Name: Un método modificado para el cateterismo intratecal en ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 15 s
Description: Aprenda un método modificado de cateterismo intratecal en ratas para administración repetitiva de fármacos en investigación del dolor neuropático. Esta técnica mejora la fiabilidad y tasa de éxito del procedimiento quirúrgico.

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<ol><li>Kong, G., Huang, Z., Zhu, Q., Wan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+two+modified+methods+of+intrathecal+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Anim%22%5BJournal%5D)">Comparison of two modified methods of intrathecal catheterization in rats.</a> Exp Anim. 69 (2), 219-223 (2020).</li>
<li>Xu, C. S., Sun, P., Lin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((a+new+design+puncture+needle+and+a+device+of+microcatheter+protection+for+lumbar+intrathecal+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Ying+Yong+Sheng+Li+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">a new design puncture needle and a device of microcatheter protection for lumbar intrathecal catheterization in rats.</a> Zhongguo Ying Yong Sheng Li Xue Za Zhi. 36 (3), 283-288 (2020).</li>
<li>Yamamoto, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurosteroid+dehydroepiandrosterone+sulphate+enhances+pain+transmission+in+rat+spinal+cord+dorsal+horn%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Anaesth%22%5BJournal%5D)">Neurosteroid dehydroepiandrosterone sulphate enhances pain transmission in rat spinal cord dorsal horn.</a> Br J Anaesth. 123 (2), e215-e225 (2019).</li>
<li>Mattioli, T. A., Sutak, M., Milne, B., Jhamandas, K., Cahill, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrathecal+catheterization+influences+tolerance+to+chronic+morphine+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Intrathecal catheterization influences tolerance to chronic morphine in rats.</a> Anesth Analg. 114 (3), 690-693 (2012).</li>
<li>Wang, B. C., Hillman, D. E., Li, D., Turndorf, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+subarachnoid+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Lumbar subarachnoid catheterization in rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 38 (3), 685-688 (1991).</li>
<li>Yaksh, T. L., Rudy, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+catheterization+of+the+spinal+subarachnoid+space%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic catheterization of the spinal subarachnoid space.</a> Physiol Behav. 17 (6), 1031-1036 (1976).</li>
<li>Martin, H., Kocher, L., Chery-Croze, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+lumbar+intrathecal+catheterization+in+the+rat+with+reduced-length+spinal+compression%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic lumbar intrathecal catheterization in the rat with reduced-length spinal compression.</a> Physiol Behav. 33 (1), 159-161 (1984).</li>
<li>Mazur, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+simple%2C+rapid%2C+and+robust+intrathecal+catheterization+method+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of a simple, rapid, and robust intrathecal catheterization method in the rat.</a> J Neurosci Methods. 280, 36-46 (2017).</li>
<li>Zhang, S. X., Huang, F., Gates, M., White, J., Holmberg, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extensive+scarring+induced+by+chronic+intrathecal+tubing+augmented+cord+tissue+damage+and+worsened+functional+recovery+after+rat+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Extensive scarring induced by chronic intrathecal tubing augmented cord tissue damage and worsened functional recovery after rat spinal cord injury.</a> J Neurosci Methods. 191 (2), 201-207 (2010).</li>
<li>Ohara, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+intrathecal+catheterization+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Long-term intrathecal catheterization in the rat.</a> J Neurosci Methods. 110 (1-2), 81-89 (2001).</li>
