Name: Alivio de la nefropatía por IgA mediada por dioscina mediante la inhibición de la activación de las células B in vivo y la disminución de la producción de IgA1 deficiente en galactosa in vitro (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T14:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 18 s
Description: Descubre cómo la dioscina alivia la nefropatía por IgA inhibiendo células B y reduciendo la producción de IgA1 deficiente en galactosa. Este método experimental ofrece datos para el desarrollo de tratamientos con medicina natural.

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<meta charset="utf8"></head><body>Tratamiento de la nefropatía por inmunoglobulina A (IgAN) con dioscina en un modelo murino

<ol><li>Knoppova, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+origin+and+activities+of+IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">The origin and activities of IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy.</a> Frontiers in Immunology. 7, 117(2016).</li>
<li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+The+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of IgA nephropathy.</a> Journal of The American Society of Nephrology. 22 (10), 1795-1803 (2011).</li>
<li>He, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthetic+double-stranded+RNA+poly%28I%3AC%29+aggravates+IgA+nephropathy+by+triggering+IgA+class+switching+recombination+through+the+TLR3-BAFF+axis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Synthetic double-stranded RNA poly(I:C) aggravates IgA nephropathy by triggering IgA class switching recombination through the TLR3-BAFF axis.</a> American Journal of Nephrology. 42 (3), 185-197 (2015).</li>
<li>Zhao, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+level+of+galactose-deficient+IgA1+in+the+sera+of+patients+with+IgA+nephropathy+is+associated+with+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">The level of galactose-deficient IgA1 in the sera of patients with IgA nephropathy is associated with disease progression.</a> Kidney International. 82 (7), 790-796 (2012).</li>
<li>Xing, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C1GALT1+expression+is+associated+with+galactosylation+of+IgA1+in+peripheral+B+lymphocyte+in+immunoglobulin+a+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Nephrology%22%5BJournal%5D)">C1GALT1 expression is associated with galactosylation of IgA1 in peripheral B lymphocyte in immunoglobulin a nephropathy.</a> BMC Nephrology. 21 (1), 18(2020).</li>
<li>Qin, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((External+suppression+causes+the+low+expression+of+the+Cosmc+gene+in+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">External suppression causes the low expression of the Cosmc gene in IgA nephropathy.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 23 (5), 1608-1614 (2008).</li>
<li>Sakai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactobacillus+gasseri+SBT2055+induces+TGF-%CE%B2+expression+in+dendritic+cells+and+activates+TLR2+signal+to+produce+IgA+in+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lactobacillus gasseri SBT2055 induces TGF-β expression in dendritic cells and activates TLR2 signal to produce IgA in the small intestine.</a> PLoS One. 9 (8), 105370(2014).</li>
<li>Gutzeit, C., Magri, G., Cerutti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+IgA+production+and+its+role+in+host-microbe+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Intestinal IgA production and its role in host-microbe interaction.</a> Immunological Reviews. 260 (1), 76-85 (2014).</li>
<li>Serino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+a+retrospective+international+study%2C+circulating+miR-148b+and+let-7b+were+found+to+be+serum+markers+for+detecting+primary+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">In a retrospective international study, circulating miR-148b and let-7b were found to be serum markers for detecting primary IgA nephropathy.</a> Kidney International. 89 (3), 683-692 (2016).</li>
