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DOI: 10.3791/66860-v
Gabriel S. Oliveira1,2, Clara M. Bento1,3,4, António Pombinho1,3, Rita Reis1,3, Kevin Van Calster5,6, Linda De Vooght5, André F. Maia1,3, Paul Cos5, Maria Salomé Gomes1,2, Tânia Silva1,2
1i3S – Instituto de Investigação e Inovação em Saúde da Universidade do Porto, 2ICBAS – Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto, 3IBMC - Instituto de Biologia Molecular e Celular, Universidade do Porto, 4Programa Doutoral em Biologia Molecular e Celular (MCBiology),Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar da Universidade do Porto, 5Laboratory for Microbiology,Parasitology and Hygiene (LMPH), 6Department of Infectious Diseases in Humans, Immune Response,Sciensano
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este estudio desarrolló un ensayo para el cribado de alto rendimiento contra Mycobacterium abscessus con una cepa doble reportera de reciente creación, utilizando fluorescencia y luminiscencia para evaluar rápidamente la viabilidad bacteriana. Este protocolo será relevante para los investigadores que buscan cribar nuevos fármacos contra esta bacteria resistente a los fármacos.
Mycobacterium abscessus es altamente resistente a los antibióticos, solo comparable a la tuberculosis multirresistente sin tratamiento aprobado. Nuestra investigación se centra en el desarrollo de un protocolo escalable de cribado de fármacos utilizando cepas dobles reporteras y tecnología I3S. Este enfoque tiene como objetivo mejorar la eficiencia de las pruebas, acelerar el descubrimiento de fármacos eficaces y menos tóxicos, y racionalizar los posibles tratamientos para Mycobacterium abscessus.
El desarrollo de fármacos para las infecciones por M. abscessus se basa en métodos tradicionales que requieren mucho tiempo, como las unidades de formación de colonias, que requieren mucha mano de obra, tienen un bajo rendimiento y son propensos al sesgo humano. Debido a la alta resistencia de la bacteria, se encuentran menos impactos. Por lo tanto, para encontrar nuevos tratamientos, es esencial el cribado de alto rendimiento de miles de compuestos.
Sin embargo, los métodos tradicionales hacen que esto sea poco práctico. Nuestro protocolo utiliza una cepa doble reportera de mycobacterium abscessus, desarrollada internamente, que emite luminiscencia y fluorescencia. Permite a los investigadores evaluar la eficacia terapéutica de un compuesto sin añadir reactivos ni pasos adicionales, lo que mejora la velocidad y la reproducibilidad.
Además, la plataforma de cribado de I3S Biosciences emplea la automatización robótica para ensayos de cribado de alto rendimiento, manejando 105 microplacas sin ninguna intervención humana, lo que aumenta la eficacia y reduce los errores. Este protocolo permite un cribado más rápido y reproducible de fármacos contra Mycobacterium abscessus, lo que ayuda a identificar nuevos resultados. Puede revelar objetivos bacterianos clave o grupos funcionales de compuestos, proporcionando información sobre los candidatos exitosos y no exitosos.
Este enfoque agiliza la línea de desarrollo de fármacos, guiando la investigación futura y acelerando la identificación de posibles impactos contra Mycobacterium abscessus.
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