Name: Método de entrenamiento de fuerza estática para ratones diabéticos tipo 2 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-29T12:30:00.000+00:00
Duration: 3 min 17 s
Description: Aprende un método de entrenamiento de fuerza estática para ratones con diabetes tipo 2. Este protocolo utiliza contracción isométrica muscular para investigar los efectos del ejercicio tradicional en vías metabólicas y genéticas.

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Este trabajo ha sido apoyado por el segundo lote de proyectos especiales de investigación científica de la Base Nacional de Investigación Clínica de Medicina Tradicional China (JDZX2015127, con sede en el Hospital Provincial de Medicina China de Anhui).

Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Medicina China de Nanjing (permiso n.º 202209A033). Se seleccionaron ratones machos C57BL/6J sanos con grado SPF, 8 semanas de edad y peso corporal de 20 ± 4 g. Los ratones se alojaron en un ciclo de luz/oscuridad de 12 h a una temperatura de 20-22 °C, y se mantuvo una humedad relativa del 45%-50%. Los animales comen y beben libremente.
1. Establecimiento de un modelo de ratón de DM2
<ol><li>Primero alimente a los ratones durante 1 semana con una dieta regular y deje que los ratones se adapten al nuevo entorno del centro de animales. Después de 1 semana, proporcionar una dieta alta en grasas (composición de la dieta: 20,0% manteca de cerdo, 10,0% sacarosa, 2,5% colesterol, 1,0% colágeno, 66,5% dieta convencional) durante un período de 4 semanas.</li>
	<li>A partir del 1erdía de la5ª semana, inyectar intraperitonealmente a los ratones una solución de estreptozotocina a una dosis de 35 mg/kg cada día durante 3 días consecutivos. Prepare 1 mL de la solución de estreptozotocina con 10 mg de estreptozotocina en polvo, con 0,1 M/L de tampón de citrato de sodio como disolvente. NOTA: La inyección debe completarse dentro de los 30 minutos posteriores a la preparación de la solución, y la solución debe mantenerse alejada de la luz durante su uso.</li>
	<li>Medir aleatoriamente la glucosa en sangre el día 5 y el día 7 después de la administración de la primera inyección de solución de estreptozotocina. Los animales con dos niveles aleatorios de azúcar en sangre superiores a 16,7 mM/L se consideran modelos exitosos de DMT2.</li>
	<li>Comience la intervención de entrenamiento el día 8 después de la primera inyección de solución de estreptozotocina.</li>
</ol>2. Agrupamiento y tratamiento en ratones
<ol><li>Divida los ratones T2DM en un grupo modelo, un grupo de entrenamiento y un grupo de metformina utilizando el método de tabla de números aleatorios, con 6 ratones en cada grupo.</li>
	<li>No realizar ninguna intervención para el grupo de modelos.</li>
	<li>Muele las tabletas de metformina hasta convertirlas en polvo y disuélvelas en agua pura. Administre metformina al grupo de metformina por sonda nasogástrica a una dosis de 200 mg/kg, una vez al día, durante 3 semanas.</li>
	<li>Deje que el grupo de entrenamiento haga 30 minutos de entrenamiento de fuerza estática, una vez al día, 5 días a la semana, durante 3 semanas. La capacitación se lleva a cabo de lunes a viernes por la tarde.</li>
	<li>Asigne aleatoriamente 6 ratones no T2DM como grupo de control. Estos ratones no se someten a modelado ni intervención.</li>
</ol>3. Fabricación del dispositivo de entrenamiento de fuerza estática
<ol><li>Prepara un tablero acrílico transparente de 5 mm de espesor con unas dimensiones de 20 cm x 20 cm. Utilice una pizarra transparente para observar el entrenamiento de los ratones.</li>
	<li>Consigue palos de madera con un diámetro de 3 mm y un rollo de cinta adhesiva con un ancho de 1 cm. Utilice un cortador de papel para cortar dos palos de 4 cm de largo y cuatro palos de 1 cm de largo.</li>
	<li>Fije dos palos, cada uno con una longitud de 1 cm, a los extremos de un palo con una longitud de 4 cm con cinta adhesiva (Figura 1A). Los palos cortos deben fijarse en el mismo lado que el palo largo.</li>
	<li>Coloque el tablero transparente sobre una superficie plana y fije dos juegos de palitos cortos de 1 cm a la placa con una pistola de pegamento caliente. Asegúrese de que los palos de madera de 4 cm no entren en contacto con el tablero. Deje un espacio de 2 cm entre el palo largo y la tabla para mantener a los ratones en su lugar (Figura 1B). Deje que los dos palos largos estén alineados y paralelos, con una distancia de 6 cm entre ellos (Figura 1C).</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65556/65556fig01.jpg"> Figura 1: Ensamble y asegure los palos al tablero transparente. (A) Pegue el palo de 1 cm a ambos extremos del palo de 4 cm. (B) Use adhesivo termofusible para conectar el palo de 1 cm de largo y el tablero transparente, y la longitud del espacio es de 2 cm. (C) Dos palos de 4 cm espaciados a 6 cm de distancia. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65556/65556fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
