Name: Un modelo de ratón de la partición hepática asociada y la ligadura de la vena porta para el procedimiento de hepatectomía por etapas con ayuda de microscopía (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 45 s
Description: Aprenda el procedimiento ALPPS en modelos murinos para estudiar la regeneración hepática. Este método permite investigar las vías moleculares y celulares que regulan la recuperación del hígado tras lesiones severas.

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<meta charset="utf8"></head><body>Estudio de la regeneración hepática de ALLPS en modelos animales para hepatectomía estadificada

<ol><li>Michalopoulos, G. K., Bhushan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+regeneration%3A+Biological+and+pathological+mechanisms+and+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Liver regeneration: Biological and pathological mechanisms and implications.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 18 (1), 40-55 (2021).</li>
<li>Chapelle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+the+future+remnant+liver+function+is+a+better+tool+to+pr+edict+post-hepatectomy+liver+failure+than+platelet-based+liver+scores%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Estimation of the future remnant liver function is a better tool to pr edict post-hepatectomy liver failure than platelet-based liver scores.</a> Eur J Surg Oncol. 43 (12), 2277-2284 (2017).</li>
<li>Isfordink, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+vein+ligation+versus+portal+vein+embolization+for+induction+of+hypertrophy+of+the+future+liver+remnant%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Portal vein ligation versus portal vein embolization for induction of hypertrophy of the future liver remnant: A systematic review and meta-analysis.</a> Surg Oncol. 26 (3), 257-267 (2017).</li>
<li>Linecker, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+adjustment+in+alpps+is+associated+with+a+dramatic+decrease+in+ear+ly+mortality+and+morbidity%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Risk adjustment in alpps is associated with a dramatic decrease in ear ly mortality and morbidity.</a> Ann Surg. 266 (5), 779-786 (2017).</li>
<li>Darnis, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subtotal+hepatectomy+in+swine+for+studying+small-for-size+syndrome+and+portal+inflow+modulation%3A+Is+it+reliable%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Subtotal hepatectomy in swine for studying small-for-size syndrome and portal inflow modulation: Is it reliable.</a> HPB (Oxford). 17 (10), 881-888 (2015).</li>
<li>Casellas, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inbred+mouse+strains+and+genetic+stability%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">Inbred mouse strains and genetic stability: A review.</a> Animal. 5 (1), 1-7 (2011).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+from+2012+to+2021%3A+A+bibliometric+analysis.+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Evolution of associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy from 2012 to 2021: A bibliometric analysis. Review.</a> Int J Surg. 103, 106648(2022).</li>
<li>Parola, M., Pinzani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+fibrosis%3A+Pathophysiology%2C+pathogenetic+targets+and+clinical+iss+ues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Aspects+Med%22%5BJournal%5D)">Liver fibrosis: Pathophysiology, pathogenetic targets and clinical iss ues.</a> Mol Aspects Med. 65, 37-55 (2019).</li>
<li>Kikuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+associating+liver+partition+and+portal+vein+occlusion+for+st+aged+hepatectomy+on+tumor+growth+in+a+mouse+model+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Impact of associating liver partition and portal vein occlusion for st aged hepatectomy on tumor growth in a mouse model of liver metastasis.</a> Eur J Surg Oncol. 44 (1), 130-138 (2018).</li>