<li>StØrkson, R. V., KjØrsvik, A., TjØlsen, A., Hole, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+catheterization+of+the+spinal+subarachnoid+space+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Lumbar catheterization of the spinal subarachnoid space in the rat.</a> J Neurosci Methods. 65 (2), 167-172 (1996).</li>
<li>Poon, Y. Y., Chang, A. Y., Ko, S. F., Chan, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+procedure+for+catheterization+of+the+thoracic+spinal+subarachnoid+space+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">An improved procedure for catheterization of the thoracic spinal subarachnoid space in the rat.</a> Anesth Analg. 101 (1), table of contents 155-160 (2005).</li>
<li>Xu, F., Li, T., Zhang, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+protecting+and+fixing+the+lumbar+catheters+placed+in+the+spinal+subarachnoid+space+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved method for protecting and fixing the lumbar catheters placed in the spinal subarachnoid space of rats.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 114-118 (2009).</li>
<li>Igawa, Y., Andersson, K. E., Post, C., Uvelius, B., Mattiasson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+for+investigation+of+spinal+mechanisms+in+detrusor+instability+associated+with+infravesical+outflow+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Urol+Res%22%5BJournal%5D)">A rat model for investigation of spinal mechanisms in detrusor instability associated with infravesical outflow obstruction.</a> Urol Res. 21 (4), 239-244 (1993).</li>
<li>Hou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+procedure+for+lumbar+intrathecal+catheterization+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Res%22%5BJournal%5D)">A modified procedure for lumbar intrathecal catheterization in rats.</a> Neurol Res. 38 (8), 725-732 (2016).</li>
<li>Farhadi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+open+and+ultrasound-guided+placement+of+central+venous+catheter+in+children+weighing+less+than+five+kilograms%3B+a+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Acad+Radiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of open and ultrasound-guided placement of central venous catheter in children weighing less than five kilograms; a randomized clinical trial.</a> Acad Radiol. 30 (7), 1419-1425 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Jeringa de</td><td></td> 1 cc <td>Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd</td><td>1 cc</td></tr><tr><td>calibre 22 y veces; agujas de</td><td></td> 1" <td>Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd</td><td>22G</td></tr><tr><td>calibre 23 y veces; agujas de</td><td></td> 1" <td>Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd</td><td>23G</td></tr><tr><td>25 &mu; L Jeringas Hamilton</td><td></td><td>Shanghai Bolige Co., Ltd</td><td>0.31mm 25 &mu; L&nbsp;</td></tr><tr><td>4-O MERSILK SUTURA</td><td></td> NO ABSORBIBLE <td>ETHICON</td><td>SA83G</td></tr><tr><td>50 mL Tubos de centrífuga CORNING de 3 cm de diámetro</td><td>430820</td><td>CORNING</td> Catéter epidural y conector Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd aparato de sonda nasogástrica <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td>de tipo regular Shanghai Bolige Co., Ltd 8 # PE-10 Mirco Tubo médico BB31695-PE / 1 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Scientific Commodities, Inc</td><td></td></tr><tr><td>Mango de bisturí y hojas</td><td></td> # 10 <td>Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd</td> Tijeras de <td></td></tr><tr><td></td><td></td> 125 mm <td>Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd</td><td></td></tr><tr><td>Ratas Sprague-Dawley (SD)</td> de 100 mm <td>Shanghai BK / KY Biotechnology Co., Ltd</td><td>Macho</td>Alambre de acero inoxidable de 0,2 mm de diámetro Dongguan Jiazhi Tecnología de productos metálicos <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td> Co., Ltd.</td><td>0,2 mm&nbsp; y veces; &nbsp; </td></tr><tr><td>Pinzas</td><td></td> dentadas de 1 m <td>Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd</td><td>18 cm</td></tr><tr><td>URGO cinta</td><td></td> de <td>seda URGO</td><td>1,25 cm y veces; 9,1 m</td></tr></tbody></table>

