Name: Microdiálisis intradérmica: un enfoque para investigar nuevos mecanismos de disfunción microvascular en humanos (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-21T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: Aprenda a utilizar microdiálisis intradérmica para investigar mecanismos de disfunción microvascular en humanos. Esta técnica permite el aislamiento farmacológico de respuestas vasodilatadoras y vasoconstrictoras en la circulación cutánea.

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Todos los procedimientos son aprobados por la Junta de Revisión Institucional de la Universidad Estatal de Pensilvania antes del reclutamiento de los participantes.
1. Configuración del equipo
<ol><li>Encienda la unidad de calefacción local y el caudalímetro láser Doppler. NOTA: Ambos deben calibrarse antes de la recopilación de datos de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El caudalímetro láser Doppler debe conectarse a un hardware de adquisición de datos con muestreo a 100 Hz (100 muestras/min) y registro continuo en un software de adquisición de datos. Si bien se puede utilizar otro hardware y software de adquisición de datos, para simplificar, las instrucciones restantes reflejan el hardware de PowerLab y las capacidades del software LabChart.</li>
	<li>Abra un archivo de software LabChart. NOTA: Se debe crear de antemano un archivo de referencia con la entrada de datos deseada y las capacidades de recopilación continua de datos. Debe haber un panel para cada láser Doppler y calentador local que corresponda a cada sitio de microdiálisis, y los paneles deben corresponder a las entradas de canal apropiadas en la unidad de hardware de adquisición de datos.</li>
</ol>2. Colocación de fibras de microdiálisis
<ol><li>Identifique los vasos sanguíneos grandes y visibles de la piel en la cara ventral del antebrazo e indíquelos con un marcador permanente (utilice un torniquete para visualizar los vasos si es necesario; la identificación de vasos en la piel de pigmentación oscura puede requerir una mayor dependencia de la palpación).</li>
	<li>Frote el área que abarca las marcas y una porción generosa del área circundante con hisopos de betadine. Limpie el betadine con hisopos con alcohol. Cubra el área esterilizada de la piel con un paño estéril y aplique hielo durante ~ 5 minutos para adormecer el área.</li>
	<li>Retire el hielo e inserte una aguja introductora (23 G, 25 mm de longitud), biselada hacia arriba, en la capa dérmica de la piel a una profundidad de 2-3 mm (dependiendo del grosor de la piel individual). Avance la aguja, teniendo cuidado de permanecer en la capa dérmica, y salga de la piel ~ 20 mm desde el punto de inserción. NOTA: Para confirmar la profundidad adecuada de colocación en la piel, la forma de la aguja debe ser visible y fácilmente palpable, pero el color de la aguja debe estar oculto. Si se requiere más de una sonda de microdiálisis para el experimento, será necesario colocar dos agujas introductoras a una distancia de ≥2,5 cm y colocarlas antes de la inserción de la sonda de microdiálisis. Las sondas no deben colocarse a lo largo del mismo recipiente principal.</li>
	<li>Dejando la aguja en su lugar, conecte la sonda (a través del bloqueo Luer) a una jeringa que contenga solución de Ringer lactato. Pase el extremo opuesto de la sonda a través de la aguja introductora hasta que la membrana semipermeable de la sonda esté cerca pero aún fuera de la abertura de la aguja introductora. Perfundir lentamente una pequeña cantidad de solución de Ringer a través de la fibra hasta que la solución se perfunda visiblemente a través de los poros de la membrana para confirmar la integridad de la membrana.</li>
	<li>Si utiliza una sonda de microdiálisis de Harvard Bioscience y una aguja introductora, siga los pasos 2.5.1-2.5.2.<ol><li>Una vez confirmada la función de la sonda, pase la sonda a través de la aguja introductora hasta que la membrana esté completamente contenida en la capa dérmica de la piel dentro de la aguja introductora.</li>
		<li>Con un dedo, asegure la sonda en su lugar proximal a la aguja y retire la aguja en la dirección opuesta a la inserción. Coloque cinta adhesiva en la parte externa de la fibra en su lugar sobre la piel para evitar el desplazamiento de la membrana semipermeable durante el experimento.</li>
	</ol></li>
	<li>Si utiliza una sonda de microdiálisis de Bioanalytical Systems y una aguja introductora, siga los pasos 2.6.1-2.6.2.<ol><li>Una vez confirmada la función de la sonda, tome el cubo de la aguja introductora y la parte distal de la sonda de microdiálisis con una mano y, simultáneamente, retire la aguja opuesta a la dirección de inserción, moviendo la sonda de microdiálisis a su lugar.</li>
		<li>Ajuste la sonda según sea necesario para asegurarse de que la membrana semipermeable esté enterrada completamente en la piel. Coloque cinta adhesiva con cinta adhesiva la fibra externa en su lugar sobre la piel para evitar el desplazamiento de la membrana semipermeable durante el experimento.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Hiperemia
<ol><li>Mientras espera a que disminuya la respuesta hiperémica a la inserción de la aguja (~60-90 min), coloque la jeringa de un solo uso en la bandeja portajeringas de las bombas de microinfusión. Perfundir solución de Ringer, solución salina o solución vehicular lactato (la solución en la que se disuelve el agente farmacológico experimental; 2 μL/min) durante la fase de hiperemia. NOTA: Si bien las sondas de microdiálisis no se pueden quitar durante esta fase de ~ 60-90 minutos, el participante puede ajustar la posición de su cuerpo o mover la mano, o el bloqueo Luer de la sonda se puede quitar de la jeringa y asegurar con cinta adhesiva al brazo del participante para permitirle un rango de movimiento libre para pararse brevemente. Una vez instrumentadas con calentadores locales y sondas de flujo Doppler láser (LDF) y una vez que ha comenzado la recopilación de datos, las sondas LDF no se pueden mover.</li>
	<li>Cuando el enrojecimiento de la piel, que es un indicador de la respuesta hiperémica al traumatismo con aguja, haya disminuido, conecte la unidad de calentamiento local a la piel que cubre la membrana semipermeable a través del disco adhesivo de la sonda, asegurándose de que el centro del calentador se alinee con la trayectoria de la sonda de microdiálisis.</li>