4. Entrenamiento de fuerza estática en ratones
<ol><li>Corta dos trozos de hilo de lana de 15 cm de largo. Use un nudo corredizo para atar un trozo de hilo de lana en cada uno de los tobillos superiores del ratón (Figura 2A). NOTA: La cuerda elástica no puede fijar la postura de los ratones, y la cuerda de cáñamo desgastará los tobillos de los ratones, por lo que aquí se elige un hilo de lana inelástico pero suave.</li>
	<li>Coloque el tablero horizontalmente sobre la mesa con los palos hacia arriba. Presione el mouse con cuidado entre dos palos largos, colocando la cabeza y la cola para alinearse con los espacios debajo de los palos.</li>
	<li>Pasa el hilo a través del espacio al final de la hebra. Luego, ajusta el hilo hasta que los tobillos del ratón encajen perfectamente contra el borde del palo.</li>
	<li>Asegure el hilo de lana con cinta adhesiva (Figura 2B). El extremo del hilo de lana debe estar asegurado, de lo contrario, el ratón trepará por la lana caída. Tira de la lana lo más fuerte posible o el ratón se liberará fácilmente.</li>
	<li>Invierta el tablero transparente. Consigue 2 cajas de la misma altura (15-20 cm de alto) en cada extremo del tablero transparente. Coloca la tabla horizontalmente a una altura determinada. La caja se encuentra en cada extremo de la cabeza y la cola del ratón. Si es demasiado alto, el experimentador no podrá manejarlo fácilmente; Si es demasiado bajo, el ratón puede tocar el tablero.</li>
	<li>Una vez que se voltea el tablero, el mouse cuelga boca abajo. Debido al reflejo de enderezamiento, los ratones curvan su abdomen y extienden sus extremidades delanteras para agarrar sus extremidades traseras o palos. En esta etapa, coloque un palo de 20 cm frente al mouse y guíelo con cuidado para agarrar el palo con sus extremidades delanteras. Repita el proceso hasta que el mouse se vuelva competente para agarrar el dispositivo móvil.</li>
	<li>Use el palo para mover la extremidad delantera del ratón a otro palo de 4 cm en el tablero transparente. Ajuste constantemente el ángulo del palo para permitir que los ratones agarren activamente el palo estacionario de 4 cm en el tablero (Figura 2C).</li>
	<li>Repita el paso anterior mientras el mouse suelta la pata delantera hasta que el mouse se agote. Después de 30 minutos, la mayoría de las ratas no pudieron levantar la parte superior del cuerpo y agarrar el palo con las extremidades delanteras. NOTA: Antes de implementar la intervención, es necesaria una semana de entrenamiento de habituación en ratones. La duración inicial del entrenamiento es de 10 minutos por día, que luego debe aumentarse en 5 minutos cada día hasta alcanzar un total de 30 minutos por día.</li>
	<li>Después de 30 minutos de entrenamiento, suelte inmediatamente el ratón y desenrede la lana para evitar que los pies se enrojezcan e hinchen causados por el vendaje prolongado.<ol><li>Si aparecen lesiones cutáneas en el tobillo de los ratones después del entrenamiento, deje de entrenar a los ratones y busque atención profesional veterinaria hasta que el tobillo esté sano.</li>
		<li>Algunos ratones pueden ocasionalmente lograr liberarse a través de una lucha intensa durante el entrenamiento. Los ratones luchan cuando sus patas traseras no están firmemente fijadas. Para evitar lesiones debido a la lucha, observe a los ratones durante todo el entrenamiento. Cuando se descubra que las extremidades traseras no están firmemente fijadas o los ratones comienzan a luchar, afloje los ratones y vuelva a fijarlos. NOTA: Experimentos anteriores han demostrado que colgar ratones boca abajo durante 30 minutos al día, 5 días a la semana, no causa desgaste en los tobillos, siempre que se liberen a sudebido tiempo. Los ratones pueden aprender y acostumbrarse al entrenamiento en 1-3 sesiones.</li>
	</ol></li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65556/65556fig02.jpg"> Figura 2: Método de fijación en ratón. (A) Ate la parte superior del tobillo con un nudo corredizo. (B) El extremo de la cuerda se pasa a través del espacio y se tira con fuerza, luego se asegura con cinta adhesiva. (C) Entrenamiento de fuerza estática en ratones. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65556/65556fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Explorando las intervenciones de ejercicio para la DM2: un dispositivo de entrenamiento estático para ratones