un método modificado para el cateterismo intratecal en ratas

A Modified Method for Intrathecal Catheterization in Rats

Para la inyección intratecal, se cortó la punta extracorpórea del tubo de PE10 y el tubo de PE10 se selló con una tapa de sellado entre dos inyecciones de fármacos. En nuestro estudio piloto, la tasa de éxito del cateterismo intratecal fue de aproximadamente el 95% (19 de 20 ratas); El éxito se indicó mediante un movimiento de la cola y/o la liberación de un líquido transparente incoloro durante el procedimiento. Aproximadamente el 85 % de las trompas permanecieron en su lugar 7 días después de la cirugía, y aproximadamente el 80 % permanecieron en su lugar 28 días después de la cirugía. Las ratas se recuperaron poco después de la operación y no se observaron complicaciones dentro de los 7 días posteriores a la cirugía. El movimiento diario era normal y no se observó anormalidad conductual. Estos resultados indican que nuestro método es superior a los reportados previamente en cuanto a la tasa de éxito y la tasa de permanencia prolongada.
La parálisis completa de los miembros inferiores tras la inyección de lidocaína a través de catéteres indica un cateterismo intratecal exitoso15. La tasa de éxito del cateterismo intratecal se calcula dividiendo el número total de ratas por el número de ratas con cateterismo exitoso. Con nuestro método modificado, la tasa de éxito fue del 95%, superior a la tasa alcanzada con el método reportado por Hou et al. (88%)15. Esto se muestra en la Figura 4.
El tubo intratecal se monitorizó a los 2, 5 y 7 días después del cateterismo intratecal y se calculó la tasa de éxito del catéter permanente como el número de ratas con catéter permanente exitoso/número total de ratas × 100%. A los 2, 5 y 7 días después del cateterismo intratecal, la tasa de éxito del catéter permanente fue del 94%, 81% y 65%, respectivamente, en el estudio de Størkson et al.11. La tasa de éxito del catéter permanente a los 2, 5 y 7 días después del cateterismo intratecal fue del 95%, 90% y 85%, respectivamente, con nuestra técnica (Figura 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig1.jpg"> 
Figura 1. Materiales e instrumentos utilizados para el cateterismo intratecal. (A) Se preparó un tubo PE10 de 15 cm de largo, y el tubo se marcó a 2 cm de un extremo para indicar la profundidad de inserción. (B) Se insertó un alambre de acero inoxidable de 20 cm de largo con dos extremos pulidos en el tubo PE10 como soporte. (C) La punta afilada de la aguja 22G se cortó con un par de tijeras y el extremo distal se selló con un par de pinzas. (D) Se cortó un catéter epidural (1,0 mm de diámetro externo) en fragmentos de 1 cm, que luego se insertaron en la aguja 22G sin punta afilada. (E) El extremo distal del catéter epidural se selló con un par de pinzas rectas calentadas; A este aparato se le llamaba tapón de sellado del tubo. (F) Se preparó una banda antialérgica de 0,3 cm × 0,5 cm (cinta de seda, 1,25 cm × 9,1 m) con unas tijeras. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig1large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig2.jpg"> 
Figura 2. Preparación de instrumental para el cateterismo intratecal. Los instrumentos (como pinzas dentadas, tijeras, un aparato de sonda nasogástrica, un mango de bisturí y cuchillas #10) se esterilizaron con etanol durante aproximadamente 2 h y luego se lavaron con solución salina normal aproximadamente 30 min antes de la cirugía. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig3.jpg"> 
Figura 3. Resultados del experimento de validación de lidocaína tras el cateterismo intratecal. Después de la inyección intratecal de 20 μL de lidocaína al 2% seguida de la inyección de 10 μL de solución salina normal, la rata quedó temporalmente paralizada: la parálisis de las extremidades inferiores ocurrió dentro de los 30 s y desapareció 30 min después, lo que indica un cateterismo intratecal exitoso. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig3large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig4.jpg"> 
Figura 4. Comparación de la tasa de cateterismo exitoso entre nuestro método modificado y un método previamente reportado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig4large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66487/66487fig5.jpg"> 
Figura 5. Comparación de la tasa de catéteres de larga permanencia entre nuestro método modificado y un método previamente informado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66487/66487fig5large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>　</td>
			<td>Método modificado</td>
			<td>Método previo</td>
			<td>Ventajas del método modificado</td>
			<td>Desventajas del método anterior</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="4">Método de guía para la inserción</td>
			<td rowspan="4">un alambre de acero inoxidable</td>
			<td rowspan="4">Cánula guía (20G 0,9× 38 mm)</td>
			<td>Aumenta la elasticidad del tubo,</td>
			<td>La resistencia es difícil de sentir, lo que aumenta la dificultad de operación</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mejora la tasa de éxito del cateterismo intratecal</td>
			<td>Daño a los tejidos debido a punciones repetidas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reduce el requerimiento de espacio operativo</td>
			<td>Un extremo del tubo se estira a 1,5 veces la longitud original, lo que hace que el diámetro de ambos extremos sea diferente</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minimiza el daño a los tejidos que rodean la columna lumbar</td>
			<td>Susceptibilidad a la fuga de líquido cefalorraquídeo debido a que el diámetro de la cánula guía de 20G es 2 veces o más que el del tubo de PE10 estirado</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Longitud del tubo PE10</td>
			<td>15 cm</td>
			<td>14 o 28 cm</td>
			<td>Fácil de determinar la longitud del tubo de PE10 independientemente de la duración de la permanencia del catéter</td>
			<td>La duración de la permanencia del catéter es más corta para el tubo de PE10 más corto; susceptibilidad a caerse del cuerpo durante un tubo largo de PE10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Método de fijación</td>
			<td>Sutura "8" y 4 tiempos</td>
			<td>1 o 2 cuentas</td>
			<td>Evita el movimiento y retracción del tubo durante las actividades con los animales</td>
			<td>Diferencia en el diámetro del tubo en ambos extremos y susceptibilidad al desplazamiento del tubo de PE10 durante la fabricación del cordón </td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Método para el sellado de tubos</td>
			<td rowspan="2">Gorra de fabricación propia</td>
			<td rowspan="2">No</td>
			<td>Previene la fuga de líquido cefalorraquídeo </td>
			<td rowspan="2">Requisito de corte repetido del tubo PE10 </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evita el corte repetido del tubo PE10 </td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Método para la prevención de la retracción</td>
			<td>Banda antialérgica</td>
			<td>1 o 2 cuentas</td>
			<td>Evita que el tubo se retraiga durante las actividades de los animales </td>
			<td>Susceptibilidad a la retracción</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabla 1. Ventajas y desventajas del método modificado y de un método previamente informado.