	<li>Coloque la sonda LDF en la abertura en el centro del calentador local de modo que el láser quede directamente perpendicular a la superficie de la piel. Una vez colocadas y aseguradas las sondas LDF, haga clic en iniciar en el software de adquisición de datos para registrar y mostrar continuamente los valores de flujo de glóbulos rojos (flujo de glóbulos rojos; unidades de perfusión, PU). Si la hiperemia ha disminuido por completo, el flujo de glóbulos rojos será estable en ~5-20 PU (la pulsatilidad de los vasos debajo de la sonda LDF puede reflejarse por ligeras elevaciones en la PU que coinciden con los latidos del corazón).</li>
	<li>Coloque un manguito automático de presión arterial en el brazo de un sujeto que no haya sido instrumentado.</li>
	<li>Ajuste los calentadores locales a 33 °C para mantener la temperatura de la piel dentro de un rango termoneutrode 25, eliminando así cualquier variación en la influencia de los estímulos térmicos. Para agregar un comentario a la grabación continua en el software de adquisición de datos para denotar eventos en el experimento, haga clic en el cuadro de texto en la esquina superior derecha de la pantalla, escriba un comentario, seleccione qué canales deben recibir el comentario y haga clic en agregar.</li>
</ol>4. Protocolo dosis-respuesta acetilcolina
<ol><li>Una vez que el flujo de glóbulos rojos se haya estabilizado en respuesta al calor local de 33 °C, comience la recopilación de datos de referencia, que se distingue en el archivo de software de adquisición de datos mediante un comentario de inicio de línea de base. Se requiere al menos un mínimo de 5-10 minutos de línea de base estable para el análisis de datos; reinicie la línea de base en cualquier momento durante este punto de la recopilación de datos si es necesario, y márquelo en el archivo LabChart. En el último minuto de la línea de base, recopile una medición de la presión arterial e ingrese los valores en un comentario en el archivo LabChart.</li>
	<li>Al final de los 5-10 minutos de la recopilación de datos de referencia, mida y registre la presión arterial de referencia e ingrese el comentario final de la línea de base en el software de adquisición de datos.</li>
	<li>Apague las bombas de microinfusión y cambie las jeringas llenas de solución de Ringer lactato por la jeringa llena con la concentración más baja de ACh (10−10 M).</li>
	<li>Asegure las jeringas nuevas en su lugar y confirme la perfusión del líquido a través del extremo de la sonda antes de volver a encender las bombas de microinfusión. Introduzca el comentario begin −10 en la grabación del software de adquisición de datos.</li>
	<li>Cada concentración de ACh se perfundirá durante 5-10 min a 2 μL/min. En el último minuto de perfusión, para cada concentración, mida y registre la presión arterial. Una vez finalizado el tiempo de perfusión para una concentración dada, sustituya la jeringa por la siguiente concentración más alta (por ejemplo, se cambia la solución de 10−10 M ACh por una solución de 10−9 M de ACh), como se describe en los pasos 4.2-4.4.</li>
	<li>Inmediatamente después de perfundir la concentración final de ACh (10−1 M), sustituya la jeringa de ACh por una que contenga solución de Ringer y aumente la temperatura del calentador local a 43 °C. Una vez que el flujo de glóbulos rojos se haya estabilizado, reemplace la solución de Ringer con nitroprusiato de sodio (28 mM) para producir una vasodilatación local máxima inducida por calor e inducida farmacológicamente. Mida y registre la presión arterial cada ~3 minutos durante esta fase de vasodilatación máxima.</li>
	<li>Una vez que se haya producido una meseta máxima de flujo de glóbulos rojos (~5 min de PU estable), finalice el experimento. Seleccione detener en la esquina inferior derecha del software de adquisición de datos para finalizar la recopilación continua de datos.</li>
</ol>5. Protocolo de calefacción local
<ol><li>Una vez que el flujo de glóbulos rojos se haya estabilizado después de la hiperemia, comience la recopilación de datos de referencia e indíquelo en el archivo del software de adquisición de datos con un comentario. En el último minuto de la línea de base, recopile una medición de la presión arterial e ingrese los valores en un comentario en el archivo de software de adquisición de datos.</li>
	<li>Aumente los calentadores locales a 39 °C o 42 °C, según las necesidades del protocolo (explicado en la sección de discusión).</li>
	<li>Una vez que el flujo de glóbulos rojos se ha estabilizado en respuesta a la aplicación de calor local (~40-60 min de calentamiento), perfundir N G-nitro-l-arginina éster metílico (L-NAME; 15 mM disuelto en la solución de Ringer; 2 μL/min; un inhibidor de la NO sintasa) a través de la(s) sonda(s) de microdiálisis.</li>
	<li>Una vez que el flujo de glóbulos rojos se haya estabilizado en respuesta a L-NAME (~15-25 min de perfusión), aumente los calentadores locales a 43 °C.</li>
	<li>Una vez que el flujo de glóbulos rojos se ha estabilizado en respuesta a 43 °C (se produce una meseta de ~2-5 min después de ~20-45 min de calentamiento), perfundir nitroprusiato de sodio (28 mM disueltos en la solución de Ringer) a través de la(s) sonda(s) de microdiálisis.</li>
	<li>Una vez que se haya producido una meseta máxima de flujo de glóbulos rojos (~5 min de PU estable), finalice el experimento. Seleccione detener en la esquina inferior derecha del software de adquisición de datos para finalizar la recopilación de datos.</li>
</ol>6. Extracción de las sondas de microdiálisis
<ol><li>Una vez finalizado el experimento, utilice unas tijeras quirúrgicas para cortar las sondas de microdiálisis. Retire con cuidado las sondas LDF de los calentadores y retire los calentadores de la piel. Retire con cuidado la cinta que sujeta las sondas en su lugar sobre la piel.</li>
	<li>Identifique visualmente qué sitio de punción a cada lado de la sonda ha formado el coágulo de sangre más pequeño. Corte la parte de la sonda cerca del sitio con el coágulo más pequeño, dejando ~ 1 pulgada de la sonda fuera de la piel sin cortar.</li>
	<li>Limpie la parte de la piel que rodea los sitios de entrada y salida de la sonda con un hisopo con alcohol, así como la longitud de ~ 1 de la sonda que queda en el sitio menos coagulado.</li>
	<li>Deja que el alcohol se seque en la piel. Luego, agarre la parte de la sonda que se extiende desde el sitio de punción con el coágulo mayor, opuesta a la porción de ~ 1 en el extremo menos coagulado. Tire lentamente de la sonda hacia el coágulo de sangre más grande.</li>
	<li>Coloque una gasa estéril sobre cualquier sangrado que resulte de la extracción de la sonda y aplique presión.</li>
</ol>