<li>Schlegel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpps%3A+From+human+to+mice+highlighting+accelerated+and+novel+mechanism+s+of+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Alpps: From human to mice highlighting accelerated and novel mechanism s of liver regeneration.</a> Ann Surg. 260 (5), 839-846 (2014).</li>
<li>Dili, A., Lebrun, V., Bertrand, C., Leclercq, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepate+ctomy%3A+Establishment+of+an+animal+model+with+insufficient+liver+remnan+t%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Associating liver partition and portal vein ligation for staged hepate ctomy: Establishment of an animal model with insufficient liver remnan t.</a> Lab Invest. 99 (5), 698-707 (2019).</li>
<li>Schadde, E., Hertl, M., Breitenstein, S., Beck-Schimmer, B., Schläpfer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+the+associating+liver+partition+and+portal+vein+ligation+for+staged+hepatectomy+%28alpps%29+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rat model of the associating liver partition and portal vein ligation for staged hepatectomy (alpps) procedure.</a> J Vis Exp. (126), e55895(2017).</li>
<li>Allaire, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+frontiers+in+liver+resection+for+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22JHEP+Rep%22%5BJournal%5D)">New frontiers in liver resection for hepatocellular carcinoma.</a> JHEP Rep. 2 (4), 100134(2020).</li>
<li>Memi, F., Ntokou, A., Papangeli, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crispr%2Fcas9+gene-editing%3A+Research+technologies%2C+clinical+applications+and+ethical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Perinatol%22%5BJournal%5D)">Crispr/cas9 gene-editing: Research technologies, clinical applications and ethical considerations.</a> Semin Perinatol. 42 (8), 487-500 (2018).</li>
<li>Saviano, A., Henderson, N. C., Baumert, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+genomics+and+spatial+transcriptomics%3A+Discovery+of+novel+cell+states+and+cellular+interactions+in+liver+physiology+and+disease+biology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Single-cell genomics and spatial transcriptomics: Discovery of novel cell states and cellular interactions in liver physiology and disease biology.</a> J Hepatol. 73 (5), 1219-1230 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Inyección de glucosa al 5% (500 mL</td><td>)Shapuaisi pharma (http://www.zjspas.com/)</td><td>H20003666</td><td>Máquina de anestesia eficiente, barata, de fácil acceso</td></tr><tr><td></td><td>RWD (www.rwdls.com)</td> <td>R500</td><td>de bajo precio y calidad valiosa. Es adecuado para operaciones con principiantes</td></tr><tr><td>C57 BL/6</td><td>The Jackson Lab</td><td>22349-2023</td><td>Estabilidad de las cepas</td></tr><tr><td>isoflurano</td><td>KCSW (kcsw.szqisoubao.com)</td><td>H19980141</td><td></td></tr><tr><td>meloxicam</td> duradero y rentable <td>Boehringer-Ingelheim</td><td>H20020217</td> Las micropinzas <td>duraderas y eficientes</td></tr><tr><td></td><td>pueden ser</td><td>60018920</td><td>Duraderas y eficientes</td></tr><tr><td>microinstrumento</td><td>CH fábrica de instrumental microquirúrgico</td><td>HC-A804-1</td> duradero <td>y rentable</td></tr><tr><td>ringer de lactato de sodio</td><td>Shapuaisi pharma (http://www.zjspas.com/)</td><td>H20193277</td><td>Línea de sutura eficiente, barata y de fácil acceso</td></tr><tr><td>CH</td> fábrica de <td>instrumentos microquirúrgicos CH</td><td>6-0/8-0</td><td>alta relación rendimiento-precio</td></tr><tr><td>anticuerpos tópicos</td><td>farmacología de chenxina ( www.cisen-pharma.com)</td><td>H20020217</td><td>Evite eficazmente la infección de la incisión</td></tr></tbody></table>

