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DOI: 10.3791/64281-v
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El presente protocolo describe el diseño, fabricación y caracterización de un sistema microfluídico capaz de alinear, inmovilizar y comprimir con precisión cientos de embriones de Drosophila melanogaster con una intervención mínima del usuario. Este sistema permite obtener imágenes de alta resolución y recuperar muestras para el análisis posterior a la estimulación y se puede escalar para adaptarse a otros sistemas biológicos multicelulares.
Este protocolo explica cómo fabricar y utilizar tecnologías de microfluídica para aprovechar los beneficios experimentales en el rendimiento de muestras, el manejo automatizado y la capacidad de aplicar con precisión la tensión mecánica mientras se visualizan simultáneamente las muestras. Esta técnica minimiza el manejo manual de organismos biológicos multicelulares, como embriones y organoides, para su inmovilización, alineación e imágenes en vivo. También permite la aplicación de compresión mecánica a ellos para estudios de mecanobiología.
La fabricación de moldes con características de alta relación de aspecto para este chip microfluídico puede ser un desafío con las técnicas de microfabricación convencionales. Los consejos explicados en este artículo de video pueden superar estos desafíos. Para comenzar, limpie la oblea de silicio primero con acetona y luego con alcohol isopropílico.
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