Investigación de nuevos mecanismos de disfunción microvascular en humanos

<ol><li>Xu, J. Q., Murphy, S. L., Kochanek, K. D., Arias, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+in+the+United+States%2C+2021%5BTitle%5D)+AND+%22NCHS+Data+Brief%22%5BJournal%5D)">Mortality in the United States, 2021.</a> NCHS Data Brief. 456, (2022).</li>
<li>Tsao, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2023+update%3A+A+report+from+the+American+heart+association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association.</a> Circulation. 147 (8), e93(2023).</li>
<li>Cohuet, G., Struijker-Boudier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+target+organ+damage+caused+by+hypertension%3A+Therapeutic+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of target organ damage caused by hypertension: Therapeutic potential.</a> Pharmacology & Therapeutics. 111 (1), 81-98 (2006).</li>
<li>Park, K. H., Park, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+dysfunction%3A+Clinical+implications+in+cardiovascular+disease+and+therapeutic+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Endothelial dysfunction: Clinical implications in cardiovascular disease and therapeutic approaches.</a> Journal of Korean Medical Science. 30 (9), 1213-1225 (2015).</li>
<li>Levy, B. I., Ambrosio, G., Pries, A. R., Struijker-Boudier, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microcirculation+in+hypertension%3A+a+new+target+for+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Microcirculation in hypertension: a new target for treatment.</a> Circulation. 104 (6), 735-740 (2001).</li>
<li>Sara, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+coronary+microvascular+dysfunction+among+patients+with+chest+pain+and+nonobstructive+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%3A+Cardiovascular+Interventions%22%5BJournal%5D)">Prevalence of coronary microvascular dysfunction among patients with chest pain and nonobstructive coronary artery disease.</a> Journal of the American College of Cardiology: Cardiovascular Interventions. 8 (11), 1445-1453 (2015).</li>
<li>Weis, M., Hartmann, A., Olbrich, H. G., Hör, G., Zeiher, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+significance+of+coronary+flow+reserve+on+left+ventricular+ejection+fraction+in+cardiac+transplant+recipients%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prognostic significance of coronary flow reserve on left ventricular ejection fraction in cardiac transplant recipients.</a> Transplantation. 65 (1), 103-108 (1998).</li>
<li>Rossi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+skin+vasoreactivity+and+blood+flow+oscillations+in+hypertensive+patients%3A+Effect+of+short-term+antihypertensive+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Investigation of skin vasoreactivity and blood flow oscillations in hypertensive patients: Effect of short-term antihypertensive treatment.</a> Journal of Hypertension. 29 (8), 1569-1576 (2011).</li>
<li>Pepine, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+reactivity+to+adenosine+predicts+adverse+outcome+in+women+evaluated+for+suspected+ischemia+results+from+the+National+Heart%2C+Lung+and+Blood+Institute+WISE+%28Women%27s+Ischemia+Syndrome+Evaluation%29+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular reactivity to adenosine predicts adverse outcome in women evaluated for suspected ischemia results from the National Heart, Lung and Blood Institute WISE (Women's Ischemia Syndrome Evaluation) study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (25), 2825-2832 (2010).</li>
<li>Matsuda, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+clinical+significance+of+discordant+changes+in+fractional+and+coronary+flow+reserve+after+elective+percutaneous+coronary+intervention%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Prevalence and clinical significance of discordant changes in fractional and coronary flow reserve after elective percutaneous coronary intervention.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (12), e004400(2016).</li>
<li>Gupta, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+noninvasive+physiological+assessment+of+coronary+circulatory+function+and+impact+on+cardiovascular+mortality+in+patients+with+stable+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Integrated noninvasive physiological assessment of coronary circulatory function and impact on cardiovascular mortality in patients with stable coronary artery disease.</a> Circulation. 136 (24), 2325-2336 (2017).</li>
<li>Roustit, M., Cracowski, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+endothelial+and+neurovascular+function+in+human+skin+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Assessment of endothelial and neurovascular function in human skin microcirculation.</a> Trends in Pharmacological Sciences. 34 (7), 373-384 (2013).</li>
<li>Low, D. A., Jones, H., Cable, N. T., Alexander, L. M., Kenney, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+reviews+of+the+assessment+of+human+cardiovascular+function%3A+interrogation+and+understanding+of+the+control+of+skin+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Historical reviews of the assessment of human cardiovascular function: interrogation and understanding of the control of skin blood flow.</a> European Journal of Applied Physiology. 120 (1), 1-16 (2020).</li>
