Name: Perfusión hepática aislada normomermica porcina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-09T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Aprenda la perfusión hepática aislada normotérmica en modelo porcino para evaluar viabilidad de injertos hepáticos de alto riesgo. Este método reduce la lesión hepatocelular y mejora las tasas de utilización de órganos.

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<meta charset="utf8"></head><body>Desarrollo y validación de un modelo de perfusión hepática aislada ex situ porcino

<ol><li>Dunson, J. R., Bakhtiyar, S. S., Joshi, M., Goss, J. A., Rana, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intent-to-treat+survival+in+liver+transplantation+has+not+improved+in+3+decades+due+to+donor+shortage+relative+to+waitlist+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Intent-to-treat survival in liver transplantation has not improved in 3 decades due to donor shortage relative to waitlist growth.</a> Clinical Transplantation. 35 (10), e14433(2021).</li>
<li>Monbaliu, D., Pirenne, J., Talbot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+using+donation+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation using donation after cardiac death donors.</a> Journal of Hepatology. 56 (2), 474-485 (2012).</li>
<li>Croome, K. P., Taner, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscapes+in+DCD+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Transplantation+Reports%22%5BJournal%5D)">The changing landscapes in DCD liver transplantation.</a> Current Transplantation Reports. 7 (3), 194-204 (2020).</li>
<li>Coffey, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+functional+warm+ischemia+time+on+DCD+liver+transplant+recipients%27+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The influence of functional warm ischemia time on DCD liver transplant recipients' outcomes.</a> Clinical Transplantation. 31 (10), (2017).</li>
<li>Meurisse, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+liver+transplantations+using+donations+after+circulatory+death%3A+A+single-center+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Outcomes of liver transplantations using donations after circulatory death: A single-center experience.</a> Transplantation Proceedings. 44 (9), 2868-2873 (2012).</li>
<li>Ruck, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+trends+in+utilization+and+outcomes+of+DCD+livers+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Temporal trends in utilization and outcomes of DCD livers in the United States.</a> Transplantation. 106 (3), 543-551 (2022).</li>
<li>Nasralla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized+trial+of+normothermic+preservation+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation.</a> Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).</li>
<li>Blondeel, J., Monbaliu, D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+liver+preservation%3A+Are+we+still+missing+pieces+of+the+puzzle%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Dynamic liver preservation: Are we still missing pieces of the puzzle.</a> Artificial Organs. 47 (2), 248-259 (2022).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+liver+normothermic+machine+perfusion%3A+Methodological+framework+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Direct%22%5BJournal%5D)">Porcine liver normothermic machine perfusion: Methodological framework and potential pitfalls.</a> Transplantation Direct. 8 (1), e1276(2021).</li>
<li>Maione, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+isolated+liver+perfusion+for+the+study+of+ischemia+reperfusion+injury%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Porcine isolated liver perfusion for the study of ischemia reperfusion injury: A systematic review.</a> Transplantation. 102 (7), 1039-1049 (2018).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coagulation+factors+accumulate+during+normothermic+liver+machine+perfusion+regardless+of+donor+type+and+severity+of+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Coagulation factors accumulate during normothermic liver machine perfusion regardless of donor type and severity of ischemic injury.</a> Transplantation. 106 (3), 510-518 (2021).</li>
<li>Butler, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+extracorporeal+porcine+liver+perfusion+for+72+hr%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Successful extracorporeal porcine liver perfusion for 72 hr.</a> Transplantation. 73 (8), 1212-1218 (2002).</li>
<li>Eshmuminov, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+perfusion+machine+preserves+injured+human+livers+for+1+week%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">An integrated perfusion machine preserves injured human livers for 1 week.</a> Nature Biotechnology. 38 (2), 189-198 (2020).</li>
<li>Xu, J., Buchwald, J. E., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+machine+perfusion+therapeutics+for+organ+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Review of current machine perfusion therapeutics for organ preservation.</a> Transplantation. 104 (9), 1792-1803 (2020).</li>