<ol><li>Zheng, Y., Ley, S. H., Hu, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+aetiology+and+epidemiology+of+type+2+diabetes+mellitus+and+its+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrino%22%5BJournal%5D)">Global aetiology and epidemiology of type 2 diabetes mellitus and its complications.</a> Nat Rev Endocrino. 14 (2), 88-98 (2018).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+fitness+qigong+and+tai+chi+on+middle-aged+and+elderly+patients+with+type+2+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Lib+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of fitness qigong and tai chi on middle-aged and elderly patients with type 2 diabetes mellitus.</a> Public Lib Sci. 15 (12), e0243989(2020).</li>
<li>Qin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+tai+chi+on+quality+of+life%2C+body+mass+index%2C+and+waist-hip+ratio+in+patients+with+type+2+diabetes+mellitus%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrino%22%5BJournal%5D)">Effect of tai chi on quality of life, body mass index, and waist-hip ratio in patients with type 2 diabetes mellitus: A systematic review and meta-analysis.</a> Front Endocrino. 11, 543627(2020).</li>
<li>Yang, H., Wu, X., Wang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+conventional+medical+treatment+plus+Qigong+exercise+on+type+2+diabetes+mellitus+in+Chinese+patients%3A+A+Meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trad+Chinese+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of conventional medical treatment plus Qigong exercise on type 2 diabetes mellitus in Chinese patients: A Meta-analysis.</a> J Trad Chinese Med. 38 (2), 167-174 (2018).</li>
<li>Yu, X., Chau, J. P. C., Huo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+of+traditional+Chinese+medicine-based+lifestyle+interventions+on+biomedical%2C+psychosocial%2C+and+behavioral+outcomes+in+individuals+with+type+2+diabetes%3A+A+systematic+review+with+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Nurs+Stud%22%5BJournal%5D)">The effectiveness of traditional Chinese medicine-based lifestyle interventions on biomedical, psychosocial, and behavioral outcomes in individuals with type 2 diabetes: A systematic review with meta-analysis.</a> Int J Nurs Stud. 80, 165-180 (2018).</li>
<li>Ağgön, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+dynamic+and+static+strength+training+on+hormonal+activity+in+elite+boxers%5BTitle%5D)+AND+%22Baltic+J+Health+Phys+Activity%22%5BJournal%5D)">Effect of dynamic and static strength training on hormonal activity in elite boxers.</a> Baltic J Health Phys Activity. 12 (3), 1-10 (2020).</li>
<li>Merico, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+combined+endurance+and+resistance+training+in+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis%3A+A+pilot%2C+randomized%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Translat+Myo%22%5BJournal%5D)">Effects of combined endurance and resistance training in Amyotrophic Lateral Sclerosis: A pilot, randomized, controlled study.</a> Eur J Translat Myo. 28 (1), 7278(2018).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eight+weeks+of+high-intensity+interval+static+strength+training+improves+skeletal+muscle+atrophy+and+motor+function+in+aged+rats+via+the+PGC-1%CE%B1%2FFNDC5%2FUCP1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Interven+Aging%22%5BJournal%5D)">Eight weeks of high-intensity interval static strength training improves skeletal muscle atrophy and motor function in aged rats via the PGC-1α/FNDC5/UCP1 pathway.</a> Clin Interven Aging. 16, 811-821 (2021).</li>
<li>Jun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+model+for+static+massage+training%5BTitle%5D)+AND+%22Massage+Guid%22%5BJournal%5D)">Animal model for static massage training.</a> Massage Guid. (02), 5-6 (2000).</li>
<li>Wei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+by+which+static+exercise+improves+insulin+resistance+in+skeletal+muscle+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+J+Tiss+Eng+Res%22%5BJournal%5D)">Mechanism by which static exercise improves insulin resistance in skeletal muscle of type 2 diabetes.</a> Chinese J Tiss Eng Res. 28 (08), 1271-1276 (2024).</li>
<li>Zhenrui, L., Fang, L., Wu, W., Huang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+static+training+on+upper+limb+motor+ability+in+aged+rats+was+studied+based+on+PGC-1%CE%B1+signal+pathway+RNA+interference%5BTitle%5D)+AND+%22Lishizhen+Medicine+and+Materia+Medica+Research%22%5BJournal%5D)">The effect of static training on upper limb motor ability in aged rats was studied based on PGC-1α signal pathway RNA interference.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 30 (01), 247-249 (2019).</li>
<li>Lee, S. H., Park, S. Y., Choi, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance%3A+From+mechanisms+to+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Diab+Metab+J%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance: From mechanisms to therapeutic strategies.</a> Diab Metab J. 46 (1), 15-37 (2022).</li>
<li>Campos, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+preserves+physical+fitness+during+aging+through+AMPK+and+mitochondrial+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Exercise preserves physical fitness during aging through AMPK and mitochondrial dynamics.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 120 (2), e2204750120(2023).</li>
</ol>