un modelo de ratón de la partición hepática asociada y la ligadura de la vena porta para el procedimiento de hepatectomía por etapas con ayuda de microscopía

A Mouse Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy Procedure Aided by Microscopy

A diferencia de la PVL (pasos 2, 3, 4 y 5 del protocolo), los ratones que se sometieron a la intervención quirúrgica ALPPS (pasos 2, 3, 4, 5 y 6) demostraron una mayor proclividad a la proliferación celular. La figura 2 delinea la demarcación isquémica del lóbulo medio del hígado después de la ligadura de la vena porta, junto con el campo visual durante la transección hepática, que representa una distinción clave entre ALPPS y PVL. En particular, los niveles de mediadores inflamatorios, incluidos el factor de necrosis tumoral α (TNF-α), las interleucinas y el factor de crecimiento hepático (HGF), dentro del tejido hepático, superan a los observados en el grupo PVL. Esto se observa en la Figura 4C , donde el grupo de ALPPS tenía niveles más altos de IL-6 que el grupo de PVL, lo que sugiere que la inflamación puede estar involucrada en la regeneración rápida del hígado. Para corroborar aún más estos hallazgos, se ha realizado un análisis comparativo de la relación entre el peso hepático y corporal y los niveles de expresión de ki67, un marcador ampliamente reconocido de proliferación celular, dentro del tejido hepático, dos días después de la operación. Las figuras 4A, B y 5 muestran que el hígado en el grupo ALPPS muestra una mayor capacidad proliferativa.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig01.jpg"> Figura 1: Instrumentos quirúrgicos y consumibles. (A) 1: Antibióticos tópicos para incisiones; 2: 6-0, 8-0 Suturas quirúrgicas; 3: Esponjas de gelatina hemostáticas. (B) 1: Se emplean tijeras y 2: portaagujas para la incisión y sutura de la cavidad abdominal. (C) Los procedimientos microscópicos requieren el uso de 1: tijeras, 2: fórceps, 3, 4: pinzas de disección, 5: retractores abdominales. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig02.jpg"> Figura 2: Procedimiento quirúrgico hepático. (A) Ligadura y transección de la vena porta. La ligadura secuencial de 1, 2 y 3 se ejecuta meticulosamente, concomitantemente con la división meticulosa del parénquima hepático dentro del lóbulo medio. (B) La línea de demarcación del lóbulo medio se representa visualmente por la presencia de una línea discontinua blanca. (C) Después del examen microscópico, el hígado se disecciona meticulosamente a lo largo del límite isquémico delineado. Abreviaturas: RLL = lóbulo lateral derecho; Love My Life = lóbulo medio izquierdo; LLL = lóbulo lateral izquierdo; RML = lóbulo mediano derecho. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig03.jpg"> Figura 3: Ligadura de la vena porta. (A) La ligadura de la vena porta del lóbulo lateral derecho; el área discontinua corresponde a la RLL ligada. (B) La ligadura de la vena porta del lóbulo medio izquierdo y del lóbulo lateral izquierdo; El área de la línea discontinua representa la entrada para la ligadura de las ramas de la vena porta. (C) El área discontinua corresponde a la ligada love my life y LLL. (D) La ligadura de la vena porta del lóbulo caudado; La región discontinua delinea el lóbulo medio derecho fisiológicamente perfundido, mientras que las flechas demarcan la rama de la vena porta del lóbulo caudado, discretamente instalada dentro del parénquima hepático. Abreviaturas: RLL = lóbulo lateral derecho; Love My Life = lóbulo medio izquierdo; LLL = lóbulo lateral izquierdo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig04v2.jpg"> Figura 4: Comparación de los remanentes hepáticos futuros, la relación de crecimiento cinético, la tasa de supervivencia y la ALT plasmática durante la primera semana entre ALPPS y PVL. (A) Se evaluó la FLR en el grupo PVL y en el grupo PVL+T después de la cirugía. (B) El KGR se evaluó como la ganancia de la relación LMR/peso corporal por día. La KGR en el grupo de ALPPS aumentó rápidamente dentro de los 2 días posteriores a la cirugía, luego disminuyó gradualmente, pero aún era más alta que en el grupo de PVL. (C) IL-6 plasmática entre PVL y ALPPS. (D) Curva de supervivencia después de PVL y ALPPS. (E) AST de plasma entre PVL y ALPPS. Abreviaturas: FLR = futuros restos hepáticos; PVL = ligadura de la vena porta; PVL + T = ligadura de la vena porta + transección; KGR = razón de crecimiento cinético; LMR = izquierda ; ALPPS = asociación de partición hepática y ligadura de la vena porta para la hepatectomía por etapas; ALT = Alanina aminotransferasa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig04largev2.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig05.jpg"> Figura 5: Marcadores y morfología de la regeneración hepática tras ligadura de vena porta o transección combinada. (A) Se evaluó la morfología hepática en el grupo de cirugía simulada, grupo PVL y grupo PVL+T 2 días después de la cirugía. El área delineada significa los lóbulos hepáticos regenerados; barra de escala = 1 cm. (B) La tinción de fluorescencia reveló niveles heterogéneos de proliferación celular en distintas cohortes quirúrgicas del hígado; barra de escala = 100 μm, ***P &lt; 0,001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig05large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66098/66098fig06.jpg"> Figura 6: Imágenes de HE desde la vena porta hasta la vena central después de la ALPPS. (A) El hígado de la ALPPS HE tinción de 0 días a 2 días. (B) Tinción de HE de 3 días a 7 días. Barra de escala = 100 μm. Abreviaturas: HE = hematoxilina y eosina; ALPPS = asociación de partición hepática y ligadura de la vena porta para la hepatectomía por etapas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66098/66098fig06large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Un modelo de ratón de la partición hepática asociada y la ligadura de la vena porta para el procedimiento de hepatectomía por etapas con ayuda de microscopía

Hepatectomy is widely regarded as the primary treatment for hepatic malignancies; yet, postoperative liver failure remains a major cause of perioperative ...

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Hemos establecido un nuevo modelo murino de un sistema de peso que cuelga de la oclusión de la tríada portal. Esta técnica puede ser útil para futuras investigaciones en modelos de isquemia hepáticas de ratón.

El uso de un sistema de suspensión de peso para la isquemia del hígado en ratones

Este video describe un procedimiento de imagen para observar y estudiar la dinámica intravascular de un tejido hepático de ratón utilizando microscopía multifotónica después de la estabilización del órgano. La microscopía multifotónica permite obtener imágenes de tejido biológico in vivo con alta resolución espacial.