<li>Martins, P. N., Turco, S. D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+therapeutics+during+ex-situ+dynamic+preservation.+a+look+into+the+future%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Organ therapeutics during ex-situ dynamic preservation. a look into the future.</a> European Journal of Transplantation. 1, 63-78 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bomba de jeringa Alaris GH Plus</td><td>BD Care Fusion</td><td>80023 UN 01-G</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo de anestesia</td><td>Dr&auml; Ger</td><td>Titus</td><td></td></tr><tr><td>Catéter arterial Cavafix Certo</td><td>Braun, Melsungen, Alemania</td><td>BRAU4152557</td><td></td></tr><tr><td>Analizador de gases en sangre</td><td>Radiómetro</td><td>ABL815</td><td></td></tr><tr><td>Gluconato de calcio 10%</td><td>Braun, Melsungen, Alemania</td><td>570/13596667/1214</td><td></td></tr><tr><td>Capnógrafo</td><td>Dr&auml; Ger</td><td>Scio</td><td></td></tr><tr><td>Protector de celdas</td><td>Medtronic</td><td>Registro automático</td><td></td></tr><tr><td>Bomba centrífuga Biomedicus</td><td>Medtronic</td><td>85315 REV 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Centrífuga Rotina 420R Hettich</td><td>VWR</td><td>521-1156</td><td></td></tr><tr><td>Circuito de perfusión a medida</td><td>Medtronic</td><td>M323901C</td><td></td></tr><tr><td>Conjunto desechable de ahorro de celdas</td><td>Medtronic</td><td>ATLS24</td><td></td></tr><tr><td>Cánula venosa de una sola etapa DLP, recta 20F</td><td>Medtronic</td><td>66120</td><td></td></tr><tr><td>Epoprostenol</td><td>GlaxoSmithKline Bélgica, Wavre, Bélgica</td><td>Flolan</td><td></td></tr><tr><td>Fentanilo-Janssen 0.05 mg/mL</td><td>Janssen</td><td>HK-08700</td><td></td></tr><tr><td>Sensor de caudal BioPro TT</td><td>Em-Tec</td><td>12271</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehído 4%</td><td>VWR</td><td>VWRK4078.9005</td><td></td></tr><tr><td>Congelador -80 ° C</td><td>Nuevo Brunswick Científico</td><td>U570-86</td><td></td></tr><tr><td>Nevera</td><td>Liebherr</td><td>COPA 3513</td><td></td></tr><tr><td>Geloplasma</td><td>Fresenius-Kabi, Bad Homburg, Alemania</td><td>Freeflex</td><td></td></tr><tr><td>Enfriador de calentador</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, grupo Sorin</td><td>16-02-1950</td><td></td></tr><tr><td>Heparina 5000 IE/ml</td><td>Leo Pharma, Ballerup, Dinamarca</td><td>HeparinaLeo</td><td></td></tr><tr><td>Cánula de la arteria hepática</td><td>Medtronic</td><td>BIO-MEDICUS 12F</td><td></td></tr><tr><td>Solución de preservación de órganos IGL-1</td><td>Institut Georges López</td><td>IGL-1/1000/D</td><td></td></tr><tr><td>Analizador de gases en sangre en línea</td><td>TERUMO</td><td>Calibrador 3MCDI 540/CDI 500</td><td></td></tr><tr><td>Insulina 200 UI Actrapid</td><td>Novo Nordisk, Dagsvaerd, Dinamarca</td><td>MEDI-00018</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano 1000 mg/g Vapor de inhalación</td><td>Chanelle Pharma</td><td>Iso-Vet</td><td></td></tr><tr><td>catéter intravenoso BD Insyte-W 20 G</td><td>BD</td><td>381334</td><td></td></tr><tr><td>Tanque de nitrógeno líquido</td><td>Isoterma KGW</td><td>S22</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3 USP2/0 ligapak sin agujas</td><td>JNJ médico</td><td>F4503</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3.5 USP0 ligapak sin agujas</td><td>JNJ médico</td><td>F4504</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 5X70CM M3.5 USP0 sin agujas</td><td>JNJ médico</td><td>EH6935H</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 6X45CM M3 USP2/0 sin agujas</td><td>JNJ médico</td><td>EH6734H</td><td></td></tr><tr><td>Micro pipetas 1000 &micro; L</td><td>Socorex</td><td>82,51,000</td><td></td></tr><tr><td>Monitorización</td><td>Siemens</td><td>SC 8000</td><td></td></tr><tr><td>Plasmalyte Viaflo</td><td>Baxter</td><td>Plasmalyte Viaflo</td><td></td></tr><tr><td>Cánula de la vena porta</td><td>LABORATORIOS CALMADOS</td><td>18F RV-40018</td><td></td></tr><tr><td>Sensor de presión</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, grupo Sorin</td><td>22-06-2000</td><td></td></tr><tr><td>Servorregulador de presión</td><td>Medtronic</td><td>BM 9505-2</td><td></td></tr><tr><td>Prolene 4-0</td><td>JNJ médico</td><td>EH7151H</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de rodillos</td><td>Cobe Century USA</td><td>468048-000 REV C</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato de sodio 8,4%</td><td>Braun, Melsungen, Alemania</td><td>362 2339</td><td></td></tr><tr><td>Taurocolato de sodio</td><td>Sigma Aldrich, Burlington, Estados Unidos</td><td>86339</td><td></td></tr><tr><td>Bisturí quirúrgico nº 24</td><td>Swann Morton</td><td>0211</td><td></td></tr><tr><td>Catéter venoso, 3 lúmenes; 12FR</td><td>FLECHA</td><td>AK-12123-F</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl Vio 250CM M2 USP3/0 gigapak sin aguja</td><td>JNJ médico</td><td>V1205G</td><td></td></tr><tr><td>Xilacina 2%</td><td>VMD Ganadería farmacéutica</td><td>XYL-M 2%</td><td></td></tr><tr><td>Zinacef Cefuroxima 750 mg</td><td>GlaxoSmithKline Bélgica, Wavre, Bélgica</td><td>NDC 0173-0353-32</td><td></td></tr><tr><td>Zoletil 100</td><td>Virbac</td><td>Zoletil 100</td><td></td></tr></tbody></table>

perfusión hepática aislada normomermica porcina

Porcine Normothermic Isolated Liver Perfusion

El protocolo de perfusión presentado utiliza la autorregulación del flujo sanguíneo hepático para lograr condiciones hemodinámicas estables hasta por 24 h y simular la distribución fisiológica del flujo sanguíneo en la vena porta y la arteria hepática. La figura 1 representa una descripción esquemática del circuito de perfusión. La figura 2A muestra una distribución constante del flujo sanguíneo, con la vena porta y la arteria hepática contribuyendo aproximadame...

