Name: Estudio de la muerte celular programada inducida por nanopartículas de cobre en bacterias (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-16T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 22 s
Description: Aprenda cómo las nanopartículas de cobre inducen muerte celular programada en bacterias mediante generación de especies reactivas de oxígeno. Este método evalúa la eficacia bactericida contra Escherichia coli, Acinetobacter baumannii y Staphylococcus aureus.

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<ol><li>Anees Ahmad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bactericidal+activity+of+silver+nanoparticles%3A+A+mechanistic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Mater+Sci+Energy+Technol%22%5BJournal%5D)">Bactericidal activity of silver nanoparticles: A mechanistic review.</a> Mater Sci Energy Technol. 3, 756-769 (2020).</li>
<li>Zhang, Y., Shareena Dasari, T. P., Deng, H., Yu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimicrobial+activity+of+gold+nanoparticles+and+ionic+gold%5BTitle%5D)+AND+%22J+Environ+Sci+Health+C+Environ+Carcinog+Ecotoxicol+Rev%22%5BJournal%5D)">Antimicrobial activity of gold nanoparticles and ionic gold.</a> J Environ Sci Health C Environ Carcinog Ecotoxicol Rev. 33 (3), 286-327 (2015).</li>
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<li>Macomber, L., Imlay, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+iron-sulfur+clusters+of+dehydratases+are+primary+intracellular+targets+of+copper+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">The iron-sulfur clusters of dehydratases are primary intracellular targets of copper toxicity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 106 (20), 8344-8349 (2009).</li>
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<li>Ihara, M., Shichijo, K., Takeshita, S., Kudo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wortmannin%2C+a+specific+inhibitor+of+phosphatidylinositol-3-kinase%2C+induces+accumulation+of+DNA+double-strand+breaks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Radiat+Res%22%5BJournal%5D)">Wortmannin, a specific inhibitor of phosphatidylinositol-3-kinase, induces accumulation of DNA double-strand breaks.</a> J Radiat Res. 61 (2), 171-176 (2020).</li>
<li>Yang, Y. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+and+interpretation+of+current+autophagy+inhibitors+and+activators%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmacol+Sin%22%5BJournal%5D)">Application and interpretation of current autophagy inhibitors and activators.</a> Acta Pharmacol Sin. 34 (5), 625-635 (2013).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Acinetobacter baumannii Variedad Bouvet y Grimont&nbsp;</td><td>Colección de cultivos tipo americano (ATCC), Manassas, VA, EE. UU.</td><td>17978</td><td>Bacterias para el experimento de toxocidad de CuNP</td></tr><tr><td>Bio-Rad iMark Lector de microplacas</td><td>Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, EE. UU.</td><td>168-1130</td><td>Se utiliza para medir la absorbancia en ensayos de viabilidad bacteriana.</td></tr><tr><td>diacetato de 2',7'-diclorodihidrofluoresceína permeable en células&nbsp; (H2DCFDA)</td><td>Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO, EE. UU.</td><td>D6883</td><td>Se utiliza para detectar especies reactivas de oxígeno (ROS) en células bacterianas tratadas.</td></tr><tr><td>Nanopartículas de cobre (CuNP) 25 nm</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>774081</td><td>Se utiliza para preparar una solución madre de CuNP</td></tr><tr><td>Nanopartículas de cobre (CuNP) de 60-80 nm</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>774103</td><td>Se utiliza para preparar una solución madre de CuNP</td></tr><tr><td>Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers</td><td>American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VA, USA</td><td>25922</td><td>Bacterias para el experimento de toxocidad de CuNP</td></tr><tr><td>Citómetro de flujo Gallios</td><td>Beckman Coulter, Brea, CA, EE. UU</td><td></td><td>. Se utiliza para el análisis de citometría de flujo en múltiples experimentos, incluida la detección de especies reactivas de oxígeno.</td></tr><tr><td>Agar LB</td><td>FocusBio, Miaoli, Taiwán</td><td>LBA500</td><td>Utilizado para el cultivo</td></tr><tr><td>de bacterias Caldo Luria-Bertani (LB)</td><td>Becton, Dickinson and Company, Sparks, MD, USA</td><td>244620</td><td>Utilizado para el cultivo de bacterias</td></tr><tr><td>Necrosulfonamida (NSA)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA</td><td>480073</td><td>Utilizado como modulador para el pretratamiento en estudios de vías de muerte bacteriana.</td></tr><tr><td>Reactivo de viabilidad celular PrestoBlue</td><td>Invitrogen, Carlsbad, CA, EE. UU.</td><td>P50200</td><td>Se utiliza para evaluar la viabilidad celular mediante fluorescencia.</td></tr><tr><td>SBI-0206965 (SBI)</td><td>BioVision, Milpitas, CA, USA</td><td>9580</td><td>Se utiliza como modulador para el pretratamiento en estudios de vías de muerte bacteriana.</td></tr><tr><td>Dodecil sulfato de sodio (SDS)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.</td><td>L4509</td><td>Se utiliza como dispersante de nanopartículas de cobre para reducir la agregación.</td></tr><tr><td>Staphylococcus aureus</td><td>American Type Culture Collection (ATCC), Manassas, VA, USA Bioresource Collection and Research Center (BCRC), Hsinchu, Taiwán</td><td>13567</td><td>Bacterias para el experimento de toxocidad</td></tr><tr><td>CuNP Lector de microplacas multimodo Varioskan LUX</td><td>Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA</td><td>VLBLATGD2</td><td>Utilizado para medir la fluorescencia en ensayos de viabilidad celular</td></tr><tr><td>Wortmannin (Wort)</td><td>Abcam, MA, USA</td><td>ab120148</td><td>Se utiliza como modulador para el pretratamiento en estudios de vías de muerte bacteriana.</td></tr><tr><td>Z-VAD-FMK (Z-VAD)</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.</td><td>V116</td><td>Se utiliza como modulador para el pretratamiento en estudios de vías de muerte bacteriana.</td></tr></tbody></table>