<li>Kenney, W. L., Cannon, J. G., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutaneous+microvascular+dysfunction+correlates+with+serum+LDL+and+sLOX-1+receptor+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Cutaneous microvascular dysfunction correlates with serum LDL and sLOX-1 receptor concentrations.</a> Microvascular Research. 85, 112-117 (2013).</li>
<li>Holowatz, L. A., Thompson, C. S., Minson, C. T., Kenney, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+acetylcholine-mediated+vasodilatation+in+young+and+aged+human+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of acetylcholine-mediated vasodilatation in young and aged human skin.</a> Journal of Physiology. 563, 965-973 (2005).</li>
<li>Sokolnicki, L. A., Roberts, S. K., Wilkins, B. W., Basu, A., Charkoudian, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+nitric+oxide+to+cutaneous+microvascular+dilation+in+individuals+with+type+2+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Endocrinology+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Contribution of nitric oxide to cutaneous microvascular dilation in individuals with type 2 diabetes mellitus.</a> American Journal of Physiology - Endocrinology and Metabolism. 292 (1), E314-E318 (2007).</li>
<li>DuPont, J. J., Ramick, M. G., Farquhar, W. B., Townsend, R. R., Edwards, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NADPH+oxidase-derived+reactive+oxygen+species+contribute+to+impaired+cutaneous+microvascular+function+in+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">NADPH oxidase-derived reactive oxygen species contribute to impaired cutaneous microvascular function in chronic kidney disease.</a> American Journal of Physiology - Renal Physiology. 306 (12), F1499-F1506 (2014).</li>
<li>Sprung, V. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide-mediated+cutaneous+microvascular+function+is+impaired+in+polycystic+ovary+syndrome+but+can+be+improved+by+exercise+training%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide-mediated cutaneous microvascular function is impaired in polycystic ovary syndrome but can be improved by exercise training.</a> Journal of Physiology. 591 (6), 1475-1487 (2013).</li>
<li>Greaney, J. L., Saunders, E. F. H., Santhanam, L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+contributes+to+microvascular+endothelial+dysfunction+in+men+and+women+with+major+depressive+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Circulatory+Research%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress contributes to microvascular endothelial dysfunction in men and women with major depressive disorder.</a> Circulatory Research. 124 (4), 564-574 (2019).</li>
<li>Stanhewicz, A. E., Jandu, S., Santhanam, L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+angiotensin+II+sensitivity+contributes+to+microvascular+dysfunction+in+women+who+have+had+preeclampsia%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Increased angiotensin II sensitivity contributes to microvascular dysfunction in women who have had preeclampsia.</a> Hypertension. 70 (2), 382-389 (2017).</li>
<li>Greaney, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+hydrogen+sulfide-mediated+vasodilation+contributes+to+microvascular+endothelial+dysfunction+in+hypertensive+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Impaired hydrogen sulfide-mediated vasodilation contributes to microvascular endothelial dysfunction in hypertensive adults.</a> Hypertension. 69 (5), 902-909 (2017).</li>
<li>Dillon, G. A., Stanhewicz, A. E., Serviente, C., Greaney, J. L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogen+sulfide-dependent+microvascular+vasodilation+is+improved+following+chronic+sulfhydryl-donating+antihypertensive+pharmacotherapy+in+adults+with+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Hydrogen sulfide-dependent microvascular vasodilation is improved following chronic sulfhydryl-donating antihypertensive pharmacotherapy in adults with hypertension.</a> Journal of Physiology. 321 (4), H728-H734 (2021).</li>
<li>Wong, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+nerve-mediated+and+nitric+oxide-dependent+cutaneous+vasodilation+in+normotensive+and+prehypertensive+non-Hispanic+blacks+and+whites%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Sensory nerve-mediated and nitric oxide-dependent cutaneous vasodilation in normotensive and prehypertensive non-Hispanic blacks and whites.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (2), H271-H281 (2020).</li>
<li>Dillon, G. A., Greaney, J. L., Shank, S., Leuenberger, U. A., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHA%2FACC-defined+stage+1+hypertensive+adults+do+not+display+cutaneous+microvascular+endothelial+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">AHA/ACC-defined stage 1 hypertensive adults do not display cutaneous microvascular endothelial dysfunction.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 319 (3), H539-H546 (2020).</li>