Visualización vascular basada en microscopía multifotónica: una técnica de imagen asistida por dispositivo de estabilización para obtener imágenes multidimensionales de vasos sanguíneos en hígado de ratón

Las herramientas utilizadas para visualizar la regeneración vascular requieren métodos para contrastar los árboles vasculares. Esta película demostró una delicada técnica de inyección utilizada para lograr un contraste óptimo de los árboles vasculares e ilustra los beneficios potenciales resultantes de un análisis detallado de la muestra resultante utilizando μCT y secciones histológicas seriadas.

La visualización del parénquima vascular y la regeneración después del 70% hepatectomía parcial en ratones normales

Inducir la hipertrofia hepática rápida utilizando partición de hígado asociar y ligadura de la vena porta para una hepatectomía Staged (ALPPS) se ha propuesto para la resección de tumores del hígado resecables borderline. Este modelo puede aclarar los mecanismos implicados en la hipertrofia rápida y permite realizar pruebas de drogas que promueven o bloquean la aceleración de la regeneración.

Modelo de la rata de la Asociación de partición hepática y ligadura de la vena porta para procedimiento efectuado hepatectomía (ALPPS)

Presentamos la ligadura del conducto biliar parcial como modelo quirúrgico de lesión hepática y regeneración en roedores.

Ligadura del conducto biliar parcial en el ratón: un modelo controlado de la colestasis obstructiva localizada

El presente protocolo optimiza los métodos de perfusión/descelularización in situ hepática y microscopía de dos fotones para establecer una plataforma confiable para visualizar la dinámica de la remodelación de la matriz extracelular (MEC) durante la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA).

Imágenes 3D de la matriz extracelular hepática en un modelo de ratón de esteatohepatitis no alcohólica

Aquí, presentamos un protocolo para crear xenoinjertos de carcinoma hepatocelular ortotópico con y sin ligadura de la arteria hepática y realizar imágenes no invasivas de tomografía por emisión de positrones (PET) de hipoxia tumoral utilizando [18 F] fluoromisonidazol ([18 F] FMISO) y [18 F] fluorodesoxiglucosa ([18F] FDG).

Imágenes PET/MR no invasivas en un modelo ortotópico de ratón de carcinoma hepatocelular

Establecimos un modelo de ratón de fibrosis hepática crónica, que proporciona un modelo animal adecuado para el estudio mecanicista de fibrosis hepática inducida por virus de la atresia biliar (BA) y una plataforma para futuros tratamientos de BA.

Un modelo de ratón de fibrosis hepática crónica para el estudio de la atresia biliar

En este protocolo, discutimos la implementación de un modelo de trasplante hepático ortotópico (OLT) exitoso en ratones. Además, también se discuten los adyuvantes para analizar más a fondo la permeabilidad del aloinjerto después de una OLT exitosa en un ratón, específicamente utilizando exploraciones de microtomografía computarizada (microCT).

Trasplante hepático ortotópico exitoso en ratones mediante angiografía por microtomografía computarizada

El modelo murino de hepatectomía parcial 2/3 (66%) está bien descrito en la literatura, pero rara vez se han utilizado hepatectomías más extendidas que imitan el síndrome de tamaño pequeño después del trasplante hepático. Describimos un procedimiento de hepatectomía extendida del 78% en un modelo de ratón que resulta en aproximadamente un 50% de letalidad postoperatoria en ratones sanos.

Hepatectomía extendida al 78% en un modelo quirúrgico de ratón

Este protocolo presenta una cadena de imagen completa para visualizar y modelar la morfología de las células estrelladas hepáticas en tejido hepático intacto. Este enfoque combina marcaje fluorescente de fibroblastos usando genética de ratón, preparación tisular in situ basada en perfusión hepática y un método modificado de limpieza de tejidos iDISCO para lograr transparencia óptica.

Mapeo de la morfología de las células estrelladas hepáticas en modelos murinos de fibrosis hepática

Aprenda el procedimiento ALPPS en modelos murinos para estudiar la regeneración hepática. Este método permite investigar las vías moleculares y celulares que regulan la recuperación del hígado tras lesiones severas.

Un modelo de ratón de la partición hepática asociada y la ligadura de la vena porta para el procedimiento de hepatectomía por etapas con ayuda de microscopía (Video) | JoVE Journal

Un modelo de ratón de la partición hepática asociada y la ligadura de la vena porta para el procedimiento de hepatectomía por etapas con ayuda de microscopía

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