Aislamiento de microglía hipotalámica a partir de cerebro de ratón adulto recién perfundido mediante clasificación de células activadas magnéticamente

Describimos un protocolo para aislar células microgliales del hipotálamo del ratón (o pequeñas estructuras cerebrales equivalentes) utilizando la clasificación de células activadas magnéticamente (MACS), en un tiempo relativamente corto. La microglía hipotalámica clasificada por MACS se puede utilizar para análisis ex vivo y se puede sembrar para realizar ensayos in vitro .

Nuestro objetivo es explorar cómo la nutrición afecta la función cerebral con énfasis en la interacción entre la microglía y las neuronas. Y nos centramos específicamente en el hipotálamo, que es una estructura clave en el control del comportamiento alimentario y el equilibrio energético. La mayoría de los estudios utilizan ratones genéticos para dirigirse específicamente a los procesos microgliales y luego combinar este enfoque con observaciones histológicas o metabólicas, pero a nivel estructural completo, pero aún tendremos que lograr la resolución a nivel celular.

Aislar la microglía de las pequeñas estructuras cerebrales es muy desafiante, y nuestro protocolo garantiza un alto rendimiento y pureza de células valiosas, lo que luego permite el estudio del efecto de la dieta en el metabolismo y la función de la microglía. Nuestro protocolo nos permite lograr una pureza y un rendimiento relativamente altos en un corto período de tiempo, y con muchas células viables, incluso para estructuras pequeñas como el hipotálamo. Nuestra investigación explora el papel de la comunicación de las neuronas de la microglía en la resistencia o vulnerabilidad para desarrollar condiciones metabólicas, y sabemos que los individuos son extremadamente diversos en la forma en que responden a la dieta.

Y nuestros datos sugieren que la microglía podría desempeñar un papel en esta diversidad.