<li>Gagge, A. P., Stolwijk, J. A., Hardy, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comfort+and+thermal+sensations+and+associated+physiological+responses+at+various+ambient+temperatures%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Research%22%5BJournal%5D)">Comfort and thermal sensations and associated physiological responses at various ambient temperatures.</a> Environmental Research. 1 (1), 1-20 (1967).</li>
<li>Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+limb+or+sex+differences+in+the+cutaneous+vascular+responses+to+exogenous+norepinephrine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Lack of limb or sex differences in the cutaneous vascular responses to exogenous norepinephrine.</a> Journal of Applied Physiology. 117 (12), 1417-1423 (2014).</li>
<li>Greaney, J. L., Stanhewicz, A. E., Kenney, W. L., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+increases+in+skin+sympathetic+nerve+activity+contribute+to+age-related+decrements+in+reflex+cutaneous+vasoconstriction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Impaired increases in skin sympathetic nerve activity contribute to age-related decrements in reflex cutaneous vasoconstriction.</a> Journal of Physiology. 593 (9), 2199-2211 (2015).</li>
<li>Alba, B. K., Greaney, J. L., Ferguson, S. B., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+function+is+impaired+in+the+cutaneous+microcirculation+of+adults+with+psoriasis+through+reductions+in+nitric+oxide-dependent+vasodilation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Endothelial function is impaired in the cutaneous microcirculation of adults with psoriasis through reductions in nitric oxide-dependent vasodilation.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 314 (2), H343-H349 (2018).</li>
<li>Greaney, J. L., Surachman, A., Saunders, E. F. H., Alexander, L. M., Almeida, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Greater+daily+psychosocial+stress+exposure+is+associated+with+increased+norepinephrine-induced+vasoconstriction+in+young+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Greater daily psychosocial stress exposure is associated with increased norepinephrine-induced vasoconstriction in young adults.</a> Journal of the American Heart Association. 9 (9), e015697(2020).</li>
<li>Nakata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+catecholamine+neurotransmitters+released+from+cutaneous+vasoconstrictor+nerve+endings+in+men+with+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Regulatory%2C+Integrative+and+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Quantification of catecholamine neurotransmitters released from cutaneous vasoconstrictor nerve endings in men with cervical spinal cord injury.</a> American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 324 (3), R345-R352 (2023).</li>
<li>Tucker, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postsynaptic+cutaneous+vasodilation+and+sweating%3A+Influence+of+adiposity+and+hydration+status%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Postsynaptic cutaneous vasodilation and sweating: Influence of adiposity and hydration status.</a> European Journal of Applied Physiology. 118 (8), 1703-1713 (2018).</li>
<li>Craighead, D. H., Alexander, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menthol-induced+cutaneous+vasodilation+is+preserved+in+essential+hypertensive+men+and+women%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Menthol-induced cutaneous vasodilation is preserved in essential hypertensive men and women.</a> American Journal of Hypertension. 30 (12), 1156-1162 (2017).</li>
<li>Brunt, V. E., Minson, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KCa+channels+and+epoxyeicosatrienoic+acids%3A+Major+contributors+to+thermal+hyperaemia+in+human+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">KCa channels and epoxyeicosatrienoic acids: Major contributors to thermal hyperaemia in human skin.</a> Journal of Physiology. 590 (15), 3523-3534 (2012).</li>
<li>Choi, P. J., Brunt, V. E., Fujii, N., Minson, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+approach+to+measure+cutaneous+microvascular+function%3A+An+improved+test+of+NO-mediated+vasodilation+by+thermal+hyperemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">New approach to measure cutaneous microvascular function: An improved test of NO-mediated vasodilation by thermal hyperemia.</a> Journal of Applied Physiology. 117 (3), 277-283 (2014).</li>
<li>Johnson, J. M., Kellogg, D. L. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+thermal+control+of+the+human+cutaneous+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Local thermal control of the human cutaneous circulation.</a> Journal of Applied Physiology. 109 (4), 1229-1238 (2010).</li>
<li>Jung, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Doppler+flux+measurement+for+the+assessment+of+cutaneous+microcirculation-Critical+remarks%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Hemorheology+and+Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Laser Doppler flux measurement for the assessment of cutaneous microcirculation-Critical remarks.</a> Clinical Hemorheology and Microcirculation. 55 (4), 411-416 (2013).</li>
</ol>