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<li>Tian, W. W., Wei, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Professor+TONG+Xiaolin+used+the+experience+of+Dioscoreae+Nipponicae%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Professor TONG Xiaolin used the experience of Dioscoreae Nipponicae.</a> Jilin Journal of Chinese Medicine. 40 (05), 589-592 (2020).</li>
<li>Rao, X. R., Bai, Y. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Das+Xiwen%27s+experience+in+treating+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Beijing+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Das Xiwen's experience in treating IgA nephropathy.</a> Beijing Journal of Traditional Chinese Medicine. 9, 691-693 (2008).</li>
<li>Si, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+data+mining+study+on+the+pattern+of+medication+use+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy+by+Professor+Zhang+Yu%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chinese+Physician%22%5BJournal%5D)">A data mining study on the pattern of medication use in the treatment of IgA nephropathy by Professor Zhang Yu.</a> Journal of Chinese Physician. 20 (01), 109-111 (2018).</li>
<li>Jiang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+enzymatic+extraction+technology+of+Diosgenin+from+Dioscorea+nipponica%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Traditional+Patent+Medicine%22%5BJournal%5D)">Optimization of the enzymatic extraction technology of Diosgenin from Dioscorea nipponica.</a> Chinese Traditional Patent Medicine. 39 (03), 621-624 (2017).</li>
<li>Qi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dioscin+alleviates+lipopolysaccharide-induced+inflammatory+kidney+injury+via+the+microRNA+let-7i%2FTLR4%2FMyD88+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Dioscin alleviates lipopolysaccharide-induced inflammatory kidney injury via the microRNA let-7i/TLR4/MyD88 signaling pathway.</a> Pharmacological Research. 111, 509-522 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+pharmacological+activities+of+Dioscin%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the pharmacological activities of Dioscin.</a> BioMed Research International. 2019, 5763602(2019).</li>
<li>Nal Zou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4+signaling+pathway+in+the+protective+effect+of+Pioglitazone+on+experimental+immunoglobulin+A+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4 signaling pathway in the protective effect of Pioglitazone on experimental immunoglobulin A nephropathy.</a> Chinese Medical Journal. 130 (8), 906-913 (2017).</li>
<li>Xu, S. Y., Bian, R. L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+experiments+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Pharmacological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pharmacological experiments methodology.</a> Chinese Pharmacological Bulletin. 1, 19(1992).</li>
<li>Shen, J. C., Ren, Y., Rao, X. R., You, Y., Li, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Network+pharmacology%2C+molecular+docking%2C+and+in+vitro+experiments+to+explore+the+molecular+mechanism+of+Dioscorea+Nipponica+Makion+in+the+treatment+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Network pharmacology, molecular docking, and in vitro experiments to explore the molecular mechanism of Dioscorea Nipponica Makion in the treatment of IgA nephropathy.</a> World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 16 (12), 2246-2254 (2021).</li>
<li>Mestecky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA+nephropathy%3A+molecular+mechanisms+of+the+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">IgA nephropathy: molecular mechanisms of the disease.</a> Annual Review of Pathology. 8, 217-240 (2013).</li>
<li>Novak, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IgA1-containing+immune+complexes+in+IgA+nephropathy+differentially+affect+proliferation+of+mesangial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">IgA1-containing immune complexes in IgA nephropathy differentially affect proliferation of mesangial cells.</a> Kidney International. 67 (2), 504-513 (2005).</li>
