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DOI: 10.3791/65343-v
Eleanor Zagoren*1, Anderson K. Santos*1,2, Nadia A. Ameen3,4, Kaelyn Sumigray1,5,6
1Department of Genetics,Yale School of Medicine, 2Department of Pediatrics,Yale School of Medicine, 3Department of Pediatrics/Gastroenterology and Hepatology,Yale School of Medicine, 4Department of Cellular and Molecular Physiology,Yale School of Medicine, 5Yale Stem Cell Center,Yale School of Medicine, 6Yale Cancer Center,Yale School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study investigates the establishment of a robust rat intestinal organoid model suitable for long-term cell culture. The model facilitates genetic manipulations and serves as an accessible in vitro system to further explore intestinal biology relevant to human physiology.
Aquí, presentamos un protocolo para generar organoides intestinales de ratas y usarlos en varias aplicaciones posteriores. Las ratas suelen ser un modelo preclínico preferido, y el robusto sistema de organoides intestinales satisface la necesidad de un sistema in vitro para acompañar los estudios in vivo .
En este estudio establecimos un modelo de organoide intestinal de rata que es robusto en cultivos celulares a largo plazo. También demostramos las primeras manipulaciones genéticas exitosas utilizando tanto la infección lentiviral como la transfección transitoria. Este modelo es una excelente herramienta para manipular la biología intestinal en ratas donde las herramientas genéticas disponibles in vivo son limitadas.
Los organoides intestinales de las ratas han sido difíciles de cultivar a largo plazo. Al generar un modelo de organoide de rata robusto y genéticamente manipulable, estamos proporcionando a los investigadores flexibilidad y opciones adicionales para seleccionar el modelo de organoide que mejor se adapte a sus circunstancias particulares. Los organoides intestinales de ratón se utilizan para estudiar el comportamiento, el destino y la fisiología de las células madre, pero pueden ser un modelo subóptimo.
Ya que existen diferencias clave entre la biología del ratón y la humana. Por otro lado, los organoides intestinales humanos pueden ser difíciles de obtener y tienen requisitos complejos de cultivo celular. El modelo de organoide de rata que describimos aquí conserva una relevancia fisiológica clave para la biología humana, a la vez que es considerablemente más fácil de acceder y cuidar que los organoides intestinales humanos.
El desarrollo y la optimización del modelo de organoide intestinal de rata permite la manipulación genética, los tratamientos farmacológicos y los estudios de mayor rendimiento de la biología intestinal y el modelo accesible con una relevancia fisiológica clave para los seres humanos. Además, estos organoides de rata permitirán el estudio de la fisiología específica de la especie, el destino celular y las variaciones fenotípicas y los modelos de enfermedad en el intestino.
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