Los autores no tienen conflictos de intereses ni nada que revelar.

La técnica de microdiálisis intradérmica es una herramienta versátil en la investigación vascular humana. Los investigadores pueden modificar el protocolo para diversificar aún más sus aplicaciones. Por ejemplo, describimos un protocolo dosis-respuesta de ACh, pero otras investigaciones sobre los mecanismos de vasoconstricción o tono vasomotor, en lugar de la vasodilatación sola, han utilizado enfoques dosis-respuesta de norepinefrina o nitroprusiato sódico 26,27,28,29,30,31.<sup class=...

Las enfermedades cardiovasculares (ECV) son la principal causa de muerte enlos Estados Unidos. La hipertensión arterial (HTA) es un factor de riesgo independiente para el accidente cerebrovascular, la enfermedad coronaria y la insuficiencia cardíaca y se estima que afecta a más del ~ 50% de la población de los Estados Unidos2. La HTA puede desarrollarse como una ECV independiente (HTA primaria) o como resultado de otra afección, como la enfermedad renal poliquística y/o los trastornos endocrinos (HTA secundaria). La amplitud de las etiologías de la HTA complica las investigaciones sobre los mecanismos subyacentes y el daño a los órganos terminales observado con la HTA. Se necesitan enfoques de investigación diversos y novedosos sobre la fisiopatología del daño a los órganos terminales asociado con la HTA.
Uno de los primeros signos patológicos de ECV es la disfunción endotelial, caracterizada por una vasodilatación mediada por óxido nítrico (NO)alterada 3,4,5. La dilatación mediada por flujo es un enfoque común utilizado para cuantificar la disfunción endotelial asociada con la ECV, pero la disfunción endotelial en los lechos microvasculares puede ser independiente y precursora de la de las grandes arterias de los conductos 6,7,8. Además, las arteriolas de resistencia actúan más directamente sobre el tejido local que las arterias conducto y tienen un control más inmediato sobre el suministro de sangre rica en oxígeno. La función microvascular es predictiva de supervivencia libre de eventos cardiovasculares adversos 9,10,11. La microvasculatura cutánea es un lecho vascular accesible que se puede utilizar para examinar las respuestas a estímulos vasoconstrictores o vasodilatadores fisiológicos y farmacológicos. La microdiálisis intradérmica es una técnica mínimamente invasiva, cuyo objetivo es investigar los mecanismos de la función vascular del músculo liso y endotelial en la microvasculatura cutánea con disección farmacológica dirigida. Este método contrasta con otras técnicas, como la hiperemia reactiva post-oclusiva, que no permite la disección farmacológica, y la iontoforesis, que permite la administración farmacológica pero es menos precisa en su mecanismo de acción (revisado en profundidad en otro lugar12).
La justificación del desarrollo y uso de esta técnica se examina ampliamente en otro lugar13. Este enfoque se desarrolló originalmente para su uso en la investigación neurológica en roedores y luego se aplicó por primera vez a los humanos para investigar los mecanismos subyacentes a la vasodilatación activa desde un punto de vista termorregulador. A finales de la década de 1990, este método se utilizó para examinar los mecanismos neurales y endoteliales con respecto al calentamiento local de la piel. Desde entonces, la técnica se ha utilizado para investigar una serie de mecanismos de señalización neurovascular en la piel.
Utilizando esta técnica, nuestro grupo y otros han interrogado los mecanismos de la disfunción endotelial en la microvasculatura de varias poblaciones clínicas, incluyendo, entre otras, dislipidemia, envejecimiento primario, diabetes, enfermedad renal crónica, síndrome de ovario poliquístico, preeclampsia, trastorno depresivo mayor 14,15,16,17,18,19 e hipertensión 20,21,22,23,24. Por ejemplo, un estudio previo encontró que las mujeres normotensas con antecedentes de preeclampsia, que tienen un mayor riesgo de ECV, tenían una vasodilatación mediada por NO reducida en la circulación cutánea en comparación con las mujeres con antecedentes de embarazo normotenso20. En otro estudio, los adultos diagnosticados con HTA primaria demostraron una mayor sensibilidad a la angiotensina II en la microvasculatura en comparación con los controles sanos21, y se ha demostrado que la farmacoterapia antihipertensiva con donación crónica de sulfhidrilo en pacientes con HTA primaria disminuye la presión arterial y mejora tanto la vasodilatación mediada por sulfuro de hidrógeno como por NO22. Wong et al.23 encontraron una vasodilatación sensitiva y mediada por NO en adultos prehipertensos, coincidiendo con nuestro hallazgo de una progresión de la disfunción endotelial con el aumento de los estadios de HTA, según la categorización de las guías de la Asociación Americana del Corazón y el Colegio Americano de Cardiología de 201724.
La técnica de microdiálisis intradérmica permite realizar investigaciones mecanicistas estrictamente controladas sobre la función microvascular en estados de salud y enfermedad. Por lo tanto, este trabajo tiene como objetivo describir la técnica de microdiálisis intradérmica aplicada por nuestro grupo y otros. Detallamos los procedimientos tanto para la estimulación farmacológica del endotelio con acetilcolina (ACh) para examinar la relación dosis-respuesta como para la estimulación fisiológica de la producción endógena de NO con un protocolo de estímulo de calentamiento local a 39 °C o 42 °C. Presentamos resultados representativos para cada abordaje y discutimos las implicaciones clínicas de los hallazgos que han surgido de esta técnica.