Perfusión hepática aislada normomermica porcina

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine ...

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Investigación

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Una técnica para aislar fibroblastos portales de hígado de rata se ha descrito. Los hígados se perfundieron y...

El aislamiento de fibroblastos portales rata por<em&gt; In situ</em&gt; Hígado de perfusión

El estudio de la fisiología de los órganos animales se puede lograr mediante la realización de un sistema experimental de perfusión ex vivo. La adición de un riñón porcino, como órgano homeostático a nuestro modelo de perfusión hepática ex vivo desarrollado anteriormente, puede ser un paso principal para lograr un mejor entorno fisiológico.

Pasos para el Experimento de Hígado-Riñón Porcino Perfundido Autólogo Ex vivo

Injertos marginales, tales como hígados grasos, los injertos procedentes de donantes de edad avanzada, o hígados recuperados después de la muerte cardíaca (DCD) toleran el almacenamiento estático convencional, fría solamente mal. Hemos desarrollado un novedoso modelo de subnormothermic vivo de perfusión ex hígado para su conservación, evaluación y reparación de los injertos hepáticos marginales antes del trasplante.

Técnica de Subnormothermic<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Perfusión hepática para el Almacenamiento, Evaluación y Reparación de marginales injertos hepáticos

Se describe un método ex vivo de la máquina de perfusión de injertos de hígado humano a temperatura subnormothermic (21 ° C).

Funcional hígado humano Conservación y Recuperación de Medios de Subnormothermic máquina de perfusión

Hay una escasez de donantes de hígado significativa, y se han ampliado los criterios de los donantes de hígado. Perfusión normotérmica ex vivo hígado (NEVLP) ha sido desarrollada para evaluar y modificar la función del órgano. Este estudio muestra un modelo de rata de NEVLP y pone a prueba la capacidad de pegilado-catalasa, para mitigar la lesión hepática de preservación.

Un pequeño modelo de la perfusión hepática normotérmica Ex Vivo

Este protocolo detalla el uso de un catéter intravenoso especial, tubos desechables estériles estandarizados, control de temperatura complementado con monitoreo en tiempo real y un sistema de alarma para el procedimiento de perfusión de colagenasa de dos pasos para mejorar la consistencia en la viabilidad, el rendimiento y la funcionalidad de los hepatocitos primarios aislados de ratas.

Aislamiento de hepatocitos primarios de rata con control de perfusión multiparamétrico

En este protocolo, se describe un modelo de trasplante hepático ortotópico porcino después del almacenamiento estático en frío de órganos de donantes durante 20 h sin el uso de un bypass venovenoso durante el injerto. El enfoque utiliza una técnica quirúrgica simplificada con minimización de la fase anhepática y un sofisticado manejo del volumen y vasopresores.

Trasplante de hígado porcino sin bypass venovenoso como modelo de donante de criterios extendidos

Se creó un sistema normotérmico de perfusión hepática ex vivo (NEVLP) para hígados de ratón. Este sistema requiere experiencia en microcirugía, pero permite resultados de perfusión reproducibles. La capacidad de utilizar hígados de ratón facilita la investigación de vías moleculares para identificar nuevos aditivos de perfusión y permite la ejecución de experimentos centrados en la reparación de órganos.

Normothermic ex vivo liver machine perfusión en ratón

Este protocolo describe la metodología para establecer un modelo porcino que utiliza perfusión mecánica (MP) a temperatura variable controlada para la preservación del hígado del donante, seguido de un trasplante hepático ortotópico (OLTx). Su objetivo es promover la tasa de éxito de OLTx utilizando la donación de hígado después de la muerte circulatoria (DCD) de un donante y establecer un modelo estable.

Preservación del hígado de donación porcina después de la muerte circulatoria (DCD) por perfusión y trasplante hepático ortotópico

Aquí, presentamos un protocolo para un sistema de perfusión ex vivo normotérmico modificable de código abierto diseñado para superar el alto costo y la flexibilidad limitada de las plataformas existentes, lo que permite un uso más accesible, rentable e iterativo en la investigación biomédica preclínica.

Un sistema de perfusión normotémica de código abierto diseñado para científicos investigadores

Aprenda la perfusión hepática aislada normotérmica en modelo porcino para evaluar viabilidad de injertos hepáticos de alto riesgo. Este método reduce la lesión hepatocelular y mejora las tasas de utilización de órganos.

Perfusión hepática aislada normomermica porcina

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