Name: Cribado in vitro basado en LED para la evaluación de moléculas fotoactivables en la inactivación fotodinámica bacteriana (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: Aprende a evaluar fotosensibilizantes para inactivación fotodinámica bacteriana usando placas de 96 pocillos y paneles LED con Staphylococcus aureus. Este método económico permite el cribado de alta capacidad de compuestos flavylium.

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<ol><li>Correia, J. H., Rodrigues, J. A., Pimenta, S., Dong, T., Yang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+review%3A+principles%2C+photosensitizers%2C+applications%2C+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy review: principles, photosensitizers, applications, and future directions.</a> Pharmaceutics. 13 (9), 1332(2021).</li>
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<li>Rapacka-Zdończyk, A., Woźniak, A., Podbielska, H., Kasprzycka, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+determining+the+susceptibility+of+bacteria+to+antibacterial+photodynamic+inactivation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med%22%5BJournal%5D)">Factors determining the susceptibility of bacteria to antibacterial photodynamic inactivation.</a> Front Med. 8, 733501(2021).</li>
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<li>Babilas, P., Karrer, S., Szeimies, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+in+dermatology%3A+state-of-the-art%5BTitle%5D)+AND+%22Photodermatol+Photoimmunol+Photomed%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy in dermatology: state-of-the-art.</a> Photodermatol Photoimmunol Photomed. 26 (3), 118-132 (2010).</li>
<li>Pérez-Laguna, V., Pérez-Artiaga, L., Gilaberte, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+combined+with+antibiotics+or+antifungals+against+microorganisms+that+cause+skin+and+soft+tissue+infections%3A+a+planktonic+and+biofilm+approach+to+overcome+resistances%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy combined with antibiotics or antifungals against microorganisms that cause skin and soft tissue infections: a planktonic and biofilm approach to overcome resistances.</a> Pharmaceutics. 14 (6), 1-16 (2021).</li>
<li>Almenara-Blasco, M., López-Roca, A., Pérez-Sanchez, A., Valiente, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+photodynamic+therapy+for+dermatological+infections%3A+current+insights+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Photobiol%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial photodynamic therapy for dermatological infections: current insights and future prospects.</a> Front Photobiol. 2, 773502(2024).</li>
<li>de Oliveira, A. B., Reis, C., Soares, M. T., Batista, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+therapy+for+treating+infected+skin+wounds%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis+from+randomized+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Photodiagnosis+Photodyn+Ther%22%5BJournal%5D)">Photodynamic therapy for treating infected skin wounds: a systematic review and meta-analysis from randomized clinical trials.</a> Photodiagnosis Photodyn Ther. 40 (5), 103-118 (2022).</li>
<li>Correia, P., Oliveira, S. R., Batista, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-activated+amino-substituted+dyes+as+dual-action+antibacterial+agents%3A+bio-efficacy+and+AFM+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Dyes+Pigm%22%5BJournal%5D)">Light-activated amino-substituted dyes as dual-action antibacterial agents: bio-efficacy and AFM evaluation.</a> Dyes Pigm. 224, 111975(2024).</li>
<li>Oliveira, H., Santos, A. R., Costa, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoactivated+cell-killing+amino-based+flavylium+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Photoactivated cell-killing amino-based flavylium compounds.</a> Sci Rep. 11 (1), 22005(2021).</li>
<li>Sharma, S., Singh, V., Kaur, S., Mehta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbial+biofilm%3A+A+review+on+formation%2C+infection%2C+antibiotic+resistance%2C+control+measures%2C+and+innovative+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Microbial biofilm: A review on formation, infection, antibiotic resistance, control measures, and innovative treatment.</a> Microorganisms. 11 (6), 1614(2023).</li>
<li>Barolet, D., Christiaens, F., Misery, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-emitting+diodes+%28LEDs%29+in+dermatology%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cutan+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Light-emitting diodes (LEDs) in dermatology.</a> Semin Cutan Med Surg. 27 (3), 227-238 (2009).</li>
<li>Algorri, J. F., López-Higuera, J. M., Rodríguez-Cobo, L., Cobo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+light+source+technologies+for+photodynamic+therapy+of+skin+cancer+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Advanced light source technologies for photodynamic therapy of skin cancer lesions.</a> Pharmaceutics. 15 (7), 2075(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Espectrofotómetro Cary 60 UV-Vis</td><td>Agilent</td><td>G6860A</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl Sulfóxido</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Cubetas desechables PMMA</td><td>BRAND GMBH + CO KG</td><td>759030</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorfs (500 mL)</td><td>Fisher Scientific</td><td>15625367</td><td></td></tr><tr><td>Tubos Falcon (15 mL)</td><td>Tubos Corning</td><td>430791</td><td></td></tr><tr><td>Falcon ( 50 mL)</td><td>Panel LED Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>IP65 50W</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (100 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705874</td><td></td></tr><tr><td>Micropippete (1000 uL)</td><td>Transferpette S</td><td>705880</td><td></td></tr><tr><td>Mueller Hinton agar&nbsp;</td><td>Oxoid</td><td>CM0405</td><td></td></tr><tr><td>Pippete multicanal de 12 canales</td><td>Transferpette S</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nunc MicroWell Microplacas de 96 pocillos</td><td>Thermo Scientific</td><td>260844</td><td></td></tr><tr><td>Phospate Comprimidos de solución salina tamponada pH 7.4</td><td>Panreac Applichem</td><td>A9177</td><td></td></tr><tr><td>Pipetas serológicas (10 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>Pipetas serológicas (5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>170366N</td><td></td></tr><tr><td>plato de cultivo de tejidos</td><td>TPP Techno Plastic Products AG</td><td>93150</td><td></td></tr></tbody></table>