<table><tbody><tr><td>Jeringas de 1 mL</td><td>Jeringas BD</td><td>302100</td><td></td></tr><tr><td>Acetilcolina</td><td>1424511 de la Farmacopea de los Estados Unidos</td><td></td><td>Los datos piloto recopilados en nuestro laboratorio indican que el secado de la acetilcolina aumenta la variabilidad de la respuesta CVC; No secar, almacenar en desecador</td></tr><tr><td>Hisopos con alcohol</td><td>Mckesson</td><td>191089</td><td></td></tr><tr><td>Baby Bee Syringe Drive</td><td>Bioanalytical Systems, Incorporated</td><td>MD-1001</td><td>En este estudio se utilizó el soporte opcional de 3 jeringas (número de catalgo MD-1002)</td></tr><tr><td>Sondas de microdiálisis lineal CMA 30</td><td>Aparato de Harvard</td><td>CMA8010460</td><td></td></tr><tr><td>Monitor puntual Connex</td><td>Monitor de presión arterial automatizado</td><td>WelchAllyn</td><td>74CT-B</td></tr><tr><td>Controlador de bomba de jeringa de colmena Sistemas</td><td>bioanalíticos, incorporados</td><td>MD-1020</td><td>Controla hasta 4 unidades de jeringa Baby Bee</td></tr><tr><td>LabChart 8</td><td>AD Instruments</td><td></td><td>**El hardware y el software de PowerLab deben ser versiones compatibles</td></tr><tr><td>Solución de Ringer Lactato</td><td>Avantor (VWR)</td><td>76313-478</td><td></td></tr><tr><td>Medidor de flujo sanguíneo con doppler láser</td><td>Moor Instruments</td><td>MoorVMS-LDF</td><td></td></tr><tr><td>Kit de calibración de sonda Doppler láser</td><td>Moor Instruments</td> Sonda <td>CAL</td><td></td></tr><tr><td>Laser Doppler VP12</td><td>Moor Instruments</td><td>VP12</td><td></td></tr><tr><td>Sondas de microdiálisis lineal Bioanalytical</td><td>Systems, Inc.</td><td>MD-2000</td><td></td></tr><tr><td>NG-nitro-l-arginina metil éster</td><td>Sigma Aldrich</td><td>483125-M</td><td>L-NAME</td></tr><tr><td>Povidona yodada / betadine</td><td>Dynarex</td><td>1202</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab C Dispositivo de adquisición de datos</td><td>AD Instruments</td><td>PLC01</td><td>**</td></tr><tr><td>Interfaz de instrumento PowerLab C AD</td><td>Instruments</td><td>PLCI1</td><td>**</td></tr><tr><td>Discos adhesivos de sonda</td><td>Moor Instruments</td><td></td><td>conecta la unidad de calefacción local a la piel</td></tr><tr><td>Controlador de calentador de piel Moor</td><td>Instruments</td><td>moorVMS-HEAT 1.3</td><td></td></tr><tr><td>Pequeña sonda de calefacción</td><td>Moor Instruments</td><td>VHP2</td><td></td></tr><tr><td>Paños estériles</td><td>Halyard</td><td>89731</td><td></td></tr><tr><td>Gasa estéril</td><td>Dukal Corporation</td><td>2085</td><td></td></tr><tr><td>Guantes quirúrgicos estériles</td><td>Esteem Número</td> de catálogo de Cardinal Health <td>8856N</td><td>seguido de las iniciales de la talla de guante, luego la letra "B" (por ejemplo, 8856NMB para mediano)</td></tr><tr><td>Tijeras quirúrgicas</td><td>Cole-Parmer</td><td>UX-06287-26</td><td></td></tr></tbody></table>

microdiálisis intradérmica: un enfoque para investigar nuevos mecanismos de disfunción microvascular en humanos

