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DOI: 10.3791/66566-v
Yun Zhu Bai1, Yuriko Terada1, Katsutaka Mineura1, Yuhei Yokoyama1, Ruben G. Nava1, Alexander S. Krupnick2, Andrew E. Gelman1, Mark J. Miller3, Daniel Kreisel1, Wenjun Li1
1Division of Cardiothoracic Surgery,Washington University in St. Louis, 2Division of Thoracic Surgery,University of Maryland, 3Division of Infectious Diseases,Washington University in St. Louis
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aquí, presentamos un protocolo para obtener imágenes intravitales del pulmón izquierdo del ratón trasplantado utilizando microscopía de dos fotones. Esto representa una herramienta valiosa para estudiar la dinámica celular y las interacciones en tiempo real después del trasplante de pulmón murino.
El objetivo de nuestra investigación es comprender los mecanismos inmunes que subyacen a la isquemia, la lesión por reperfusión y las respuestas inflamatorias y tolerogénicas después del trasplante pulmonar. Queremos estudiar las interacciones dinámicas entre las células donantes y receptoras. Actualmente hacemos uso de varias técnicas quirúrgicas y de imagen en el estudio de la inmunología del trasplante pulmonar en ratón.
Estos incluyen trasplante y retrasplante ortotópico de pulmón izquierdo, pinzamiento del hilar pulmonar izquierdo, tomografía por emisión de positrones no invasiva e imágenes intravitales de dos fotones. Nuestra investigación revela respuestas inmunitarias únicas en los pulmones trasplantados. Utilizando técnicas de imagen avanzadas, descubrimos que los monocitos receptores promueven la infiltración de neutrófilos en aloinjertos pulmonares a través de IL-1 beta.
También encontramos que las células T reguladoras de FOXP3 se agrupan dentro de estos aloinjertos y protegen contra el rechazo mediado por anticuerpos. Nuestra técnica es fácil de configurar, con materiales que se encuentran fácilmente en un laboratorio de microscopía, como pegamento para tejidos y cubreobjetos. Además, proporciona un campo de visión más grande en comparación con otras técnicas.
Nuestro laboratorio está interesado en comprender los mecanismos que inducen y mantienen la tolerancia al aloinjerto pulmonar. Las imágenes intravitales nos permitirán visualizar las interacciones entre las células inmunitarias durante el rechazo y la tolerancia.
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