Name: Aislamiento de células epiteliales primarias del túbulo proximal humano y su uso en la creación de un modelo microfisiológico del túbulo proximal renal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-09T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Aprenda a aislar células epiteliales del túbulo proximal humano para crear modelos microfisiológicos renales. Este método permite evaluar transporte de fármacos y nefrotoxicidad con mayor precisión predictiva.

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<ol><li>Bertram, J. F., Douglas-Denton, R. N., Diouf, B., Hughson, M. D., Hoy, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+nephron+number%3A+implications+for+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Human nephron number: implications for health and disease.</a> Pediatr Nephrol. 26 (9), 1529-1533 (2011).</li>
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<li>Imaoka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+the+gap+between+in+silico+and+in+vivo+by+modeling+opioid+disposition+in+a+kidney+proximal+tubule+microphysiological+system%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Bridging the gap between in silico and in vivo by modeling opioid disposition in a kidney proximal tubule microphysiological system.</a> Sci Rep. 11 (1), 21356(2021).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Jeringuillas Luer-Lok Tip de 1 mL</td><td>Becton, Dickinson</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Tubos microcentrífugas de 1,5 mL</td><td>Productos Científicos CELLTREAT</td><td>229442</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico de polipropileno estéril de 15 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-53A</td><td></td></tr><tr><td>Dispositivo microfisiológico 3D</td><td>Nortis</td><td>TCC-001</td><td></td></tr><tr><td>Jeringuillas Luer-Lok Tip de 5 mL</td><td>Becton, Dickinson</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Tubo cónico de polipropileno estéril de 50 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-565-271</td><td></td></tr><tr><td>Antibiótico-Antimicótico (100 veces)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Colagenasa tipo IV, polvo</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-glucosa</td><td>MilliporeSigma</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Inhibidor definido de la tripsina</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>R007100</td><td></td></tr><tr><td>Dimetilsulfóxido, Bioreactivo, Termo Química Científica</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>J66650-AK</td><td></td></tr><tr><td>Dispasa II, polvo</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s MEM (DMEM)/F-12 sin glucosa</td><td>Ciencias biológicas de la vida de EE. UU.</td><td>D9807-02</td><td></td></tr><tr><td>Suero Tamponado con Fosfato (DPBS) de Dulbecco, calcio, magnesio</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14040117</td><td></td></tr><tr><td>Suero fetal bovino (FBS), Premium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A5670701</td><td></td></tr><tr><td>Kits de Pipeteo de Laboratorio Finnpipette F2 Good (GLP)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>05-719-511</td><td>Micropipetas</td></tr><tr><td>Puntas de pipeta Fisherbrand SureOne Micropoint, ajuste universal, sin filtro</td><td>Fisher Scientific</td><td>02707407, 02707410, 02707438</td><td></td></tr><tr><td>Riñón humano entero fresco</td><td>Novabiosis</td><td>https://www.novabiosis.com/research-organ-allocation-services/</td><td>Los riñones humanos se obtuvieron mediante Novabiosis, una OPO aprobada por UNS</td></tr><tr><td>Incubadora humidificada (37 y grados; C y 5% CO2)</td><td>Fisher Scientific</td><td>51033556</td><td></td></tr><tr><td>Hidrocortisona</td><td>MilliporeSigma</td><td>H0888</td><td></td></tr><tr><td>Incubador orbital</td><td>Avantor</td><td>12620-946</td><td></td></tr><tr><td>Insulina-Transferrina-Selenio (100X) (ITS -G)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>Vials criogénicos de hilo interno</td><td>Corning</td><td>430487</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipe de Ciencia Kimtech</td><td>Kimberly-Clark Profesional</td><td>34120</td><td></td></tr><tr><td>Luer Stubs (aguja roma), 22 G x 0,5 pulgadas</td><td>Instech Laboratories, Inc.</td><td>LS22</td><td></td></tr><tr><td>Medio 199, Sales de Earle (10 veces)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>21180021</td><td></td></tr><tr><td>Megafuge 8 Centrífuga Pequeña de Mesa</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>75007210</td><td></td></tr><tr><td>Acoplador metálico (romo)</td><td>Instech Laboratories, Inc.</td><td>SC 20/15</td><td></td></tr><tr><td>Recipiente helador del señor Frosty</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>5100-0036</td><td></td></tr><tr><td>Microscopio Nikon Eclipse Ti-S</td><td>Instrumentos Nikon</td><td>https://www.thelabworldgroup.com/product/nikon-eclipse-ti-fluorescent-microscope/</td><td>Modelo original descontinuado&nbsp;</td></tr><tr><td>Nunc Frascos no tratados, T-25</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>169900</td><td></td></tr><tr><td>Nunc Frascos no tratados, T-75</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>156800</td><td></td></tr><tr><td>Pipeta, 10 mL, graduada, 1/10 mL, estéril</td><td>Greiner Bio-One</td><td>607180</td><td></td></tr><tr><td>Tubería de silicio, tubería C-flex, (ID: 0,020", DI: 0,083")</td><td>Cole-Parmer</td><td>06422-00</td><td></td></tr><tr><td>Cuchilla de afeitar de un solo filo (estéril)</td><td>Bioseal</td><td>KI-205/50</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato de sodio</td><td>MilliporeSigma</td><td>S6297</td><td></td></tr><tr><td>Hidróxido de sodio</td><td>MilliporeSigma</td><td>S8045</td><td></td></tr><tr><td>Unidades de filtro desechables estériles con membranas PES</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>567-0020</td><td></td></tr><tr><td>Platos tratados con cultivo de tejidos, 150 mm&nbsp; x 20 mm ventilado</td><td>Genesee Scientific</td><td>25-203</td><td></td></tr><tr><td>Tripsina-EDTA (0,05%), fenol rojo</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Colágeno tipo I, cola de rata</td><td>Corning</td><td>354236</td><td></td></tr><tr><td>Colágeno tipo IV, ratón</td><td>Corning</td><td>354233</td><td></td></tr></tbody></table>

aislamiento de células epiteliales primarias del túbulo proximal humano y su uso en la creación de un modelo microfisiológico del túbulo proximal renal

