Ensayo de la unidad formadora de microcolonias para la evaluación de la eficacia de las vacunas contra la tuberculosis

La determinación de las unidades formadoras de colonias (UFC) es la técnica de referencia para cuantificar las bacterias, incluida la Mycobacterium tuberculosis , que puede tardar semanas en formar colonias visibles. Aquí describimos una micro-UFC para la determinación de UFC con mayor eficiencia de tiempo, menor espacio de laboratorio y costo de reactivos, y escalabilidad a experimentos de rendimiento medio y alto.

La determinación de UFC es necesaria para medir la eficacia de la respuesta inmunitaria contra las bacterias. Sin embargo, tiene un rendimiento muy bajo y se vuelve engorroso y costoso cuando se aplica a bacterias patógenas como Mycobacterium tuberculosis. Esta es una limitación importante cuando necesitamos probar grandes paneles de tratamientos.

La investigación se centra en la tuberculosis y en las evaluaciones de las vacunas contra la tuberculosis. Explora la seguridad, inmunogenicidad y eficacia de las vacunas contra Mycobacterium tuberculosis. El estudio presenta un método optimizado para la micro-UFC para enumerar colonias bacterianas con el fin de evaluar la eficacia de la vacuna en estudios preclínicos.

Este protocolo tiene como objetivo optimizar la determinación de UFC mediante la generación de resultados a partir de una pequeña gota similar a los de una placa de Petri normal. Cuantificar la viabilidad de las bacterias a partir de una muestra tan pequeña nos permite analizar miles de puntos de datos utilizando una fracción de los materiales y el tiempo necesarios para el método clásico. Nuestra investigación tiene como objetivo diseccionar la maquinaria de presentación de antígenos e identificar los antígenos más relevantes para optimizar la presentación de antígenos.

Esto nos servirá para diseñar y desarrollar mejores vacunas que mejoren o reemplacen la vacuna actual contra la tuberculosis, que es la BCG.