Los autores declaran que no tienen nada que revelar.

El entrenamiento de fuerza estática puede reducir la acumulación de grasa, ayudar a perder peso y aumentar el metabolismo. Además, mejora la expresión de PGC-1α y la biogénesis mitocondrial en las células del músculo esquelético, lo que conduce a un mejor metabolismo de la glucosa en ratones con diabetes mellitus tipo 2 y una consecuente reducción de los niveles de glucosa en sangre11. Para confirmar el impacto y el mecanismo del entrenamiento estático en la DM2, es necesario desarrollar dispositivos adecuados para realizar el entrenamiento estático en animales de experimentación.
Este protocolo introduce un dispositivo para el entrenamiento estático en ratones. El equipo necesario, como placas acrílicas, palos, hilo de lana y pistolas de pegamento caliente, está fácilmente disponible, y el método de producción es simple y fácil. Esto puede reducir efectivamente el costo del experimento y aumentar su factibilidad y repetibilidad. Mantener una posición fija para los ratones durante el entrenamiento puede ser un desafío cuando se diseña un dispositivo de entrenamiento estático. En este protocolo, las patas del ratón se pueden asegurar a la parte delantera del pequeño palo apretando la lana suave. El reflejo de enderezamiento hace que el ratón doble la parte superior del cuerpo hacia arriba, lo que le permite agarrar la barra delantera con las patas delanteras. La barra es corta, lo que limita el rango de movimiento de las patas delanteras. Después de dos o tres sesiones de entrenamiento adaptativo, los ratones fueron capaces de mantener una postura estable. Debido a la fuerza limitada de las patas delanteras, los ratones con frecuencia pierden el agarre en el travesaño. Es necesario que los experimentadores monitoreen a los ratones todo el tiempo para ayudarlos a agarrar la barra transversal con sus extremidades delanteras y evitar que los ratones se lesionen accidentalmente. A través del entrenamiento, los ratones pueden mantener una posición fija durante 1-2 minutos a la vez, repetida varias veces, durante unos 30 minutos después del agotamiento. Cuando estaban exhaustos, los ratones ya no rodaban el abdomen ni levantaban las patas delanteras. Cuando el ratón era guiado por el palo para agarrar con sus patas delanteras, el ratón podía agarrar, pero la parte superior de su cuerpo no podía girar hacia arriba. Desata el nudo lo antes posible después de sacrificar a los ratones, lo que puede evitar eficazmente el edema y el desgaste del tobillo.
Los experimentos preliminares indican que, después de un período de entrenamiento estático, el nivel de glucosa en sangre de los ratones con DM2 disminuyó significativamente en comparación con el grupo de control de ratones modelo. El músculo esquelético es un componente crítico en el metabolismo periférico de la glucosa y es esencial para mantener la homeostasis de la glucosa en sangre12. Los análisis de microscopía electrónica indicaron que se produjo una degeneración grave en las células de gastrocnemio de los ratones con DM2, mientras que se descubrió que el entrenamiento estático mitigaba la degeneración del tejido muscular. Estos hallazgos sugieren que el entrenamiento estático puede estar implicado en la regulación de la función del músculo esquelético. La investigación ha demostrado que el mantenimiento de la función del músculo esquelético se ve afectado significativamente por la dinámica mitocondrial13. Observamos una marcada reducción en el número de mitocondrias y una falta de actividad mitocondrial en las células musculares gastrocnemias del grupo de ratones modelo T2DM en comparación con los ratones salvajes y los ratones con ejercicio estático. Estos hallazgos sugieren que el entrenamiento estático puede promover la función del músculo esquelético al mejorar la función mitocondrial en las células del músculo esquelético. Con base en los resultados experimentales anteriores, se puede determinar que el entrenamiento estático puede mejorar considerablemente el metabolismo de la glucosa en sangre y la insulina en ratones con DM2. El mecanismo de intervención puede estar relacionado con la regulación de la función mitocondrial del músculo esquelético mediante el entrenamiento estático.
Este protocolo tiene algunas limitaciones. Inicialmente, había dificultades para atar individualmente las extremidades traseras de los ratones por una persona, ya que requería que un individuo agarrara las patas traseras mientras otro realizaba la atadura. Con algunos ajustes y una mayor habilidad por parte del experimentador, los ratones se volvieron más dóciles. Esto permitió el atado independiente de las patas traseras. Además, la lana suave puede disminuir los hematomas en los tobillos de los ratones.
En conclusión, este protocolo proporciona un método simple para hacer equipos de entrenamiento estático para ratones. Del mismo modo, se puede fabricar un equipo de entrenamiento estático simple para ratas aumentando el tamaño de las tablas y los palos. El dispositivo puede mantener la contracción muscular isométrica de las extremidades de los ratones para verificar el efecto de intervención del ejercicio tradicional chino en la DM2 y proporcionar una nueva perspectiva para el tratamiento clínico de la DM2.