estudio de la muerte celular programada inducida por nanopartículas de cobre en bacterias

Studying Copper Nanoparticle-Induced Programmed Cell Death in Bacteria

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Estudio de la muerte celular programada inducida por nanopartículas de cobre en bacterias

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En este artículo se describe un método que utiliza multi-espectral citometría de flujo de imágenes para cuantificar la internalización de nanopartículas polianhídrido o bacterias de las células RAW 264.7.

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Fuente: Zhang, Y., et al. Aplicación de nanopartículas fluorescentes para estudiar la remodelación del sistema endolisosomal por bacterias intracelulares. J. Vis. Exp. (2015)Este video demuestra el uso de nanopartículas fluorescentes para visualizar la remodelación endo-lisosomal en células epiteliales humanas infectadas por bacterias intracelulares. Después de la invasión bacteriana, los patógenos manipulan el citoesqueleto del huésped y el sistema endolisosomal, formando vacuolas con...

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Tomemos tubos con un medio que contiene un compuesto de nanopartículas, diseñado a partir de una combinación de metales de transición y carbono.Introducir bacterias patógenas Gram-positivas y Gramnegativas resistentes a los antibióticos en tubos separados como muestras de prueba.Incluye bacterias no tratadas como control negativo y bacterias tratadas con antibióticos como control positivo.Incuba las muestras agitándolas.En bacterias Gramnegativas, la membrana externa porosa y la fina capa de...

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A diferencia de la observada para eucariotas, hay una escasez de estudios que despolarización detalle de la membrana y la concentración de iones cambios en las bacterias, principalmente como su pequeño tamaño hace que los métodos convencionales de medición de difícil. En este sentido, los protocolos de detalle para el seguimiento de estos eventos en el Gram-positivas patógeno significativo Streptococcus pneumoniae utilizando técnicas de fluorescencia.

Vigilar los cambios en la polaridad de la membrana, membrana Integridad, e intracelular de iones concentraciones en<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Uso de tintes fluorescentes

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La eliminación de oligoelementos por cúprico Óxido nanopartículas de uranio<em&gt; In Situ</em&gt; Recuperación de purga de agua y su efecto sobre la viabilidad celular

Aquí se presenta un protocolo para sintetizar nuevos, biocomposites elevada relación de aspecto en condiciones biológicas y en medios líquidos. Los biocomposites escala de nanómetros a micrómetros de diámetro y longitud, respectivamente. Nanopartículas de cobre (CNP) y sulfato de cobre en combinación con cistina son los componentes clave para la síntesis.

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Las poblaciones microbianas contienen heterogeneidad celular sustancial, que puede dictar el comportamiento general. Análisis de la sonda molecular a través de citometría de flujo puede determinar estados fisiológicos de las células, sin embargo su aplicación varía entre las especies. Este estudio proporciona un protocolo para determinar con precisión la mortalidad celular dentro de una población cianobacteria, sin menospreciar o grabación de resultados falsos positivos.

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Producción de nanopartículas metálicas por ablación por láser pulsado en líquidos: una herramienta para estudiar las propiedades antibacterianas de las nanopartículas

En este trabajo se presenta un protocolo para estudiar la tasa de inicio de la muerte celular programada mediante la obtención de imágenes continuas de las hojas inoculadas después de la inducción de la muerte celular.

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Aprenda cómo las nanopartículas de cobre inducen muerte celular programada en bacterias mediante generación de especies reactivas de oxígeno. Este método evalúa la eficacia bactericida contra Escherichia coli, Acinetobacter baumannii y Staphylococcus aureus.

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