<li>Nihei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+IgA+autoantibodies+targeting+mesangial+cells+redefines+the+pathogenesis+of+IgA+nephropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Identification of IgA autoantibodies targeting mesangial cells redefines the pathogenesis of IgA nephropathy.</a> Science Advances. 9 (12), (2023).</li>
<li>Raska, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+CMP-NeuAc%3A+GalNAc-IgA1+alpha2%2C6-sialyltransferase+in+IgA1-producing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of CMP-NeuAc: GalNAc-IgA1 alpha2,6-sialyltransferase in IgA1-producing cells.</a> Journal of Molecular Biology. 369 (1), 69-78 (2007).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anti-CD20/MS4A1 Anticuerpo</td><td>Boster Biotechnology Company</td><td>A03780-3</td><td></td></tr><tr><td>Medio de montaje antidecoloración</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>P0128S</td><td></td></tr><tr><td>Balb/c ratones</td><td>Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td><td></td><td>suero</td></tr><tr><td>de bloqueo</td> de 110322220101424000 <td>Solarbio, Pekín, China</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>Gammaglobulina bovina</td><td>ShangHai YuanYe Biotechnology Company</td><td>S12031</td><td></td></tr><tr><td>C1GALT1 anticuerpo policlonal</td><td>Proteintech Group, Inc, EE. UU.</td><td>27569-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Solución de recuperación de antígeno de citrato (50 veces)</td><td>Phygene Biotechnology Company</td><td>PH0422</td><td></td></tr><tr><td>COSMC anticuerpo policlonal</td><td>Proteintech Group, Inc,USA</td><td>19254-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Kit de detección de citotoxicidad</td><td>Roche Company 4744926001</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dako Sistema de detección REAL EnVision, Peroxidasa/DAB+</td><td>Dako</td><td>K5007</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>Dioscina</td><td>Instituto Nacional de Control de Alimentos y Medicamentos</td><td>111707-201703</td><td></td></tr><tr><td>tabletas DIO</td><td>Chengdu No 1 Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td></td><td></td>H51023866</tr><tr><td>solución de trabajo ECL</td><td>Merck Biotechnology, Inc</td><td>WBKLS0100&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Kit de recuento celular mejorado-8</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>C0043</td><td></td></tr><tr><td>Enmascaramiento Eliminación en un solo paso de la premezcla de síntesis de primera cadena de ADNc</td><td>de genes TIANGEN, Beijing, China</td><td>KR118-02</td><td></td></tr><tr><td>Kit de tinción de ácido peryódico de glucógeno Schiff (PAS)&nbsp;</td><td>Empresa de biotecnología BaSO</td><td>BA4080A</td><td></td></tr><tr><td>IgA-AF488 Anti-ratón</td> de <td>cabra SouthernBiotech</td><td>1040-30</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo IgG anti-conejo de cabra (H + L), HRP conjugado</td><td>BeiJing Bioss Biotechnology Company</td><td>BS-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ELISA Gd-IgA1 humano</td><td>IBL</td><td>27600</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ELISA de IgA humana</td><td>MultiSciences (LiankeBio)</td><td>70-EK174-96</td><td></td></tr><tr><td>Kit de ensayo de proteínas BCA Pierce</td><td>Thermo Scientific</td><td>23227</td><td></td></tr><tr><td>PMSF solution</td><td>Beyotime, Shanghái, China</td><td>ST507</td><td></td></tr><tr><td>Proteinasa K&nbsp;</td><td>Phygene Biotechnology Company</td><td>PH1521</td><td></td></tr><tr><td>Anticuerpo policlonal anti-CXCR5 para conejos&nbsp;</td><td>BeiJing Bioss Biotechnology Company</td><td>bs-23570R</td><td></td></tr><tr><td>Tampón de lisis RIPA</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>Kit de extracción de ARN total</td><td>simple TIANGEN, Beijing, China</td><td>DP419</td><td></td></tr><tr><td>RPMI Medium 1640</td><td>Solarbio, Beijing, China</td><td>31800</td><td></td></tr><tr><td>Super-Bradford kit de ensayo de proteínas</td><td>CWBIO, Beijing, China</td><td>CW0013</td><td></td></tr><tr><td>Tritón &nbsp; X-100</td><td>Beyotime, Shanghai, China</td><td>ST795</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Actina Conejo mAb</td><td>Abclonal, Wuhan, China</td><td>AC026</td><td></td></tr></tbody></table>