La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) es una enfermedad crónica caracterizada por resistencia a la insulina y disfunción de las células β que representa una amenaza significativapara la salud mundial. El ejercicio es una intervención crucial en el tratamiento de la diabetes tipo 2. Numerosos estudios han demostrado que los métodos de ejercicio tradicionales chinos, como el Tai Chi y el Ba Duan Jin, mejoran significativamente los niveles de glucosa en sangre y la calidad de vida de las personas con DM2 2,3,4,5. Para ejecutar estos movimientos, el entrenador debe mantener una posición estable del cuerpo y las articulaciones durante un período de tiempo. La posición estática se mantiene mediante la realización de contracciones musculares estáticas, lo que comúnmente se conoce como fuerza estática6.
Sin embargo, no se ha aclarado el mecanismo de intervención del entrenamiento de fuerza estática en la DM2. Para responder a esta pregunta, los experimentos con animales son esenciales. Durante los ejercicios isométricos, los músculos se activan, mantienen una longitud constante y alcanzan la tensión máxima de forma segura. En experimentos con entrenamiento de fuerza estática, se requiere que el animal de prueba realice contracciones musculares isométricas y mantenga este estado de contracción muscular. Cómo implementar el entrenamiento de fuerza estática en ratones, ratas y otros animales de laboratorio se ha convertido en un gran problema en la investigación. En primer lugar, los animales luchan por obedecer órdenes y contraer sus músculos según sea necesario. En segundo lugar, es difícil para el animal mantener una posición estable bajo resistencia, y no se puede lograr el propósito de la contracción muscular isométrica. Al dejar que los animales entrenen según sea necesario, es importante abordar las preocupaciones relacionadas con el bienestar animal, como aliviar el estrés y la ansiedad, minimizar el dolor y mejorar las condiciones generales. Este protocolo pertenece a un modelo de entrenamiento estático para ratas 8,9, y aquí presentamos un dispositivo sencillo para el entrenamiento estático de ratones. Cuando se levantan las patas traseras de los ratones, sus músculos abdominales se contraen debido al reflejo de enderezamiento, las patas delanteras agarran la barra transversal por delante y luego las extremidades delanteras y traseras se contraen contra la gravedad. Los ratones no pueden moverse después de agarrar la barra corta, lo que hace que sus músculos estén en un estado de contracción isométrica.

<table><tbody><tr>Tableros <td></td><td></td><td>acrílicos</td><td>Tableros acrílicos transparentes de 5mm de grosor. El tamaño debe ser mayor que 20 cm y veces; Cajas de 20 cm</td></tr><tr><td>Dos</td><td></td><td></td><td>cajas de la misma altura (15 ~ 20 cm)</td></tr><tr>KIT <td></td> DE <td>ELISA</td><td>H203-1-2</td><td>Instituto de Bioingeniería de Nanjing Jiancheng</td></tr><tr>Pistola <td></td><td></td> de<td>pegamento termofusible</td><td>Evite tocar la cabeza de la pistola para causar quemaduras Cuchillos</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>Sin requisito especial</td></tr><tr><td>Tabletas de</td><td></td> metformina <td>1396309</td><td></td></tr><tr><td>tijeras Sigma</td><td></td><td></td><td>Sin requisitos especiales</td></tr><tr><td>Palos Varios</td><td></td><td></td><td>palos de madera con un diámetro de 3 mm</td></tr><tr><td>Estreptozotocina</td><td></td><td>S0130</td><td>Sigma</td></tr><tr><td>Tape</td><td></td><td></td><td>Sin requisito especial</td></tr><tr><td>Microscopio electrónico de transmisión (TEM)</td><td></td><td>HT7700</td><td>HITACHI&nbsp;</td></tr></tbody></table>

método de entrenamiento de fuerza estática para ratones diabéticos tipo 2

Static Strength Training Method for Type 2 Diabetic Mice

El tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2 (DM2) es una dificultad importante para mejorar la salud del paciente. El ejercicio es una de las principales intervenciones para la DM2. El entrenamiento de fuerza estática es una de las formas clave de los deportes tradicionales en China. La investigación muestra que el entrenamiento de fuerza estática es un método clínico eficaz para la intervención de la DM2, pero no existe un dispositivo experimental adecuado para el entrenamiento estático en ratones. Una de las dificultades para pasar de la investigación clínica a la básica es diseñar dispositivos experimentales adecuados. Con el fin de estudiar más a fondo el mecanismo de la intervención de entrenamiento estático en la DM2, en este trabajo se presenta un método sencillo para hacer un dispositivo de entrenamiento estático para ratones. Este dispositivo tiene las ventajas de una operación simple, material barato y alta viabilidad. Estudios previos realizados bajo este protocolo han demostrado que el entrenamiento estático puede reducir eficazmente los niveles de glucosa en sangre y mejorar la función mitocondrial de las células del músculo esquelético en ratones con DM2. El objetivo de la introducción de este dispositivo es promover la investigación sobre el mecanismo del ejercicio tradicional en la intervención de la DM2 y sentar las bases para la intervención cuantitativa del ejercicio.

