Un método modificado para el cateterismo intratecal en ratas

El cateterismo intratecal se ha aplicado ampliamente en experimentos con animales, especialmente en aquellos sobre el dolor neuropático. Sin embargo, los métodos tradicionales todavía tienen varias limitaciones. Aunque algunos investigadores han intentado mejorar los métodos tradicionales, los métodos disponibles aún necesitan ser modificados.

En este trabajo, presentamos un método modificado para el cateterismo intratecal en ratas que representa un enfoque simple, conveniente y confiable para la administración repetitiva de fármacos por vía intratecal. Prepara un tubo de PE10 de 15 centímetros de largo. Inserte un alambre de acero inoxidable de 20 centímetros de largo con dos extremos pulidos en el tubo PE10 como soporte y marque el tubo a dos centímetros de un extremo.

Corta la punta afilada de una aguja de 22G y sella el extremo distal con un par de pinzas. Cortar un catéter epidural en fragmentos de un centímetro. A continuación, inserte estos fragmentos en la aguja 22G sharptipless y selle el extremo distal con un par de pinzas rectas calentadas.

A este aparato se le llamaba tapón de sellado del tubo. Prepare una banda antialérgica de 0,3 centímetros por 0,5 centímetros con unas tijeras. Preparar los instrumentos para el cateterismo intratecal, que se esterilizó antes de la cirugía.

Incluía pinzas dentadas, tijeras, un aparato de sonda nasogástrica, un mango de bisturí y hojas número 10. Esterilizar el tubo de PE10 y el alambre guía con etanol durante aproximadamente dos horas. Anestesiar ratas con isoflurano al 3% a un caudal de tres litros por minuto.

Coloque una rata en la mesa de operaciones y la pata trasera se corte con un par de pinzas. La ausencia de movimiento del polo trasero en respuesta a la estimulación confirmó el éxito de la anestesia. Se administró analgesia adecuada por inyección intramuscular de un miligramo por kilogramo de meloxicam antes del cateterismo intratecal.

Elimina el vello de la región de la columna lumbar de la espalda y de la zona entre dos orejas con una afeitadora. Coloque un tubo de centrífuga debajo del abdomen de la rata en la unión de la cintura-cadera. Esterilizar los sitios quirúrgicos con solución de povidoneyodo y solución de etanol tres veces.

Cubra la rata con un apósito aséptico y exponga los sitios quirúrgicos. Y luego lávese con solución salina normal antes de la cirugía. Determinar la localización del espacio intervertebral entre L5 y L6, ubicando la apófisis espinal de L6 en el punto medio entre las crestas ilíacas bilaterales izquierda y derecha.

Fije la piel con el pulgar izquierdo y el dedo índice del operador y luego haga una incisión de tres a cuatro centímetros de largo en la línea media justo por encima de la apófisis espinosa entre L4 y S1. Separe sin rojez los tejidos subcutáneos con unas tijeras. Localiza de nuevo el espacio intervertebral entre L5 y L6. Pinza y levanta la apófisis dorsal L5 con un par de pinzas dentadas para expandir el espacio intervertebral.

A continuación, separa sin rodeos los músculos que rodean el cuerpo vertebral con unas tijeras en la parte superior de la apófisis dorsal L6 quedó completamente expuesta. Cuando la apófisis dorsal L5 se levanta con un par de pinzas dentadas y el espacio intervertebral se expande con otro par de pinzas, limpie el espacio intervertebral L5 a seis con una bola de algodón hasta que el área de V invertida quede completamente expuesta. Perfore la columna vertebral con una aguja 23G en el área de la V invertida, justo debajo de la parte superior de la apófisis dorsal L6.

Inserte con cuidado el tubo PE10 que contiene alambre de acero inoxidable en un canal espinal en el sitio de punción que se inclina 30 grados hacia la cola. El ángulo de inserción se ajustó hasta que el tubo PE10 pudo insertarse con éxito sin ninguna resistencia. Cuando el área marcada del tubo de PE10 llega al músculo posterior, se detiene el cateterismo.