alivio de la nefropatía por iga mediada por dioscina mediante la inhibición de la activación de las células b in vivo y la disminución de la producción de iga1 deficiente en galactosa in vitro

Dioscin Mediated IgA Nephropathy Alleviation by Inhibiting B Cell Activation In Vivo and Decreasing Galactose-Deficient IgA1 Production In Vitro

Efecto de DIO sobre el tejido renal en un modelo de ratones IgAN
En comparación con el grupo control, el modelo de ratones IgAN inducido por el sistema inmunitario de la mucosa (grupo modelo) tuvo un aumento significativo de la proteinuria (Figura complementaria 2), la deposición de IgA fue visible en la región mesangial, la fluorescencia se distribuyó uniformemente en grupos a lo largo de toda la región mesangial (Figura 1A), la tinción con PAS del tejido renal mostró proliferación de células mesangiales e hiperplasia estromal (Figura 1B), que se redujo en el grupo de sonda nasogástrica DIO (grupo DIO).
Efecto de la DIO sobre los linfocitos B en el parche de Peyer
El parche de Peyer es el sitio principal de la conversión de linfocitos B en células secretoras de IgA. Tomamos el parche de Peyer como objeto de investigación para observar el efecto de DIO en los linfocitos B mediante la detección de la expresión de los marcadores de células B CD20 y CXCR5. Los resultados inmunohistoquímicos mostraron que la expresión de CD20 y CXCR5 fue significativamente mayor en el grupo modelo en comparación con el grupo control. DIO podría inhibir la expresión de los marcadores moleculares anteriores (Figura 2A,B).
El rango de concentración seguro de DIO en las células DAKIKI
La LDH es un marcador de la integridad de la membrana plasmática y un indicador de muerte celular, con tasas de liberación de LDH más altas que indican un daño celular más grave. Se utilizó el ensayo de liberación de LDH para determinar el rango de concentración segura de DIO. La concentración máxima segura de DIO se determinó mediante una tasa de liberación de LDH inferior al 10%. Los resultados (Figura 3) no mostraron citotoxicidad significativa inducida por DIO a concentraciones de 0,25 a 1,0 μg/mL. Por lo tanto, en el siguiente estudio se utilizó 0,25, 0,5 y 1,0 μg/mL de DIO como nivel de dosificación.
Efectos de la DIO en la proliferación de células DAKIKI
Los resultados experimentales (Figura 4) mostraron que, en comparación con el grupo modelo (grupo estimulado por LPS), DIO inhibió la proliferación de células DAKIKI inducida por LPS de manera dependiente de la concentración. Las concentraciones de DIO de 0,5 y 1,0 μg/mL inhibieron significativamente la proliferación de células DAKIKI inducida por LPS (P &lt; 0,01).
Efectos de la DIO sobre la función secretora de las células DAKIKI
Los niveles de Gd-IgA1 están estrechamente relacionados con el proceso patológico de la IgAN, y la IgA total se analiza conjuntamente como indicador de la función secretora celular. Se utilizó un ensayo ELISA para detectar el contenido de IgA y Gd-IgA1 en el sobrenadante del cultivo celular DAKIKI. Los resultados mostraron (Figura 5A,B) que las células DAKIKI estimuladas por LPS secretaron más IgA en comparación con el grupo control (P &lt; 0,01). En comparación, DIO inhibió significativamente la secreción de IgA por parte de las células DAKIKI (P &lt; 0,01) de una manera dependiente de la concentración. En comparación con el grupo control, las células DAKIKI estimuladas por LPS secretaron más Gd-IgA1 con una tendencia estadística (P &lt; 0,10), y DIO inhibió la secreción de Gd-IgA1 de las células DAKIKI estimuladas por LPS de manera dependiente de la concentración (P &lt; 0,05 y P &lt; 0,01), entre las cuales DIO a 1,0 μg/mL inhibió significativamente la secreción de Gd-IgA1 con una tasa de inhibición del 25%.
El mecanismo de DIO inhibe la secreción de Gd-IgA1 por parte de las células DAKIKI
Para investigar más a fondo el posible mecanismo de DIO que inhibe la secreción excesiva de Gd-IgA1 por parte de las células DAKIKI, se detectaron los niveles de C1GALT1 transferasa glicosilada y ARNm de la proteína chaperona Cosmc en las células DAKIKI mediante qRT-PCR, y los resultados mostraron (Figura 6A, B) que la expresión relativa del ARNm de C1GALT1 y Cosmc estaba regulada a la baja en las células DAKIKI en el grupo modelo en comparación con el grupo de control (P &lt; 0,01). DIO reguló al alza la expresión relativa de ARNm de C1GALT1 y Cosmc en diferentes grados en comparación con el grupo modelo, con DIO 1,0 μg /mL significativamente reguló al alza la expresión relativa de ARNm de C1GALT1 y Cosmc (P &lt; 0,05).
