Name: Cuantificación de leucocitos adherentes inducidos por diabetes en la vasculatura de la retina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: Aprende a cuantificar leucocitos adherentes en la vasculatura retiniana de ratones diabéticos mediante microscopía de fluorescencia. Esta técnica permite evaluar la leucostasis y la eficacia de terapias antiinflamatorias.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>Jeringa</td><td></td><td></td><td></td>de 10 mL</tr><tr><td>Llave de paso de 4 vías Luer lock Válvula de línea I.V.</td><td>Baxter</td><td>2C6204</td><td></td></tr><tr><td>Concanavalin A solución</td><td>Vector&nbsp;</td><td>FL-1001</td><td>Prepare en PBS 1 mg/mL</td></tr><tr>Juego <td></td><td></td><td>de herramientas de disección</td><td>Incluye hemostáticos, tijeras y pinzas</td></tr><tr><td>FIJI</td><td></td><td></td><td>Software para procesamiento de imágenes</td></tr><tr><td>Microscopio de fluorescencia</td><td>Nikon</td><td>Eclipse Ni</td><td></td></tr><tr><td>Forceps, Dumont #5, punta de grado biológico</td> Aguja de sonda <td>Electron Microscopy Sciences (EMS)</td><td>72700-D</td><td></td></tr><tr><td>1.25 mm OD punta de barril x 30 mm</td><td>Fine Science</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas para mosquitos Halstead</td> Fisher <td>Scientific</td><td>13-812-10</td><td></td></tr><tr><td>Juego de catéteres I.V. con abrazadera reguladora 70 pulgadas</td><td>Baxter</td><td>2C5417s</td> Poste I.V. Tejido <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>libre de pelusa</td><td></td><td></td><td>Kimpwipes es una opción</td></tr><tr><td>Tijeras de resorte de disección Micro, Vannas, 3 mm rectas</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5620</td><td></td></tr><tr><td>Micro espátula</td><td>Fine Science Tools (FST)</td><td>10091-12</td><td></td></tr><tr><td>Nikon</td><td></td><td>NIS-Elements (AR 5.30.03 64-bit)</td><td>Software para adquisición de imágenes</td></tr><tr><td>Placa de Petri (100 mmx15 mm)</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>Fosfato tamponado solución salina (PBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cera dental rosa</td><td>Ciencias de la microscopía electrónica ( EMS)</td><td>72670</td><td></td></tr><tr><td>Infusor de presión</td><td>Infusurge</td><td>4010</td><td></td></tr><tr><td>Hojas de afeitar, acero inoxidable GEM de un solo filo, recubierto de teflón</td><td>Ciencias de la microscopía electrónica (EMS)</td><td>71970</td><td></td></tr><tr><td>Solución salina 0,9%, grado veterinario, 1000 mL</td><td>Baxter</td><td>04925-04-10</td><td></td></tr><tr><td>Tijeras de disección pequeñas, extremo romo curvo 22 mm</td><td>ROBOZ</td><td>RS 5983</td><td></td></tr></tbody></table>

cuantificación de leucocitos adherentes inducidos por diabetes en la vasculatura de la retina

Quantification of Diabetes-induced Adherent Leukocytes in Retinal Vasculature

Un protocolo de perfusión y tinción bien ejecutado mostrará la vasculatura retiniana completa delineada con concanavalina A (Figura 1). Una mala perfusión del ratón impide el marcaje de todo el árbol vascular y el posterior análisis de los leucocitos adheridos a la luz (Figura 2), mientras que la presión excesiva de un apretón rápido de una jeringa (menos de 30-35 s) puede provocar permeabilidad vascular y rotura de los vasos sanguíneos (Fig...

Cuantificación de leucocitos adherentes inducidos por diabetes en la vasculatura de la retina

Leukostasis refers to the attachment of leukocytes to the luminal wall of the vasculature. This interaction of leukocytes with the wall of blood vessels ...

quantification-diabetes-induced-adherent-leukocytes-retinal

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Investigación

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Medicine

Medicina

Fuente: Lani-Louzada, R., et al. Cauterización de círculo completo del plexo vascular limbal para el glaucoma inducido quirúrgicamente en roedores. J. Vis. Exp. (2022). Este video demuestra la cuantificación de células ganglionares de la retina de retinas de rata fijadas químicamente y sometidas a la cauterización de círculo completo del plexo vascular limbal. El proceso incluye permeabilización, tinción de anticuerpos y contratinción nuclear, seguida de la visualización bajo un microscopio de...

