Análisis de Electrocardiogramas y Comportamiento en Ratones desde el Embarazo hasta el Periodo de Lactancia

Nuestra investigación se centra en los cambios fisiológicos en las madres desde el embarazo hasta la lactancia, y cómo afectan el comportamiento materno y el desarrollo de sus cachorros. Buscamos determinar cómo se adapta la fisiología de una madre para apoyar el crecimiento y desarrollo saludable de su descendencia. La implementación de territorios en ratones preñados permite un seguimiento continuo del ECG desde el embarazo hasta la lactancia, proporcionando una visión de la actividad automática durante un evento reproductivo. Este método da como resultado observaciones de comportamiento más naturales y registros simultáneos de ECG que ofrecen una comprensión clara de la fisiología materna cambiante.

Nuestra investigación ha mejorado los métodos quirúrgicos y los métodos de observación con ratones, lo que permite monitorear ratones durante mucho tiempo.

Nuestra investigación nos ayuda a comprender cómo la respuesta física de la madre durante el embarazo y la lactancia en términos de actividad automática. Nuestra investigación podría conducir a una mejor atención materna y apoyo para el desarrollo de las crías, y puede inspirar nuevos enfoques para estudiar la reproducción, no solo en animales, sino también en humanos.

En el futuro, planeamos investigar dónde las madres que han cometido infanticidio o negligencia en el entorno natural tienen diferencias en la actividad autonómica y el comportamiento materno desde el embarazo hasta la lactancia en comparación con las madres normales. Creemos que este protocolo también será útil para comprender los factores detrás de la negligencia y el infanticidio.

[Instructor] Para comenzar, coloque el mouse anestesiado en posición prona sobre el calentador del panel. Con unas tijeras, haga una incisión en la piel entre las orejas, luego inserte fórceps en la incisión para separar la piel y el músculo alrededor del cuello y el lado ventral, creando un espacio para la colocación del telémetro. Ahora inserte el telémetro a través de la incisión entre las orejas y colóquelo en el espacio creado en el lado ventral. Use fórceps para enrollar y agrupar los cables positivo y negativo del telémetro y coloque estos cables en el espacio del cuello. Para cerrar la incisión, use una aguja de 13 milímetros y una sutura de 20 centímetros. A continuación, coloque el ratón en posición supina. Con unas tijeras, haga una pequeña incisión alrededor de la piel de la clavícula y separe los músculos de la piel del cuello. Con fórceps, extraiga los cables positivo y negativo de la parte posterior del cuello. Luego, separe suavemente las glándulas salivales para exponer la apariencia en forma de V del músculo esternocleidomastoideo. Luego, ajuste la longitud del cable negativo para llegar al músculo esternocleidomastoideo cerca de la clavícula y retire con cuidado el tubo de plomo del cable negativo. Ahora pase la aguja de sutura con una sutura de 10 centímetros a través de la curva en forma de V del músculo esternocleidomastoideo para crear un bucle. Enrosque el electrodo de acero inoxidable del cable negativo a través de este bucle y colóquelo debajo del músculo cerca de la clavícula. Ate ligeramente el lazo para asegurar el electrodo de acero inoxidable sin dañar el músculo esternocleidomastoideo. Además, coloque una segunda sutura en el lado craneal del músculo y átela alrededor del tubo del cable negativo para asegurarlo. Luego, secciona alrededor de la apófisis xifoides y separa con cuidado la piel del músculo entre la apófisis xifoides y la clavícula. Luego extienda el cable positivo para llegar al proceso xifoides. Retire el tubo de plomo del cable positivo, asegurándose de que el electrodo de acero inoxidable enrollado en el interior se estire con pinzas finas. A continuación, use una aguja de calibre 18 para crear un túnel debajo del músculo alrededor del proceso xifoides. Luego coloque el electrodo de acero inoxidable en una aguja y páselo a través del músculo alrededor del proceso xifoides. Después de retirar la aguja, use una aguja de sutura con una sutura de 10 centímetros para suturar ligeramente el electrodo de acero inoxidable enrollado al músculo alrededor del proceso xifoides. Para asegurar aún más el cable positivo, coloque una segunda sutura en el lado craneal del proceso xifoides y átela alrededor del tubo del cable positivo. Con una aguja de sutura con una sutura de 20 centímetros, cierre todas las incisiones. Después de la implantación, coloque al ratón en una jaula limpia. Para comenzar, coloque el mouse con el telémetro en la jaula y coloque la jaula en la base en T que actúa como receptor para la telemetría del mouse. Encienda la computadora grabable y use la aplicación de software de análisis de datos instalada para recopilar datos de electrocardiograma del mouse. Luego, usando la aplicación de la historia clínica en la computadora grabable, registre el electrocardiograma. Para analizar los datos del electrocardiograma, inicie LabChart y abra el archivo de datos para el período de registro. Haga clic en el botón HRV y ajuste la configuración de detección de latidos en consecuencia para analizar la variabilidad de la frecuencia cardíaca. A continuación, haga clic en el botón HRV y seleccione la vista Clasificador de ritmos. Elija todos los tiempos en la vista Clasificador de tiempos y seleccione la vista Informe en el botón HRV. Copie los datos de la vista de informe y péguelos en Excel para su posterior análisis. El análisis del electrocardiograma mostró que la frecuencia cardíaca disminuyó gradualmente mientras que el intervalo de frecuencia respiratoria aumentó gradualmente de GD 17 a DP 21. El análisis de la VFC mostró que la relación de frecuencia baja a alta aumentó bruscamente de PD 0 a PD 21.