Análisis conductuales y basados en la farmacología de redes para la medicina tradicional mongola Zadi-5 en un modelo de depresión en ratas

La eficacia terapéutica de Zadi-5 en el tratamiento de la depresión puede establecerse a través de pruebas de comportamiento, mientras que la farmacología en red puede predecir los posibles mecanismos que subyacen a su potencia. La farmacología en red puede apoyar la exploración de medicamentos tradicionales que muestran mecanismos de acción intrincados y minimizar aún más el tiempo y los gastos necesarios para la investigación. Pruebas como la prueba de campo abierto, la prueba de consumo de sacarosa y el laberinto de agua de Morris son el estándar de oro para evaluar el apetito, los niveles de motivación, la capacidad de aprendizaje y la memoria, en modelos animales de trastornos neurológicos.

Estas pruebas son métodos simples, objetivos y razonables para la evaluación. El establecimiento de un modelo animal es crucial para comprender los mecanismos patológicos y los efectos de un nuevo fármaco en un estudio de trastorno depresivo. Para establecer un buen modelo de depresión, los investigadores deben secuenciar y ajustar adecuadamente las intensidades de los estímulos.

Para comenzar, aplique los estímulos de depresión seleccionados, combinados con aislamiento, durante 28 días a todas las ratas, excepto a los controles, y críe a las ratas en jaulas individuales. Para realizar la prueba de campo abierto, divida una caja negra en nueve regiones cuadradas de igual área. Equipe la caja con un sistema de análisis de seguimiento de video.

Un día después de la última sonda nasogástrica, coloque a la rata en el cuadrado central y registre sus actividades horizontales y verticales durante tres minutos. A continuación, puntúa el número de casillas cruzadas con todas las pausas como una actividad horizontal, y puntúa el estar de pie y el aseo como una actividad vertical. Después de cada prueba, limpie la caja con alcohol al 75% para eliminar el olor de la rata para pruebas posteriores.

A continuación, realice la prueba de consumo de sacarosa pesando las respectivas botellas antes y después del consumo. Y calcule las tasas de preferencia de sacarosa de 60 minutos en los días cero, siete, 14, 21 y 28 usando esta ecuación. Para realizar la prueba del laberinto acuático de Morris, divida la piscina en cuatro cuadrantes.

Ordena los cuadrantes del uno al cuatro, y coloca la plataforma oculta en el tercer cuadrante, un centímetro por debajo de la superficie del agua. Agregue leche a la piscina para obtener cierto nivel de opacidad. A continuación, coloca al sujeto de la rata en el laberinto en diferentes cuadrantes para buscar la plataforma durante 120 segundos.

Y registre el tiempo de latencia utilizando el sistema de análisis de rastros de video Morris Water Maze. Coloque al sujeto de la rata en una posición fija en la piscina. Si el sujeto no puede encontrar la plataforma oculta en 120 segundos, registre la latencia como 120 segundos.

A continuación, desaloje la plataforma, coloque a la rata en el agua y registre el número de cruces de zona durante 120 segundos. Navegue por la página web de farmacología del sistema de medicina tradicional china e ingrese semillas de semen de myristicae, raíces de al-glandia-radiks y fructus de piperis longi en la sección de nombres de hierbas para obtener los nombres de los productos químicos. Establezca que el índice farmacocinético de biodisponibilidad oral, u OB, sea superior al 30% y que el índice similar al fármaco sea superior a 0,18.

Busque los componentes activos en la farmacopea de la medicina china para identificar los nombres químicos de cada componente. A continuación, busque los nombres químicos identificados en Pub Chem para encontrar las sonrisas isoméricas o tintas. Identifique las proteínas diana de los componentes activos utilizando SEA, Batman y la predicción de dianas suizas con sonrisas isoméricas o tinta, y encuentre las proteínas superpuestas.

Copie los datos en un archivo de Excel. A continuación, busque e identifique las posibles dianas proteicas para la depresión utilizando las palabras clave depresión y trastorno depresivo en GeneCards, DisGeNET y DrugBank. Copie los datos en un archivo de Excel.

Navega por el diagrama de Venn y sube los objetivos de la depresión en la lista uno. A continuación, cargue los objetivos de los componentes activos de Zadi-5 en la lista dos y envíelos. Obtén el diagrama de Venn y filtra los candidatos a objetivos superpuestos.

Construye una hoja de cálculo, llamada red. También construye una hoja de cálculo, llamada tipo. Exporte la hoja a Cytoscape para construir la red, Zadi-5 ingredientes de hierbas ingredientes objetivos de enfermedades.

Establezca los destinos comunes en la base de datos de cadenas para analizar sus interacciones. Establezca el tipo de proteína como homosapiens. Establezca el valor del umbral de interacción en 0,9 para seleccionar solo los tipos verificados experimentalmente y no mostrar los nodos de la isla solitaria.

Abra la herramienta DAVID y pegue las 86 posibles dianas antidepresivas de Zadi-5 en el soporte de análisis de inicio para estudiar las vías de señalización relacionadas. Descargue el documento de la ruta del barril. Seleccione los genes de la vía PI3k-AKT del análisis de enriquecimiento y péguelos en la hoja de cálculo para construir un documento de tipo y red.

Exporte el tipo de documento de red a Cytoscape para generar la red de rutas de objetivos compuestos visualizados PI3K-AKT. El grupo de animales analizados no mostró diferencias significativas antes del estrés leve crónico imprevisto o la estimulación CUMS. Después de establecer el modelo CUMS, las puntuaciones verticales y horizontales del grupo fueron inferiores a las del control.

En comparación con el grupo modelo, las puntuaciones verticales y horizontales de los grupos de control positivo y Zadi-5 fueron significativamente más altas. En el día cero, los grupos analizados no tuvieron diferencias significativas en el consumo de sacarosa. El grupo Zadi-5 y el grupo de control positivo fueron más altos que el grupo modelo en el día 28.

En el laberinto acuático de Morris, la latencia del grupo modelo para encontrar la plataforma fue significativamente mayor en comparación con el control. La latencia de los grupos de control positivo y Zadi-5 fue menor que en el grupo modelo. En cuanto a los recuentos de cruces de zonas, el grupo modelo mostró menos cruces que el control.

Los grupos control positivo y Zadi-5 mostraron más cruces que el grupo modelo. El análisis del diagrama de Venn reveló 86 dianas superpuestas como dianas críticas relacionadas con la depresión de Zadi-5 de las 1000 dianas proteicas relacionadas con la depresión. Sobre la base de estos hallazgos, se construyeron los objetivos de enfermedad de los ingredientes de las hierbas Zadi-5 y un análisis de la red de interacción proteína-proteína de los candidatos objetivo.

De acuerdo con el análisis de la vía KEG, la vía de señalización PI3K-AKT ocupó el séptimo lugar. Se asoció con muchas vías de señalización. En consecuencia, la vía PI3K-AKT se consideró relativamente más importante que las otras vías de enriquecimiento.

Al intentar este procedimiento, es crucial abstenerse de repetir el mismo tipo de estímulos durante días consecutivos. Tras los análisis de los componentes de Zadi-5 en las bases de datos en línea, se puede asegurar la calidad de la validación mediante cromatografía líquida, espectrometría de masas y espectroscopia de resonancia magnética nuclear.