Siguiendo el protocolo anterior, las extremidades traseras del ratón se fijan y las extremidades delanteras agarran de forma autónoma la barra frontal. El estrecho rango de movimiento mantiene el mouse en una posición relativamente fija. Se puede confirmar que los músculos de los ratones se contraen tocando los músculos del abdomen y las patas. Esto es consistente con la necesidad del estado de contracción muscular isométrica en el entrenamiento de fuerza estática. El entrenamiento de ratones según el protocolo, con el aumento de los tiempos de entrenamiento, ayudará a los ratones a adaptarse al entrenamiento al tiempo que reduce sus ganas de luchar. Se puede evitar una lucha por escapar.
Efectos sobre el nivel de glucosa e insulina en sangre en ratones T2DM Un total de 24 ratones C57BL/6J se dividieron aleatoriamente en el grupo de control (n = 6) y el grupo modelo T2DM (n = 18). A continuación, los ratones T2DM se dividieron aleatoriamente en el grupo modelo, el grupo de entrenamiento y el grupo de metformina. No se dio ningún modelo o intervención al grupo de control, y no se dio ninguna intervención a los ratones del grupo modelo. Los ratones del grupo de entrenamiento recibieron 30 minutos de entrenamiento de fuerza estática una vez al día, 5 días a la semana durante 3 semanas. A los ratones del grupo de metformina se les administró 200 mg/kg de metformina una vez al día durante 3 semanas. Los resultados de la glucemia en ayunas (FBG) después de 3 semanas de intervención se muestran en la Figura 3A. Como se puede ver en la figura, los niveles de FBG de los ratones modelo T2DM fueron significativamente más altos que los de los ratones control. Los ratones entrenados en entrenamiento estático mostraron niveles significativamente más bajos de FBG en comparación con el grupo modelo, lo que sugiere que el entrenamiento estático es efectivo para reducir FBG en ratones T2DM. Los niveles de insulina sérica en ayunas (FINS) en el grupo modelo fueron significativamente más bajos que en el grupo control, como se muestra en la Figura 3B. En los grupos de entrenamiento y metformina, los niveles de FINS aumentaron en comparación con el grupo modelo. En la Figura 3C, los ratones del grupo modelo tenían un índice de resistencia a la insulina (HOMA-IR) significativamente más alto que los del grupo control, mientras que el HOMA-IR de los grupos de entrenamiento estático y metformina fue significativamente menor que el del grupo modelo, lo que demuestra su eficacia para aliviar el estado de resistencia a la insulina de los ratones T2DM. Estos resultados muestran que la estrategia de entrenamiento de fuerza estática proporcionada por este régimen tiene efectos similares a la metformina en la regulación del nivel de glucosa en sangre de ratones con DM2.