Sistema de pseudoislotes humanos para la evaluación sincrónica de la dinámica de biosensores fluorescentes y perfiles de secreción de hormonas

Nuestro laboratorio está trabajando para comprender, prevenir y revertir la disfunción de las células beta y otras anomalías de los párpados en la diabetes tipo uno y tipo dos. Nuestros estudios se centran en la patogénesis de la diabetes humana mediante la integración de estudios de la biología del páncreas y los párpados humanos y la salud y la enfermedad. Los ojales humanos son estructuras esféricas en 3D, y el acceso a las células a lo largo de todo el ojal presenta algunos desafíos experimentales.

Por ejemplo, al tratar de introducir biosensores para comprender la señalización de las células de los ojales, nuestro protocolo de pseudopárpados supera este desafío realizando manipulaciones genéticas en el estado de una sola célula y agregando estas células de los ojales humanos transducidos en pseudopárpados para estudios posteriores. Nuestro sistema de pseudopárpados nos permite expresar biosensores en todo el ojal, en lugar de solo en la superficie del párpado. En combinación con nuestras imágenes de células vivas y el sistema de microperfusión, podemos medir y co-registrar procesos intracelulares dinámicos con la secreción de hormonas aguas abajo.

Este protocolo podría aplicarse para responder a una variedad de preguntas científicas importantes. Por ejemplo, las estrategias de silenciamiento génico podrían combinarse con este enfoque para comprender el impacto de un gen de interés en la función de los párpados y las vías de señalización asociadas, ya sea globalmente o de manera autoespecífica.