Al mismo tiempo, se utilizó el método WB para detectar el efecto de DIO sobre la expresión proteica de C1GALT1 y Cosmc en células DAKIKI. En comparación con el grupo control, la expresión proteica de C1GALT1 y Cosmc en las células DAKIKI del grupo modelo disminuyó obviamente (P &lt; 0,05). En comparación con el grupo modelo, la expresión proteica de C1GALT1 y Cosmc después de la intervención con DIO se reguló al alza. La expresión proteica de C1GALT1 y Cosmc fue significativamente regulada por DIO a una concentración de 1,0 μg/mL (P &lt; 0,05) (Figura 7A-C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig1.jpg"> Figura 1: Histopatología de los riñones. (A) Microscopio de inmunofluorescencia. Las secciones renales de los ratones de cada grupo se tiñeron con anti-IgA (verde) y DAPI (azul). La barra de escala de la imagen anterior = 200 μm. La siguiente barra de escala de imagen = 50 μm. n = 6 por grupo. (B) Imágenes representativas de la tinción de tejido renal con PAS de ratones en los grupos Control, Modelo y DIO. Barra de escala = 30 μm. La flecha hacia abajo muestra las células mesangiales y la flecha hacia arriba muestra el estroma. Barra de escala = 30 μm. n = 6 por grupo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig2.jpg"> Figura 2: Efecto de DIO sobre los marcadores de linfocitos B. (A) La expresión de CD20 en el parche de Peyer. Barra de escala = 200 μm. n = 6 por grupo. (B) La expresión de CXCR5 en el parche de Peyer. Las barras de escala se encuentran en la esquina inferior derecha de la imagen. Barra de escala = 200 μm. n = 6 por grupo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig3.jpg"> Figura 3. Cribado de la concentración segura de DIO en células DAKIKI. Los valores estadísticos se expresan como la media ± desviación estándar de tres experimentos independientes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig3large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig4.jpg"> Figura 4. Diferentes concentraciones de DIO afectan la proliferación de las células DAKIKI. Los datos se expresaron como media ±DE. En comparación con el grupo control, **P &lt; 0,01; en comparación con el grupo de modelos, #P &lt; 0,05' ##P &lt; 0,01; Los resultados de todos los experimentos se repitieron tres veces. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig4large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig5.jpg"> Figura 5. DIO inhibe la secreción de IgA y Gd-IgA1 por las células DAKIKI. (A) El método ELISA detectó la expresión de IgA en cada grupo. (B) El método ELISA detectó la expresión de Gd-IgA1 en cada grupo. Los datos se expresaron como media ± DE. En comparación con el grupo control, **P &lt; 0,01; en comparación con el grupo de modelos, #P &lt; 0,05, ##P &lt; 0,01; Todos los resultados experimentales se repitieron tres veces. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig5large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig6.jpg"> Figura 6. El mecanismo de DIO inhibe la secreción excesiva de Gd-IgA1 por parte de las células DAKIKI. (A) La QRT-PCR detectó la expresión de ARNm de C1GALT1. (B) QRT-PCR detectó la expresión de ARNm de Cosmc. Los datos se expresaron como media ± DE. En comparación con el grupo control, **P&lt;0,01; en comparación con el grupo de modelos, #P &lt; 0,05, ##P &lt; 0,01; Todos los resultados experimentales se repitieron tres veces. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig6large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65719/65719fig7.jpg"> Figura 7. El DIO afecta a la expresión proteica de C1GALT1 y Cosmc en las células DAKIKI. (A) WB verificó la regulación al alza de la expresión proteica de C1GALT1 y Cosmc por DIO. (B) El análisis semicuantitativo de la expresión de C1GALT1 se realizó utilizando la imagen J. (C) El análisis semicuantitativo de la expresión de Cosmc utilizando la imagen J. Los datos se expresaron como media ±DE. En comparación con el grupo control,*P &lt; 0,05; en comparación con el grupo modelo, #P &lt; 0.05, ##P &lt; 0.01, todos los resultados experimentales se repitieron tres veces. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/65719fig7large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Figura complementaria 1. El esquema para el modelo in vivo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_1.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta figura.</a>
Figura complementaria 2. Cambios en la proteinuria. Los datos se expresaron como media ± DE; n = 6 por grupo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65719/Supplementary_Figure_2.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta figura.</a>

