Método de muestreo de sangre a través de la pared para minimizar la interrupción del sueño en entornos clínicos

Estudiamos cómo el sueño y los ritmos circadianos perjudican la salud cardiometabólica. En definitiva, nos gustaría encontrar estrategias para reducir el resto de enfermedades asociadas al sueño y a la alteración circadiana. Para estudiar las cosas que cambian en el cuerpo durante 24 horas, necesitamos tener una ventana al sistema durante todo el período.

Esto puede ser difícil porque no queremos perturbar el sueño en los ritmos circadianos al entrar en la habitación de un participante mientras duerme para obtener una muestra de sangre. Para evitar eso, usamos un protocolo de muestreo de sangre a través de la pared. Abordamos la brecha usando una vía intravenosa larga que colocamos a través de la pared desde la cual podemos tomar muestras de sangre desde fuera de la habitación del participante.

Esto nos permite tomar muestras de sangre con una interrupción mínima del sueño y los ritmos circadianos. Nuestros hallazgos permitirán a los investigadores acceder a marcadores de salud metabólica como la glucosa y la insulina durante 24 horas sin perturbar el sueño, lo que puede ayudar a aclarar la influencia del sueño y los ritmos circadianos en el riesgo de enfermedad. Para comenzar, conecte la línea de extensión para el muestreo a través de la pared conectando el tope de tres vías al extremo de bloqueo del señuelo hembra de la línea de extensión.

Después de romper los sellos, coloque la jeringa de descarga salina de 10 mililitros y la jeringa de muestra de tres mililitros en la llave de paso. Gire la lengüeta de la llave de paso para cerrar la línea de extensión a la jeringa de tres mililitros y ábrala para la descarga de solución salina de 10 mililitros. Empuje la solución salina a través de la línea de extensión hasta que llegue al final.

Retire con cuidado la tapa y deje que la solución salina gotee en una taza o en la almohadilla absorbente. Gire la lengüeta de salida para cerrar la línea de extensión a ambas jeringas, manteniéndolas unidas a la llave de paso. Pase el extremo tapado de la línea de extensión a través del puerto de pared hacia la sala del participante, asegurándose de que la tapa permanezca en su lugar para mantener la esterilidad.

En la habitación del participante, limpie el extremo distal de la línea de extensión y el lado de fijación del juego de extensión intravenosa. Con una almohadilla de preparación con alcohol estéril, retire la tapa de la línea de extensión y conéctela al juego de extensión intravenosa conectado al participante. Ahora regresa a la anticámara.

Retire y deseche el enjuague salino usado de la llave de paso y coloque un enjuague salino caliente de 10 mililitros. Gire la lengüeta de apagado para cerrar la línea a la jeringa de muestra y ábrala para el nuevo enjuague con solución salina. Empuje la solución salina a través de la línea de extensión para verificar la ausencia de fugas y confirmar que la línea intravenosa sigue siendo patente.

Continúe empujando lentamente el enjuague de solución salina mientras gira simultáneamente la lengüeta de apagado para sellar completamente el sistema. Una vez que se confirme que la línea de extensión está funcionando, regrese a la habitación del participante para envolver el juego de extensión intravenosa con un vendaje elástico autoadherente para evitar que se desprenda durante el sueño. Pegue la línea de extensión de forma segura al marco de la cama.

Conecte una jeringa de desecho de cinco mililitros asegurándose de que la línea de extensión esté preparada con solución salina y conecte una jeringa de muestra de tres mililitros a la llave de paso. Gire la lengüeta para abrir la línea a la jeringa de desecho de cinco mililitros. Con la jeringa de cinco mililitros, recolecte al menos 4,4 mililitros de desechos.

Luego continúe extrayendo hasta que aparezca sangre completa. Ahora gire la lengüeta de salida del tope para cerrar la línea a la jeringa de desecho de cinco mililitros. Use la jeringa de tres mililitros para extraer la cantidad deseada de sangre y gire la lengüeta para cerrar la línea de extensión de ambas jeringas.

Retire la jeringa de desecho de cinco mililitros y reemplácela con una descarga salina tibia de 10 mililitros. Gire la lengüeta para cerrar la línea a la jeringa de muestra de tres mililitros. Abriéndolo al enjuague salino.

Empuje hasta 10 mililitros de solución salina tibia en la línea de extensión, asegurándose de que no quede sangre en la línea. Retire la jeringa de muestra llena de sangre para su posterior procesamiento y reemplácela con una jeringa vacía de tres mililitros. Gire la lengüeta de apagado para cerrar la línea de ambas jeringas.

Continúe empujando lentamente la solución salina mientras gira la lengüeta de apagado para mantener la presión en la línea de extensión y minimizar el flujo sanguíneo de regreso. Use la solución salina restante para enjuagar a través de la llave de paso en la jeringa vacía de tres mililitros. Luego retire la jeringa de solución salina y tire hacia atrás de la jeringa de tres mililitros para extraer cualquier líquido restante de la llave de paso.

Reemplace todas las jeringas para prepararse para la próxima extracción de sangre. El perfil de concentración de melatonina plasmática de 24 horas de un participante se midió en condiciones de poca luz. Los hallazgos sugieren que los niveles de melatonina siguen un patrón distinto de aumento y caída consistente con un ritmo circadiano normal, lo que confirma que el método de muestreo de sangre a través de la pared captura con precisión los cambios hormonales durante la noche biológica.

En un estudio reciente, la tasa de éxito para el muestreo de sangre a través de la pared fue del 67%, correspondiente a 304 de los 454 intentos totales de extracción de sangre, las extracciones de sangre fallidas representaron el 33% de los intentos y el 94% de estos fracasos se atribuyeron a problemas de posición, como que el participante se acostara u ocluyera la línea de extensión. Durante una extracción de sangre fácil, los registros de polisomnografía mostraron señales estables de electroencefalograma, electrograma, electromiograma y electrocardiograma sin evidencia de excitación o cambio de etapa del sueño. Una extracción de sangre difícil se asoció con una interrupción de la actividad del electroencefalograma, el electrograma y el electromiograma junto con una frecuencia cardíaca elevada indicativa de excitación.