cribado in vitro basado en led para la evaluación de moléculas fotoactivables en la inactivación fotodinámica bacteriana

LED-Based In Vitro Screening for Assessing Photoactivable Molecules in Bacterial Photodynamic Inactivation

Compuestos de flavilio a base de amino (Figura 2): 7-dietilamino-4′-dimetilaminoflavilio (7NEt24′NMe2), 7-dietilamino-2-(dimetilaminostiril)-1-benzopirilio (7NEt2st4′NMe2), 7-dietilamino-4′-aminoflavilio (7NEt24′NH2) y 7-dietilamino-4′-hidroxiflavilio (7NEt24′OH), cuya naturaleza sensible a la luz se discutió anteriormente12,13, se incubaron con S. aureu...

Cribado in vitro basado en LED para la evaluación de moléculas fotoactivables en la inactivación fotodinámica bacteriana

The rise of multi-drug-resistant infections and the lack of new antibiotic classes have renewed interest in alternative therapies like photodynamic ...

led-based-vitro-screening-for-assessing-photoactivable-molecules

Research

Investigación

JoVE Journal

Biochemistry

Bioquímica

Fuente: Cheng, C., et al. Inactivación de patógenos mediante fotólisis con luz visible de riboflavina-5′-fosfato. J. Vis. Exp. (2022)Este video demuestra un método para evaluar los efectos fototóxicos del mononucleótido de flavina (FMN) en bacterias patógenas. Los cultivos bacterianos se exponen a concentraciones crecientes de FMN y se iluminan con luz visible para generar especies reactivas de oxígeno (ROS) que dañan los componentes celulares. Luego, las bacterias sobrevivientes se cuantifican...

Inactivación de bacterias mediante mononucleótido de flavina activado por luz

Fuente: Cheng, C., et al. Inactivación de patógenos mediante fotólisis con luz visible de riboflavina-5′-fosfato. J. Vis. Exp. (2022).En este video, una mezcla de reacción tamponada que contiene L-metionina, nitro azul tetrazolio (NBT) y mononucleótido de flavina (FMN) se irradia con luz violeta para inducir la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS). Esto conduce a la inactivación bacteriana y a la formación de formazán detectable espectrométricamente.

Cuantificación de la inactivación bacteriana inducida por la luz a través de la generación de especies reactivas de oxígeno

Fuente: Zhao, K., et al. Un modelo in vitro para estudiar el efecto de la terapia fotodinámica mediada por ácido 5-aminolevulínico sobre el biofilm de Staphylococcus aureus . J. Vis. Exp. (2018)El vídeo muestra un protocolo de terapia fotodinámica para evaluar los efectos antibacterianos en biopelículas bacterianas Gram-positivas. Las biopelículas se dividen en cuatro grupos: dos reciben un precursor fotosensibilizador y dos reciben un tampón. Todos son incubados en la oscuridad, seguidos de la...