Un método modificado para el cateterismo intratecal en ratas

Intrathecal catheterization has been widely applied in animal experiments, especially those on neuropathic pain. However, the traditional methods still ...

a-modified-method-for-intrathecal-catheterization-in-rats

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

El video muestra un método para generar un modelo de rata con desmielinización cortical cerebral generalizada. Esto implica la interrupción de la barrera hematoencefálica mediante la inyección de citoquinas proinflamatorias en ratones preparados con proteína de vaina de mielina recombinante. Este proceso facilita la infiltración de células inmunitarias, lo que da lugar a una desmielinización cortical cerebral generalizada.

Generación de la desmielinización cortical cerebral generalizada en un modelo de rata

Fuente: Chen, Y., et al. Administración intratecal de oligonucleótidos antisentido en el sistema nervioso central de ratas. J. Vis. Exp. (2019)Este video muestra la administración de un compuesto de prueba en el líquido cefalorraquídeo (LCR) a través de un catéter implantado en la columna lumbar de un modelo de rata. El compuesto circula a lo largo del LCR hasta el cerebro y la médula espinal, ingresa a las neuronas y ofrece potencial terapéutico.

Administración intratecal de un compuesto de prueba al sistema nervioso central de la rata

Se describe un método para dirigir fármacos al sistema nervioso central ya sea por la implantación de un catéter o la realización de una inyección en bolo en el ventrículo lateral derecho en ratones. Nos centramos específicamente en la entrega de los oligonucleótidos antisentido. Esta técnica es fácilmente adaptable a otras drogas y para ratas.

Entrega intraventricular directa de medicamentos al roedor Sistema Nervioso Central

Los accesos vasculares para medir la hemodinámica, proporcionar líquidos y realizar muestras de sangre son importantes para cualquier estudio de modelo animal pequeño. Presentamos una técnica de implante de catéteres en la arteria carótida y en la vena yugular común en una rata anestesiada para su conexión a un sistema de monitorización, infusiones y toma de muestras.

La cateterización de la arteria carótida y la vena yugular para realizar mediciones hemodinámicas, Infusiones y muestras de sangre en un modelo de rata Consciente

El protocolo presentado aquí permite la reproducción de una desmielinización generalizada de la materia gris de ambos hemisferios corticales en ratas agouti oscuras macho adultas. El método consiste en la implantación intracerebral de un catéter, la inmunización subclínica contra la glicoproteína de oligodendrocitos de mielina y la inyección intracerebral de una mezcla de citoquinas proinflamatorias a través del catéter implantado.

Modelo de rata de desmielinización cortical cerebral generalizada inducida por una inyección intracerebral de citoquinas proinflamatorias

Aquí, describimos un método para suministrar medicamentos al sistema nervioso central de la rata mediante la implantación de un catéter en el espacio intratecal lumbar de la columna vertebral. Nos centramos en la entrega de oligonucleótidos antisentido, aunque este método es adecuado para la entrega de otras modalidades terapéuticas también.

Entrega intratecal de oligonucleótidos antisentido en el sistema nervioso central de Rata

La hemorragia subaracnoidea sigue conllevando una alta carga de mortalidad y morbilidad en el hombre. Para facilitar la investigación adicional sobre la condición y su fisiopatología, se presenta un modelo pre-quiasmático de inyección única.

Inyección única prequiasmática de sangre autóloga para inducir hemorragia subaracnoidea experimental en un modelo de rata

Se describe un procedimiento quirúrgico para realizar inyecciones en la cisterna lumbar de la rata juvenil. Este enfoque se ha utilizado para la administración intratecal de vectores de terapia génica, pero se prevé que este enfoque se pueda utilizar para una variedad de terapias, incluidas las células y los fármacos.

Administración intratecal de vectores en ratas juveniles mediante inyección en cisterna lumbar

Una inyección intratecal lumbar representa una vía de administración traslacionalmente relevante para administrar terapia génica al sistema nervioso central. Este protocolo estandarizado integral para inyecciones intratecales lumbares en ratones y ratas neonatales, juveniles y adultos tiene como objetivo guiar a los investigadores en la adopción de esta técnica para estudios preclínicos de terapia génica.

Inyección intratecal lumbar de vectores de terapia génica para el sistema nervioso central dirigida en ratones y ratas

Este protocolo quirúrgico es una guía paso a paso para insertar un catéter intratecal en el espacio subdural espinal de un roedor para administrar un tratamiento dirigido.

Acceso al espacio subdural de la médula espinal del roedor para la administración del tratamiento

Aprenda un método modificado de cateterismo intratecal en ratas para administración repetitiva de fármacos en investigación del dolor neuropático. Esta técnica mejora la fiabilidad y tasa de éxito del procedimiento quirúrgico.

Un método modificado para el cateterismo intratecal en ratas

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