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65556/65556fig03.jpg"> Figura 3: Niveles de azúcar e insulina en sangre. (A) Comparación de los niveles de glucosa en sangre en ayunas en ratones con DM2 después de 3 semanas de intervención. * p &lt;0.05 vs. grupo de control, # p &lt;0.05 vs. grupo modelo. (B) Comparación de los niveles de insulina sérica en ayunas en ratones T2DM después de 3 semanas de intervención. * p &lt;0.05 vs. grupo de control, # p &lt;0.05 vs. grupo modelo. (C) Comparación del índice de resistencia a la insulina en ratones T2DM después de 3 semanas de intervención. * p &lt;0.05 vs. grupo de control, # p &lt;0.05 vs. grupo modelo. Para el análisis estadístico se realizó un análisis de varianza de una vía (ANOVA). Los datos cuantitativos se expresan como media ± SEM (n=6). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65556/65556fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Efectos sobre el músculo esquelético en ratones con DM2 El gastrocnemio de ratones se observó mediante microscopía electrónica de transmisión. En comparación con los ratones de control, los miocitos del músculo esquelético de los ratones con DM2 estaban degenerados, la estructura de las miofibrillas era débil y la disposición de los sarcómeros era irregular (Figura 4A, B). Después del entrenamiento estático descrito en el protocolo, la Figura 4C muestra la estructura apretada de las fibras miogénicas en la estructura muscular y la disposición simétrica de los segmentos musculares locales. Esto sugiere que el entrenamiento de fuerza estática puede regular la morfología del músculo esquelético en ratones con DM2. Por otro lado, en el gastrocnemio de los ratones control, las mitocondrias estaban distribuidas localmente, con membranas intactas, y las mitocondrias localmente divididas o fusionadas (indicadas por flechas rojas). De manera similar, en el músculo esquelético de los ratones después del entrenamiento de fuerza estática, el número de mitocondrias es normal; Algunos de ellos están obviamente fusionados o divididos (flecha roja). En el modelo T2DM en ratones, por el contrario, el número de mitocondrias es menor y hay poca actividad. ( Ver Figura 4) Esto sugiere que el entrenamiento de fuerza estática puede afectar la función mitocondrial y la actividad en las células del músculo esquelético.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65556/65556fig04.jpg"> Figura 4: Efecto del entrenamiento estático sobre el músculo esquelético de ratones T2DM. (A) Grupo de control; (B) Grupo de modelos T2DM; (C) Grupo de entrenamiento estático. Las M representan las mitocondrias. Las barras de escala blancas representan 50 μm y las barras de escala rojas representan 10 μm. La imagen inferior es una ampliación parcial de la imagen superior. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65556/65556fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Este protocolo proporciona un método simple para hacer equipos de entrenamiento estáticos para ratones. El dispositivo mantiene la contracción isométrica muscular de las extremidades de los ratones para verificar el efecto de intervención del ejercicio tradicional en la diabetes tipo 2 (DM2) y proporciona una nueva terapia de ejercicio para el tratamiento clínico de la DM2.