Retira lentamente el cable de acero inoxidable del tubo de PE10, luego conecta el tubo de PE10 a una jeringa, a través de la cual se inyectan 20 microlitros de solución salina normal. Después de retirar la jeringa, la solución salina puede haber fluido continuamente fuera del tubo de PE10, lo que indica que el tubo de PE10 se insertó con éxito en el espacio subaracnoideo. Una vez que se haya confirmado que el PE10 dos no está obstruido, suturar los músculos de un lado del cuerpo vertebral con una sutura de cuatro ceros y hacer un nudo.

A continuación, ata la sutura alrededor del tubo de PE10 y haz otro nudo. No corte la sutura y la sutura los músculos del otro lado. Vuelva a atar la sutura alrededor del tubo de PE10.

Haz un tercer nudo y corta la sutura. Haz una incisión de 0,5 centímetros de largo en un centímetro justo debajo del punto medio entre las orejas. Separe sin rojez los tejidos subcutáneos con unas tijeras.

E inserte el tubo de sonda nasogástrica de metal a través de la incisión hacia la cola. Hasta que la punta sea visible en la incisión lumbar. Inserte el extremo distal del tubo de PE10 en el tubo de sonda hasta que el tubo de PE10 salga por el otro extremo del tubo de sonda nasogástrica.

Luego retira suavemente la sonda nasogástrica. Cuando se confirme que el tubo de PE10 vuelve a estar libre de obstrucciones, sutura los músculos restantes alrededor de la incisión lumbar con una sutura de cuatro ceros. Ata la sutura alrededor del tubo de PE10 y haz otro nudo.

Vuelva a fijar el tubo PE10. Suturar la piel, evitando dañar el tubo de PE10, luego suturar la piel del cuello con una sutura de cuatro ceros. Ata la sutura alrededor del tubo de PE10 y haz un nudo para fijar el tubo de PE10.

Una vez que se confirme que el tubo de PE10 vuelve a estar sin obstrucciones, selle el extremo extracorpóreo del tubo de PE10 con una tapa de sellado. El tubo de PE10 se secó con un trozo de tejido y se ató una banda antialérgica alrededor del tubo de PE10 varias veces para evitar la retracción del tubo de PE10 durante el movimiento de la rata. Después de la cirugía, devuelva a la rata a su jaula y la vigile de cerca durante la recuperación de la anestesia hasta que recupere la conciencia.

Una vez que la rata esté completamente despierta, retire la tapa de sellado e inyecte 20 microlitros de lidocaína al 2% en el tubo de PE10 a razón de 0,2 microlitros por segundo a través de una jeringa Hamilton, seguida de la inyección de 10 microlitros de solución salina normal. Selle el tubo PE10 con una tapa de sellado. Coloque una rata sobre la mesa y observe con atención.

La parálisis de las extremidades inferiores después de la inyección intratecal de lidocaína, indica un cateterismo exitoso. La parálisis de las extremidades traseras suele durar aproximadamente 30 minutos. Vigile de cerca a la rata durante el período de recuperación hasta la recuperación completa de la función de las extremidades.

La paraplejia completa de ambas extremidades inferiores de las ratas después de la administración intratecal de lidocaína indicó un cateterismo exitoso. Comparación de la tasa de cateterismo exitoso entre nuestros métodos modificados y el método reportado anteriormente. La tasa de éxito del cateterismo intratecal para nuestro método modificado fue del 95%, superior al 88% alcanzado con el método reportado por Hou et al.

Comparación de la tasa de catéteres de larga estancia entre nuestro método modificado y el método previamente informado. La tasa de catéteres permanentes prolongados a los días dos, cinco y siete después del cateterismo intratecal fue del 94%, 81% y 65%, respectivamente, en un estudio de Storkson et al. La tasa de catéteres permanentes prolongados a los dos, cinco y siete días después del cateterismo intratecal fue del 95%, 90% y 85% respectivamente para nuestro método.

En conclusión, el método modificado para el cateterismo intratecal puede servir como una herramienta útil para la administración intratecal repetitiva y de fármacos y representa una forma sencilla, cómoda y fiable de acortar la duración de los experimentos.