Establecimiento y caracterización de organoides gástricos derivados de pacientes a partir de biopsias de cuerpo gástrico benigno y epitelio antral
January 26th, 2024
Los organoides gástricos derivados de pacientes encuentran un uso cada vez mayor en la investigación, sin embargo, faltan protocolos formales para generar organoides gástricos humanos a partir de digestión de una sola célula con densidad de siembra estandarizada. Este protocolo presenta un método detallado para crear organoides gástricos de forma fiable a partir de tejido de biopsia obtenido durante la endoscopia superior.
Nuestra investigación se centra en las causas hereditarias del cáncer gástrico. En particular, estamos interesados en el cáncer gástrico difuso hereditario debido a variantes causantes de enfermedades en el gen CDH1 o CTNNA1. También investigamos el papel de BRCA1 y BRCA2 en el riesgo de cáncer gástrico y la carcinogénesis.
Los organoides se utilizan cada vez más en una variedad de dominios de investigación y la gastroenterología no es una excepción, por lo que con esto surge la necesidad de estandarizar estas técnicas para generar estos organoides, en particular los organoides gástricos derivados de pacientes. Nuestro protocolo ofrece un método paso a paso para generar de forma fiable organoides gástricos derivados del paciente a partir de biopsias de las regiones antral y corporal del estómago. En particular, utilizamos un enfoque de digestión de una sola célula para permitir la siembra estandarizada de células en un esfuerzo por hacer comparaciones confiables entre organoides generados a partir de diferentes pacientes.
Nuestros hallazgos muestran que, en comparación con los organoides gástricos derivados de pacientes de la región del cuerpo del estómago, los de la región antral en realidad crecen más numerosos y de mayor tamaño en el transcurso de 20 días después de la siembra inicial. Estos hallazgos deben ser tenidos en cuenta por los investigadores que buscan utilizar organoides gástricos derivados de diferentes regiones del estómago.
Visión general
Esta investigación estudia las causas hereditarias del cáncer gástrico, centrándose en variantes en los genes CDH1 y CTNNA1. El estudio presenta un protocolo confiable para generar organoides gástricos derivados del paciente a partir de tejidos de biopsia obtenidos durante una endoscopia superior, demostrando diferencias en las tasas de crecimiento entre los organoides derivados de las regiones antral y corporal del estómago.
Componentes clave del estudio
Área de investigación
- Causas hereditarias del cáncer gástrico
- Generación de organoides gástricos
- Estandarización de técnicas biológicas
Antecedentes
- Cáncer gástrico difuso hereditario y variantes genéticas
- Uso de organoides en la investigación en gastroenterología
- Protocolos estandarizados para el desarrollo de organoides gástricos
Métodos utilizados
- Aislamiento de células individuales de biopsias de tejido gástrico
- Organoides gástricos derivados del paciente como modelo biológico
- Protocolos de digestión y siembra celular en cultivo
Resultados principales
- Los organoides de la biopsia del antro presentan un tamaño y tasas de crecimiento más grandes en comparación con los del tejido corporal
- Variaciones significativas en la morfología de los organoides entre diferentes pacientes
- Los métodos estandarizados permiten una comparación confiable del crecimiento de los organoides
Conclusiones
- El estudio establece un método confiable para generar organoides gástricos, ayudando a futuras investigaciones sobre el cáncer gástrico.
- Los hallazgos resaltan la importancia del origen del tejido en el crecimiento de los organoides, lo cual es crucial para la reproducibilidad experimental.
Preguntas frecuentes
Chapters in this video
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Introduction
1:20
Isolating Single Cells from Upper Endoscopy Biopsies Derived from Gastric Patients for Organoid Generation
3:36
Embedding Gastric Biopsy‐Derived Single Cells in a Basement Membrane Matrix Dome for Organoid Generation
5:37
Routine Passaging of Patient‐Derived Gastric Organoids Through Fragmentation