Intradermal Microdialysis: An Approach to Investigating Novel Mechanisms of Microvascular Dysfunction in Humans

La vasculatura cutánea es un tejido accesible que se puede utilizar para evaluar la función microvascular en humanos. La microdiálisis intradérmica es una técnica mínimamente invasiva que se utiliza para investigar los mecanismos del músculo liso vascular y la función endotelial en la circulación cutánea. Esta técnica permite la disección farmacológica de la fisiopatología de la disfunción endotelial microvascular indexada por la disminución de la vasodilatación mediada por óxido nítrico, un indicador del riesgo de desarrollo de enfermedades cardiovasculares. En esta técnica, se coloca una sonda de microdiálisis en la capa dérmica de la piel y se coloca una unidad de calentamiento local con una sonda de flujometría láser Doppler sobre la sonda para medir el flujo de glóbulos rojos. La temperatura local de la piel se restringe o estimula con la aplicación directa de calor, y los agentes farmacológicos se perfunden a través de la sonda para estimular o inhibir las vías de señalización intracelular con el fin de inducir vasodilatación o vasoconstricción o para interrogar mecanismos de interés (cofactores, antioxidantes, etc.). Se cuantifica la conductancia vascular cutánea y se pueden delinear los mecanismos de disfunción endotelial en estados patológicos.

Protocolo dosis-respuesta acetilcolina
La Figura 1A muestra un esquema que detalla el protocolo dosis-respuesta de ACh. La Figura 1B ilustra los trazados representativos de los valores de flujo de glóbulos rojos (unidades de perfusión, PU; promedios de 30 s) del protocolo estandarizado de dosis-respuesta de ACh para un sujeto a lo largo del tiempo. La Figura 1C ilustra un archivo de datos...

La microdiálisis intradérmica es una técnica mínimamente invasiva que se utiliza para investigar la función microvascular en la salud y la enfermedad. Tanto los protocolos dosis-respuesta como los de calentamiento local se pueden utilizar para esta técnica para explorar los mecanismos de vasodilatación y vasoconstricción en la circulación cutánea.

Microdiálisis intradérmica: un enfoque para investigar nuevos mecanismos de disfunción microvascular en humanos

The cutaneous vasculature is an accessible tissue that can be used to assess microvascular function in humans. Intradermal microdialysis is a minimally ...

Mi investigación examina los mecanismos de la disfunción vascular en humanos con riesgo de enfermedad cardiovascular tradicional y no tradicional. He desarrollado un modelo para examinar los mecanismos de disfunción microvascular en humanos, que permite la disección farmacológica que antes era imposible. Hemos explorado varias dianas moleculares, mediando la disfunción vascular, trasladando la investigación preclínica a los seres humanos utilizando este novedoso bioensayo.Uno de los retos actuales en los experimentos es que las respuestas vasodilatadoras y vasoconstrictoras son causadas por múltiples mecanismos. Para aislar los mecanismos de interés se deben utilizar agentes farmacológicos. Si bien este enfoque es limitado, permite una comprensión más completa de las respuestas vasculares cutáneas.En cohortes clínicas como la hipertensión y el trastorno depresivo mayor, o TDM, hemos descubierto disfunción microvascular. Las posibles razones de esta disfunción en estos grupos son el aumento de la actividad de la arginasa y de las especies reactivas de oxígeno, respectivamente. Se ha encontrado que el tratamiento con salicilatos a corto plazo es eficaz para mejorar la función microvascular y el TDM.Esta técnica es mínimamente invasiva y permite una disección farmacológica bien controlada de los mecanismos de función de un lecho vascular local. Esto se opone a técnicas como la hiperemia reactiva postoclusiva y la iontoforesis, que son útiles, pero permiten un poco de control de una herramienta farmacológica. Actualmente, nuestro laboratorio está investigando la contribución de la inflamación y la mediación de la disfunción microvascular en mujeres con endometriosis.Además, planeamos investigar mecanismos similares en mujeres negras no hispanas.

intradermal-microdialysis-an-approach-to-investigating-novel

Research

Investigación

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Aprenda a utilizar microdiálisis intradérmica para investigar mecanismos de disfunción microvascular en humanos. Esta técnica permite el aislamiento farmacológico de respuestas vasodilatadoras y vasoconstrictoras en la circulación cutánea.

Microdiálisis intradérmica: un enfoque para investigar nuevos mecanismos de disfunción microvascular en humanos

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