la cámara con una tapa de vidrio y permita que la placa se desarrolle completamente. Retire la placa de la cámara cuando la línea de disolventes alcance un centímetro de la parte superior de la placa. Marque la línea de disolvente con un lápiz y seque la placa en la campana extractora durante 10 minutos a temperatura ambiente.Después del secado, remoje inmediatamente la placa en disolvente de ácido sulfúrico al 10% y luego seque en la campana extractora durante 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, coloque la placa en el panel calefactor hasta que aparezcan las manchas marrones. Transfiera la placa al iluminador LED azul y escanee utilizando software gratuito compatible.Los resultados obtenidos del método de bioensayo demostraron que el cuadrado R entre las dimensiones de la zona de inhibición y los estándares de lovastatina fue de 0,99, y el rendimiento de la muestra fue de 0,56 miligramos según lo predicho por el modelo de regresión. El método de detección UV muestra que el cuadrado R entre los estándares de lovastatina y la dimensión de las bandas en la placa TLC fue de 0,97, y el rendimiento de la muestra predicho por el modelo de regresión fue de 0,53 miligramos. Sin embargo, los bordes de la banda eran borrosos y se observaron bandas de intensidad de señal relativamente bajas.Para el método de iluminación LED-azul, el cuadrado R entre los estándares de lovastatina y la dimensión de la banda en la placa TLC fue de 0,98, y el rendimiento de la muestra fue de 0,54 miligramos según lo predicho por el modelo de regresión. El rendimiento previsto utilizando el iluminador LED-azul estaba más cerca del método de bioensayo y se obtuvieron bandas claras. Si la placa se sobrecalienta, la visualización de lovastatina puede ser difícil de observar.

estimating-yield-compounds-on-tlc-plate-via-blue-led-illumination

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

Composición de los extractos de lípidos polares y la composición de ácidos grasos de glicerolípidos individuales están determinados en un experimento de lípidos perfil simple y robusto. Para ello, glicerolípidos están aislados por cromatografía en capa fina y se somete a transmetilación de sus grupos acilo. Grasos methylesters acilo son cuantificados por cromatografía de gases.

Perfiles de Arabidopsis thaliana Polar Glycerolipid por cromatografía en capa fina (TLC), junto con cromatografía de gases (GLC)

Este video muestra un ensayo enzimático basado en cromatografía en capa fina para determinar la actividad de la pirofosfoquinasa utilizando nucleótidos radiomarcados. El método proporciona información sobre la síntesis de nucleótidos y las reacciones de fosfotransferencia.

Ensayo de actividad enzimática basado en cromatografía en capa fina: una técnica para determinar la actividad de la pirofosfoquinasa in vitro mediante cromatografía en capa fina

Se describen procedimientos para cromatografía en capa fina (TLC) separación de extractos de plantas y el contacto bioautografía para identificar metabolitos antibacterianos. Los métodos se aplican a la selección de compuestos fenólicos de trébol rojo que inhiben las bacterias productoras de amoniaco hiper (HAB) nativas para el rumen bovino.

Cromatográfico en capa fina (TLC) Separaciones y bioensayos de extractos vegetales para identificar compuestos antimicrobianos

La derivación de un flavonol es crucial para su aplicación en la salud y la industria alimentaria. Aquí, proporcionamos un protocolo detallado para la biosíntesis de un flavonol de una flavanona y discutimos los pasos cruciales y sus ventajas sobre otros enfoques.

Biosíntesis de un Flavonol de un Flavanone estableciendo una cascada bienimática de un solo pozo

Este método describe el uso de una nueva metodología de alto rendimiento, basada en reacciones químicas de gotitas, para la optimización rápida y económica de radiofármacos utilizando cantidades de nanomoles de reactivos.

Optimización de reacciones radioquímicas utilizando matrices de gotitas

Aquí, se presenta un protocolo para el etiquetado metabólico de levaduras con ácido 14C-acético, que se combina con cromatografía de capa delgada para la separación de lípidos neutros.

Análisis de síntesis de lípidos neutros en Saccharomyces cerevisiae mediante etiquetado metabólico y cromatografía en capa delgada

Demostramos inyección intraperitoneal en adultos de pez cebra. Nosotros usamos un 10 l microjeringa NanoFil controlado por un controlador Micro4 y III UltraMicroPump. Esta demostración incluye el uso de agua fría como un anestésico.

Inyección intraperitoneal en adultos de pez cebra

La producción de C. elegans Los transgenes a través de recombinería con la GALK Marcador seleccionable

Este artículo detalla los procedimientos involucrados en la sobreexpresión y el análisis de las pequeñas GTPasas en células epiteliales polarizadas utilizando la técnica de microinyección.

El análisis de la función de las pequeñas GTPasas de la microinyección de plásmidos en células epiteliales polarizadas

La información espacio-temporal sobre las proteínas dinámicas dentro de las células vivas es crucial para entender la biología. Un tipo de microscopía de superresolución llamada microscopía rápida de iluminación estructurada en 3D (f3D-SIM) revela información única sobre el anillo Z citocinético en las bacterias: tanto su apariencia en forma de perla como la rápida dinámica de FtsZ dentro del anillo.

Super-resolución de imagen del anillo Z cytokinetic en bacterias vivas Utilizando 3D-estructurado Fast Iluminación Microscopía (F3D-SIM)

Aprende a estimar el rendimiento de compuestos en placas TLC mediante iluminación blue-LED. Este método seguro, económico y eficaz permite medir múltiples muestras simultáneamente en investigación de productos naturales.

Estimación del rendimiento de compuestos en la placa TLC mediante la técnica de iluminación Blue-LED

Explorar más videos