Name: Análisis de Electrocardiogramas y Comportamiento en Ratones desde el Embarazo hasta el Periodo de Lactancia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 40 s
Description: Aprende a registrar ECG y comportamiento materno en ratones desde el embarazo hasta la lactancia mediante telemetría continua. Este método permite estudiar la fisiología autónoma y su relación con el cuidado parental en condiciones naturales.

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<meta charset="utf8"></head><body>Cambios autonómicos maternos del embarazo a la crianza de cachorros

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<li>Khandoker, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+the+effect+of+cholinergic+and+adrenergic+blocking+agents+on+maternal-fetal+heart+rates+and+their+interactions+in+mice+fetuses%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Open%22%5BJournal%5D)">Investigating the effect of cholinergic and adrenergic blocking agents on maternal-fetal heart rates and their interactions in mice fetuses.</a> Biol Open. 11 (4), (2022).</li>
<li>Widatalla, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+maternal+and+fetal+heart+rate+increases+with+fetal+mouse+age+in+typical+development+and+is+disturbed+in+autism+mouse+model+treated+with+valproic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Correlation between maternal and fetal heart rate increases with fetal mouse age in typical development and is disturbed in autism mouse model treated with valproic acid.</a> Front Psychiatry. 13, 998695(2022).</li>
<li>Mezzacappa, E. S., Tu, A. Y., Myers, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactation+and+weaning+effects+on+physiological+and+behavioral+responses+to+stressors%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Lactation and weaning effects on physiological and behavioral responses to stressors.</a> Physiol Behav. 78 (1), 1-9 (2003).</li>
<li>Slangen, B. F., Out, I. C., Janssen, B. J., Peeters, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+pressure+and+heart+rate+variability+in+early+pregnancy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blood pressure and heart rate variability in early pregnancy in rats.</a> Am J Physiol. 273 (4), 1794-1799 (1997).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>temporizador de repetición de 24 horas</td><td>Panasonic</td><td>WH3311BP</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Sutura de nylon</td><td>Natsume Seisakusho</td> <td>Co-23s-N2</td><td></td></tr><tr><td>Caja de anestesia</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>KN-1010</td><td>W110&times; D110&veces; Máscara de anestesia H110mm</td></tr><tr><td></td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>KN-1019-1</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de anestesia</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>KN-1071-E</td><td></td></tr><tr><td>C57BL6 / J ratones</td><td>Clea Japan, Inc</td><td></td><td>Ratón de embarazo a los 14 días</td></tr><tr><td>Clip light</td><td>Yazawa Corporation</td><td>CLX60X02WH</td><td></td></tr><tr><td>Configurator System</td><td>Adinstuments</td><td>TR190</td><td></td></tr><tr><td>grabadora de accionamiento</td><td>Transcend</td><td>TS-DP250A-32G</td><td></td></tr><tr><td>Soporte para alimentos</td><td>Clea Japan, Inc</td><td>CL-2802</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>FujiFilM</td><td>099-06571</td><td></td></tr><tr><td>LabChart Pro V8</td><td>Adinstuments</td><td>MLU260/8</td><td></td></tr><tr><td>LabChart8</td><td>Adinstuments</td><td>MLS060/8</td><td></td></tr><tr><td>Mouse Biopotential Telemeter</td><td>Adinstuments</td><td>MT10B</td><td></td></tr><tr><td>Aguja 18 G 1 1/2</td><td>Terumo</td><td>NN-1838R</td><td></td></tr><tr><td>Calentador de panel</td><td>SANKO</td><td>4976285145407</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 4/26</td><td>Adinstuments</td><td>PL2604</td><td></td></tr><tr><td>Computadora grabable</td><td>Ratón mouse de computadora</td><td>K7-H</td><td></td></tr><tr><td>bombilla de luz roja</td><td>ELPA</td><td>LDG1R-G-GWP254</td><td></td></tr><tr><td>Máscara de goma</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>Tarjeta SD KN-1019-M</td><td></td></tr><tr><td>(256GB)</td><td>Transcend</td><td>TS256GUSD350V</td><td>Puede grabar aproximadamente 24 h</td></tr><tr><td>Aguja de sutura 13 mm</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>C-24-540-NO.0</td><td></td></tr><tr><td>Aguja de sutura 7 mm</td><td>Natsume Seisakusho Co</td><td>C-24-540-NO.0000</td><td></td></tr><tr><td>tBase</td><td>Adinstuments</td><td>MT110</td><td></td></tr></tbody></table>

análisis de electrocardiogramas y comportamiento en ratones desde el embarazo hasta el periodo de lactancia

Analysis of Electrocardiograms and Behavior in Mice from Pregnancy to Lactation Period