Tratamiento activado por luz de biopelículas bacterianas utilizando un precursor fotosensibilizante

Las infecciones causadas por cepas bacterianas multirresistentes (MDR) se han convertido en una grave amenaza para la salud pública, lo que requiere el desarrollo de terapias alternativas. Presentamos un protocolo para evaluar la efectividad de la terapia antimicrobiana con luz azul (aBL) para las infecciones por MDR Acinetobacter baumannii en quemaduras de ratón mediante el uso de imágenes de bioluminiscencia.

En Vivo Investigación de Terapia de luz azul antimicrobianos para multirresistente Acinetobacter baumannii infecciones de quemaduras El uso de bioluminiscencia Imaging

Este manuscrito describe un protocolo para estudiar el efecto antimicrobiano de terapia fotodinámica mediada por el ácido de 5-aminolevulínico (ALA-PDT) en el biofilm de Staphylococcus aureus . Este protocolo puede utilizarse para desarrollar un modelo de vitro para estudiar el tratamiento de los biofilms bacterianos con TFD en el futuro.

Un modelo In Vitro para estudiar el efecto de la terapia fotodinámica mediada por el ácido aminolevulínico 5 de Biofilm de Staphylococcus aureus

Terapia fotodinámica (TFD) es un procedimiento médico que involucra la incubación de un fotosensibilizador exógeno aplicado (PS) seguido por fotoactivación luz visible para inducir apoptosis. Presentamos un protocolo en vitro PDT diseñado para simular el PDT que puede utilizarse para estudiar las diferencias en incubación de PS y parámetros de tratamiento de la luz.

Un enfoque In Vitro de la terapia fotodinámica

Aquí, presentamos un protocolo para inactivar bacterias patógenas con especies reactivas de oxígeno producidas durante la fotólisis del mononucleótido de flavina (FMN) bajo irradiación de luz azul y violeta de baja intensidad. Se ha demostrado que la fotólisis FMN es un método simple y seguro para procesos sanitarios.

Inactivación de patógenos mediante fotólisis con luz visible de riboflavina-5′-fosfato

La creciente incidencia de Candida albicans resistente a los medicamentos es un grave problema de salud en todo el mundo. La terapia fotodinámica antimicrobiana (aPDT) puede ofrecer una estrategia para luchar contra las infecciones fúngicas resistentes a los medicamentos. El presente protocolo describe la eficacia de la aPDT mediada por Rose bengal en una cepa de C. albicans multirresistente in vitro.

Terapia fotodinámica mediada por rosa de Bengala para inhibir Candida albicans

Aquí, describimos un dispositivo novedoso, simple y de bajo costo para realizar con éxito ensayos de terapia fotodinámica in vitro (TFD) utilizando cultivo de células HeLa bidimensionales y verteporfina como fotosensibilizador.

Un dispositivo de terapia fotodinámica construido internamente y basado en diodos emisores de luz para mejorar la citotoxicidad de la verteporina en un modelo de cultivo celular 2D

Este protocolo presenta un conjunto de experimentos adoptados para la evaluación de péptidos anticancerígenos fotoconmutables, que pueden ser utilizados en el cribado preclínico de dichos compuestos. Esto incluye la evaluación de citotoxicidad en cultivos celulares 2D y 3D, la evaluación de la eficiencia de fotoisomerización ex vivo (tejido modelo) y la eficacia in vivo .

Evaluación in vitro e in vivo de compuestos biológicamente activos fotocontrolados: posibles candidatos a fármacos para la fotofarmacología del cáncer

Este manuscrito presenta un novedoso e innovador dispositivo de iluminación impreso en 3D para estudiar la terapia fotodinámica mediada por la rosa de Bengala in vitro.

Desarrollo de un innovador dispositivo de iluminación basado en LED para la aplicación in vitro de terapia fotodinámica con rosa de Bengala

Aprende a evaluar fotosensibilizantes para inactivación fotodinámica bacteriana usando placas de 96 pocillos y paneles LED con Staphylococcus aureus. Este método económico permite el cribado de alta capacidad de compuestos flavylium.

Cribado in vitro basado en LED para la evaluación de moléculas fotoactivables en la inactivación fotodinámica bacteriana

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