Isolation of Primary Human Proximal Tubule Epithelial Cells and Their Use in Creating a Microphysiological Model of the Renal Proximal Tubule

Aislamiento de células epiteliales primarias del túbulo proximal humano y su uso en la creación de un modelo microfisiológico del túbulo proximal renal

Kidney disease affects over 850 million people globally, including 37 million Americans. Risk factors for&#160;chronic kidney disease include ...

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En este video, demostramos los pasos para aislar y purificar células epiteliales tubulares renales para una amplia gama de estudios de biología molecular y cultivos celulares.

Aislamiento de células renales murinas: una técnica para aislar y generar cultivo primario de células epiteliales tubulares renales

Los canales iónicos expresadas en el epitelio tubular renal desempeñan un papel importante en la patología de la enfermedad poliquística del riñón. Aquí se describen los protocolos experimentales utilizados para realizar mediciones de análisis y el nivel de calcio intracelular patch-clamp en el epitelio quística recién aisladas de los riñones de roedores.

La implementación de Patch Clamp y vivo microscopía de fluorescencia para supervisar propiedades funcionales de recién aisladas PKD Epitelio

Este protocolo describe la descelularización de riñones de rata Sprague Dawley mediante perfusión anterógrada de detergentes a través de la vasculatura, produciendo matrices extracelulares renales acelulares que sirven como molde para la repoblación con células epiteliales renales humanas. La recelularización y el uso del ensayo de perfusión de resazurina para monitorear el crecimiento se realizan dentro de biorreactores de perfusión especialmente diseñados.

La repoblación de las células epiteliales y Preparación de roedores matriz extracelular andamios para el Desarrollo del tejido renal

Aquí presentamos un método de aislamiento y de la cultura de grado clínico novela para riñón células estromales perivasculares (kPSCs) basado en perfusión de órgano entero con enzimas digestivas y células NG2 enriquecimiento. Con este método, es posible adquirir un número suficiente de células para terapia celular.

Un método de aislamiento de grado clínico novedoso para Stromal células de riñón humano perivasculares

Ingeniería de tejido renales construcciones proporcionan una solución para la escasez de órganos y los efectos deletéreos de la diálisis. Aquí, describimos un protocolo micro disecar riñones murinos para el aislamiento de segmentos córtico-medular. Estos segmentos están implantados en construcciones celulares libre de andamio, formando organoides renal.

Microdisección de segmentos de tejido Renal primaria y la incorporación con la tecnología de construcción de andamio-libre nuevo

Este protocolo proporciona un enfoque rentable para aislar y caracterizar ratón primario células tubulares renales que posteriormente pueden cultivarse el evaluar funciones biológicas renal ex vivo, incluyendo bioenergética mitocondrial.

Aislamiento, caracterización y alto rendimiento análisis de flujo extracelular de ratón células epiteliales tubulares renales primarias

Los cultivos de tubuloides renales humanos representan un valioso modelo in vitro para estudiar la fisiología y la enfermedad renal. Los tubuloides se pueden establecer a partir del tejido renal (sano y enfermo), así como de la orina, esta última representa una fuente de material de investigación fácilmente obtenible y menos invasiva.

Generación de tubuloides renales humanos a partir de tejidos y orina

Aquí, presentamos protocolos que detallan instrucciones para implementar cultivos celulares en 3D utilizando matrices de colágeno y colágeno-agarosa en un sistema microfisiológico. Estos protocolos apoyan el cocultivo de esferoides de túbulo proximal renal y carcinoma de células renales, simulando condiciones in vivo y permitiendo la investigación avanzada de las interacciones de las células de cáncer de riñón.

Cocultivo microfluídico de epitelio renal sano y tumoral para modelar la progresión del cáncer de riñón

En este trabajo describimos los protocolos para la obtención de cultivos primarios de células epiteliales tubulares renales humanas (HRTEC) a partir de la corteza renal para desarrollar monocapas y cultivos tridimensionales en una matriz extracelular (3D-HRTEC).

Desarrollo de cultivos primarios de células epiteliales tubulares renales humanas en monocapas y condiciones tridimensionales

Aquí describimos un protocolo in vitro para modelar el daño por hipoxia/reoxigenación en las células epiteliales tubulares proximales, altamente metabólicas. Este modelo está diseñado para inducir daños inducidos por estrés metabólico, que pueden medirse mediante la expresión de marcadores de daño proximal de los túbulos y la evaluación de la función respiratoria mitocondrial.

Modelado de la hipoxia/lesión por reoxigenación en células epiteliales tubulares proximales

Aprenda a aislar células epiteliales del túbulo proximal humano para crear modelos microfisiológicos renales. Este método permite evaluar transporte de fármacos y nefrotoxicidad con mayor precisión predictiva.

Aislamiento de células epiteliales primarias del túbulo proximal humano y su uso en la creación de un modelo microfisiológico del túbulo proximal renal (Video) | JoVE Journal

Aislamiento de células epiteliales primarias del túbulo proximal humano y su uso en la creación de un modelo microfisiológico del túbulo proximal renal

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