Después de implantar el telémetro en la rata preñada, registramos los electrocardiogramas desde el embarazo hasta la lactancia en una jaula casera. La frecuencia de muestreo se estableció en 1 k/s. Para comparar el ECG de cada estado fisiológico de la madre rata evitando la influencia del ritmo circadiano, se analizaron los datos de 10 min de 23:32 a 23:42 en GD 17, parto, PD 0 y PD 21 del archivo de datos de 2 h (Figura 3, Tabla 1). Se eligió el tiempo comprendido entre las 23:32 y las 23:42 por representar los 10 minutos previos al nacimiento de la primera cría durante el parto. Este período de tiempo específico se seleccionó para demostrar la factibilidad de realizar análisis de datos durante el parto cuando había contracciones musculares. Durante todas las fases de análisis, el ratón exhibió comportamientos generales (beber, cavar, alimentarse, asearse) y maternales (construcción de nidos, lamer/acicalarse), como se observó en 6 de los 16 etogramas enumerados en la Tabla 2.
Los electrocardiogramas de la madre se registraron sin interferencia en el GD17, cuando el feto estaba dentro del cuerpo (Figura 3A) y durante el parto, cuando ocurrieron cambios físicos como contracciones musculares (Figura 3B). Además, los electrocardiogramas se registraron de manera estable desde el nacimiento de la cría (PD 0) hasta la PD 21 (Figura 3C,D) a pesar de varios comportamientos de lactancia. El análisis de ECG mostró que la frecuencia cardíaca disminuyó gradualmente, mientras que el intervalo RR aumentó gradualmente desde GD 17 hasta PD 21 (Tabla 1). El análisis de la VFC mostró que la relación LF/HF aumentó bruscamente de PD 0 a PD 21 (Tabla 1).
Los etogramas de las conductas maternas y generales registrados junto con el ECG se subdividieron, como se muestra en la Tabla 2. También confirmamos que los ECG podían medirse sin alteraciones de la forma de onda cuando las madres mostraban cualquiera de los comportamientos definidos en la Tabla 2, como alimentarse (Figura 4A, C) y agacharse (Figura 4B, D).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig01.jpg"> 
Figura 1: Telemetría implantada en el día 14 de gestación en ratón. (A) Dos cables estaban conectados a un telémetro. El negro representa el plomo negativo y el blanco representa el plomo positivo. (B) Los cables negativo y positivo se agruparon y se colocaron en el cuello. El telémetro se colocó en el lado ventral. (C) Se retiró el cable del cuello y se expuso el SCM. (D) La telemetría se colocó en el lado ventral. El SCM está representado en rosa. La clavícula y la apófisis xifoides están representadas en gris. La línea negra indica el lead negativo. La línea naranja indica el plomo positivo. La línea azul representa la posición de sutura. (E) El cable negativo estaba conectado al SCM. El cable positivo estaba conectado alrededor del músculo xifoides. (F) Todas las incisiones (representadas por el círculo rojo) se cerraron con una sutura de 20 cm. (G) Configuración de captura de video usando una grabadora de unidad. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig02.jpg"> 
Figura 2: ECG registrado con el software de análisis de datos. (A) El ECG se registró durante 3 s. (B) ECG para cada latido del corazón. (C) Las líneas discontinuas rojas indican áreas donde no se registró el ECG. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig03.jpg"> 
Figura 3: ECG durante el embarazo, parto y lactancia. Los resultados del ECG del mismo ratón al mismo tiempo. (A) ECG en GD 17. (B) ECG durante el parto. (C) ECG en PD 0. (D) ECG en PD 21. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66498/66498fig04.jpg"> 
Figura 4: Registro de ECG durante la observación del comportamiento. Los ECG se registraron durante la construcción del etograma del mismo ratón en PD 6. (A) Imagen de la madre comiendo alimentos sólidos. (B) Imagen de la madre agachada sobre sus cachorros. (C) El electrocardiograma de la madre mientras ingiere alimentos. (D) El electrocardiograma de la madre mientras está agachada sobre sus crías. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/66498fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Tabla 1: Análisis de la variabilidad de la frecuencia cardíaca basado en el ECG desde el embarazo hasta la lactancia. El análisis de la variabilidad de la frecuencia cardíaca (VFC) se realizó a partir de los datos de ECG que se muestran en la Figura 3. Todos los análisis se mostraron para el mismo ratón y al mismo tiempo (23:32-23:42). RR promedio, el promedio de los intervalos de latido; Average Rate, la tasa promedio del ritmo; SDSD, la desviación estándar de la diferencia entre intervalos de batido sucesivos; RMSSD: raíz cuadrada media de las diferencias sucesivas del intervalo RR; pRR50, el porcentaje de diferencias de intervalo de tiempo mayores que una duración fija; Total, la potencia contenida en toda la gama de frecuencias; VLF, frecuencia muy baja; LF: baja frecuencia; HF, alta frecuencia; SD1; desviación estándar a lo largo del eje menor de la distribución de Poincaré; SD2, desviación estándar a lo largo del eje mayor de la distribución de Poincaré. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/Table_1_Heart_rate_variability_analysis_V2.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>
Tabla 2: Etogramas definidos. Todos los etogramas se definieron en función de parámetros como la postura, el tiempo empleado y el lugar que visitaron. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66498/Table%202%20Defined%20ethograms%20V2.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar esta tabla.</a>

Análisis de Electrocardiogramas y Comportamiento en Ratones desde el Embarazo hasta el Periodo de Lactancia

Changes in the mother-offspring relationship are presumably accompanied by dynamic changes in the autonomic nervous system. Although temporal measurements ...

analysis-electrocardiograms-behavior-mice-from-pregnancy-to-lactation

Research

Investigación

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Behavior

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