Cuantificación de los somas de células ganglionares de la retina después de la hipertensión ocular inducida por cauterización 

La microscopía intravital se puede utilizar en animales para visualizar y medir los diámetros vasculares de la retina, las velocidades del torrente sanguíneo y el flujo sanguíneo total de la retina.

Mediciones de videomicroscopía intravital del flujo sanguíneo de la retina en ratones

Presentamos un método in vitro que permite cuantificar el número real de células adhesivas dentro de una monocapa de células endoteliales.

La cuantificación de la adhesividad de la célula endotelial<em&gt; In Vitro</em

La retina comparte similitudes importantes con el cerebro y por lo tanto representa una ventana única para el estudio de vasculatura y estructura neuronal en el cerebro no invasiva. Este protocolo describe un método para estudiar la demencia con técnicas de imagen retinianas. Este método puede potencialmente ayudar en la evaluación diagnóstico y riesgo de demencia.

Usando proyección de imagen retiniana para el estudio de la demencia

Aquí, discutimos un protocolo de método que permita un fácil análisis de la vasculatura retiniana del pez cebra adulto tg(fli:EGFP) como una lectura rápida en entornos de patologías vasculares a largo plazo vinculados a la neoangiogénesis y cambios estructurales.

Estudiar la Diabetes a través de los ojos de un pez: Microdissection, visualización y análisis de la vasculatura de retina de pez cebra de adulto tg(fli:EGFP)

Demostrar técnicas de preparación de tres tejidos diferentes para la visualización de immunohistochemical del pericitos microvasculares retina de rata, es decir, cryo-secciones, todo-montajes e hipotónica aislamiento de la red vascular.

Retinales crio-secciones, montajes de todo y vasculatura aislado hipotónica preparados para la visualización de Immunohistochemical del pericitos microvasculares

Este estudio tiene como objetivo desarrollar un nuevo modelo de cultivo de retina organotípico humano (HORC) que evite comprometer la integridad de la retina durante el manejo del explante. Esto se logra cultivando la retina con el vítreo resbanante y el epitelio-coroides pigmentario retiniano subyacente (RPE-coroides) y esclerótica.

Caracterización de una nueva técnica de cultivo de retina organotípica humana

La retinopatía diabética es una de las principales causas de ceguera. La histología, el ensayo de ruptura de la barrera hematoencefaliana y la angiografía por fluorescencia son técnicas valiosas para comprender la fisiopatología de la retina, lo que podría mejorar aún más la detección eficaz de medicamentos contra la retinopatía diabética.

Evaluación fisiopatológica de la retina en un modelo de rata

Este artículo describe un ensayo de tinción de lectina bien establecido y reproducible para las preparaciones retinianas de montaje completo y los protocolos necesarios para la medición cuantitativa de los parámetros vasculares frecuentemente alterados en las retinopatías proliferativas y no proliferativas.

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El modelo de herida diabética inducida por estreptozotocina en ratas SD macho es actualmente el modelo más utilizado para estudiar la cicatrización de heridas en la diabetes mellitus tipo I. Este protocolo describe los métodos utilizados para construir este modelo. También presenta y aborda posibles desafíos y examina la progresión y las características angiogénicas de las heridas diabéticas.

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Se desarrolló un ensayo de protección para monitorizar la resistencia de la vasculatura de la retina a la muerte por lesiones relacionadas con la diabetes/retinopatía diabética, como el estrés oxidativo y las citocinas.

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Aprende a cuantificar leucocitos adherentes en la vasculatura retiniana de ratones diabéticos mediante microscopía de fluorescencia. Esta técnica permite evaluar la leucostasis y la eficacia de terapias antiinflamatorias.

Cuantificación de leucocitos adherentes inducidos por diabetes en la vasculatura de la retina

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