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Generación y manipulación de organoides intestinales de rata
Generación y manipulación de organoides intestinales de rata
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JoVE Journal Biology
Generation and Manipulation of Rat Intestinal Organoids

Generación y manipulación de organoides intestinales de rata

Full Text
5,459 Views
09:49 min
June 23, 2023

DOI: 10.3791/65343-v

Eleanor Zagoren*1, Anderson K. Santos*1,2, Nadia A. Ameen3,4, Kaelyn Sumigray1,5,6

1Department of Genetics,Yale School of Medicine, 2Department of Pediatrics,Yale School of Medicine, 3Department of Pediatrics/Gastroenterology and Hepatology,Yale School of Medicine, 4Department of Cellular and Molecular Physiology,Yale School of Medicine, 5Yale Stem Cell Center,Yale School of Medicine, 6Yale Cancer Center,Yale School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study investigates the establishment of a robust rat intestinal organoid model suitable for long-term cell culture. The model facilitates genetic manipulations and serves as an accessible in vitro system to further explore intestinal biology relevant to human physiology.

Key Study Components

Research Area

  • Intestinal biology
  • Genetic manipulation techniques
  • Preclinical models

Background

  • Rats are a preferred preclinical model.
  • Previous difficulties in long-term culture of rat intestinal organoids.
  • Key differences exist between mouse and human biology that can affect research outcomes.

Methods Used

  • Lentiviral infection and transient transfection for genetic modifications.
  • Rat intestinal organoids as the biological system.
  • Cell culture and dissection methodologies for organoid generation.

Main Results

  • Successful generation and maintenance of rat intestinal organoids.
  • Demonstrated genetic manipulability of the organoids.
  • Provided a viable alternative to mouse and human organoid models for biological studies.

Conclusions

  • The study offers a novel rat intestinal organoid model that supports genetic manipulation.
  • This model can significantly enhance research in intestinal biology with human relevance.

Frequently Asked Questions

What is the significance of using rat intestinal organoids?
Rat intestinal organoids represent a more accessible and relevant model to human physiology compared to mouse or human organoids.
How can genetic manipulation be achieved in rat intestinal organoids?
Genetic manipulation can be achieved using lentiviral infection and transient transfection methods.
What are the main applications of these organoids?
They can be used for pharmacological treatments, studying cell fate, and high-throughput screening in intestinal biology.
How does this model compare to other organoid models?
Rat organoids provide key physiological relevance while being easier to culture than human organoids and more suitable for certain studies than mouse organoids.
What maintenance is required for the organoid cultures?
The organoid cultures require specific media and controlled incubation conditions for optimal growth and maintenance.
Can these organoids be used in disease modeling?
Yes, the rat intestinal organoid model can be utilized to study species-specific physiology, cell fates, and variations in disease models.
What technologies are important for this research?
Key technologies include cell culture techniques, genetic manipulation methods, and microscopy for imaging organoid development.

Aquí, presentamos un protocolo para generar organoides intestinales de ratas y usarlos en varias aplicaciones posteriores. Las ratas suelen ser un modelo preclínico preferido, y el robusto sistema de organoides intestinales satisface la necesidad de un sistema in vitro para acompañar los estudios in vivo .

En este estudio establecimos un modelo de organoide intestinal de rata que es robusto en cultivos celulares a largo plazo. También demostramos las primeras manipulaciones genéticas exitosas utilizando tanto la infección lentiviral como la transfección transitoria. Este modelo es una excelente herramienta para manipular la biología intestinal en ratas donde las herramientas genéticas disponibles in vivo son limitadas.

Los organoides intestinales de las ratas han sido difíciles de cultivar a largo plazo. Al generar un modelo de organoide de rata robusto y genéticamente manipulable, estamos proporcionando a los investigadores flexibilidad y opciones adicionales para seleccionar el modelo de organoide que mejor se adapte a sus circunstancias particulares. Los organoides intestinales de ratón se utilizan para estudiar el comportamiento, el destino y la fisiología de las células madre, pero pueden ser un modelo subóptimo.

Ya que existen diferencias clave entre la biología del ratón y la humana. Por otro lado, los organoides intestinales humanos pueden ser difíciles de obtener y tienen requisitos complejos de cultivo celular. El modelo de organoide de rata que describimos aquí conserva una relevancia fisiológica clave para la biología humana, a la vez que es considerablemente más fácil de acceder y cuidar que los organoides intestinales humanos.

El desarrollo y la optimización del modelo de organoide intestinal de rata permite la manipulación genética, los tratamientos farmacológicos y los estudios de mayor rendimiento de la biología intestinal y el modelo accesible con una relevancia fisiológica clave para los seres humanos. Además, estos organoides de rata permitirán el estudio de la fisiología específica de la especie, el destino celular y las variaciones fenotípicas y los modelos de enfermedad en el intestino.

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Biología Número 196

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