Método de entrenamiento de fuerza estática para ratones diabéticos tipo 2

The treatment of type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a major difficulty in improving patient health. Exercise is one of the main interventions for T2DM. ...

La terapia con ejercicios es reconocida como un medio importante para tratar la diabetes en todo el mundo. En ensayos clínicos anteriores, confirmamos que los ejercicios chinos no tradicionales pueden aliviar eficazmente los síntomas de la diabetes tipo dos en los pacientes. Por lo tanto, diseñamos este estudio para tratar de averiguar cómo funciona el ejercicio tradicional.Con el fin de investigar el efecto del ejercicio en la diabetes y obtener más información, utilizamos técnicas como la mezcla metabólica y transcrita a la mezcla para nuestra investigación. Los mecanismos moleculares que afectan a la diabetes tipo dos son muy complejos, incluyendo varias vías genéticas, metabólicas e inflamatorias, pero el reto es identificar y elegir una determinada vía para tratar la enfermedad de la mejor manera posible sin tener efectos secundarios.

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Los déficits en la fuerza muscular se producen en muchas condiciones clínicas tales como enfermedad de la motoneurona. La pantalla invertida y pruebas de levantamiento de pesas describen aquí la fuerza medida en ratones casi exclusivamente, con una influencia mínima de factores tales como la coordinación.

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Evaluación de murino ejercicio de resistencia sin el uso de una rejilla de choque: Una Alternativa para el ejercicio forzado

El efecto del entrenamiento de resistencia a corto plazo en personas mayores fue investigado mediante el uso simultáneo de varios métodos. En comparación con un grupo control, se observaron muchas mejoras, como la capacidad aeróbica muscular, la tolerancia a la glucosa, la fuerza, el poder y la calidad muscular ( es decir, la proteína implicada en la señalización celular y la composición del tipo de fibra muscular).

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