Alivio de la nefropatía por IgA mediada por dioscina mediante la inhibición de la activación de las células B in vivo y la disminución de la producción de IgA1 deficiente en galactosa in vitro

The increase of circulating galactose-deficient IgA1 (Gd-IgA1) is caused by excessive activation of IgA-positive secretory cells in the process of mucosal ...

dioscin-mediated-iga-nephropathy-alleviation-inhibiting-b-cell

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Investigación

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Aquí, describimos un método de imagen confocal simple para visualizar la localización in situ de las células que secretan la citoquina Interferón gamma en órganos linfoides secundarios murinos. Este protocolo se puede extender para la visualización de otras citoquinas en diversos tejidos.

Imagen de la producción de interferón gamma in situ en el bazo de ratón después de la infección por Listeria monocytogenes

Este protocolo utiliza péptidos mixtos G6PI para construir modelos de artritis reumatoide que están más cerca de la artritis reumatoide humana en células CD4+ T y citoquinas. Células T asesinas naturales invariables de alta pureza (principalmente iNKT2) con fenotipos y funciones específicas se obtuvieron mediante inducción in vivo y purificación in vitro para inmunoterapia adoptiva.

Inmunoterapia adoptiva de células iNKT en ratones RA inducidos por glucosa-6-fosfato (G6PI)

Aquí presentamos un protocolo para el aumento in vivo de la inducción de células T reguladoras intestinales. En este protocolo, las células dendríticas están diseñadas para producir localmente altas concentraciones de la vitamina D activa (1,25-dihidroxivitamina D o 1,25[OH]2D) y la vitamina A activa (ácido retinoico o RA) de novo.

En Vivo Aumento de la Inducción de Células T Regulatorias Gut-Homing

Los microARN están implicados en la patogénesis de la nefropatía por IgA. Hemos desarrollado un método fiable para detectar los niveles de expresión de microARN en los riñones de un modelo de ratón con nefropatía IgA (ratones HIGA). Este nuevo método facilitará la comprobación de la participación de los miRNAs en la nefropatía por IgA.

Detección de la expresión de microARN en los riñones de ratones nefropáticos de inmunoglobulina A

La inflamación de la superficie ocular daña los tejidos de la superficie ocular y compromete las funciones vitales del ojo. El presente protocolo describe un método para inducir inflamación ocular y recolectar tejidos comprometidos en un modelo de ratón de disfunción de la glándula de Meibomio (MGD).

Inducción de la inflamación de la superficie ocular y recolección de tejidos afectados

Aquí proponemos métodos sencillos para probar y evaluar la presencia de especies reactivas del oxígeno en las células.

Producción y la detección de especies reactivas del oxígeno (ROS) en los cánceres

Se describe un protocolo general para el seguimiento de las células in vivo mediante resonancia magnética en un modelo de ratón con ex vivo las células marcadas. Un protocolo típico para el etiquetado de células, el procesamiento de adquisición de imágenes y la cuantificación se incluye.

In vivo MRI de 19F para el seguimiento de la célula

El intestino delgado se expone frecuentemente a las toxinas que pueden influir en el flujo sanguíneo y afectar negativamente a la absorción de nutrientes. El uso de una arteria multimyograph y mesentérica y la vena aislados, compuestos o toxinas de interés puede ser examinado para vasoactividad.

El aislamiento y uso de las Secciones de bovino mesentérica arteria y la vena como un bioensayo para la Prueba de Vasoactividad en el intestino delgado

Este manuscrito proporciona un protocolo para implantar telémetros en el ratón con el propósito de medir las presiones intrauterinas durante el embarazo.

Telemetría intrauterina para medir la presión del ratón contráctil<em&gt; En Vivo</em

La activación de la microglia y microgliosis son respuestas clave a la neurodegeneración crónica. A continuación, presentamos los métodos para in vivo, visualización a largo plazo de la retina células microgliales CX3CR1-GFP + por oftalmoscopía confocal y de umbral y los análisis morfométricos para identificar y cuantificar su activación. Hacemos un seguimiento de los cambios microgliales durante las primeras etapas del glaucoma relacionada con la edad.

En Vivo Dinámica de Retina Microglial Activación Durante Neurodegeneración: Confocal oftalmoscópico Imaging y Morfometría celular en el ratón Glaucoma

Descubre cómo la dioscina alivia la nefropatía por IgA inhibiendo células B y reduciendo la producción de IgA1 deficiente en galactosa. Este método experimental ofrece datos para el desarrollo de tratamientos con medicina natural.

Alivio de la nefropatía por IgA mediada por dioscina mediante la inhibición de la activación de las células B in vivo y la disminución de la producción de IgA1 deficiente en galactosa in vitro (Video) | JoVE Journal

Alivio de la nefropatía por IgA mediada por dioscina mediante la inhibición de la activación de las células B in vivo y la disminución de la producción de IgA1 deficiente en galactosa in vitro

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