Name: Un modelo adoptivo de transferencia de artritis reumatoide en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T15:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 37 s
Description: Aprenda a establecer un modelo de artritis reumatoide en ratones mediante transferencia adoptiva de células T CD4+ de ratones SKG. Este sistema rápido y reproducible facilita el estudio de mecanismos inmunológicos y pruebas terapéuticas.

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<ol><li>Global, regional, and national burden of rheumatoid arthritis, 1990-2020, and projections to 2050: A systematic analysis of the global burden of disease study. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Lancet+Rheumatol%22">Lancet Rheumatol</a>. 5 (10), e594-e610 (2021).</li>
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<li>Di Matteo, A., Bathon, J. M., Emery, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Rheumatoid arthritis.</a> Lancet. 402 (10416), 2019-2033 (2023).</li>
<li>Bernard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+patients+with+rheumatoid+arthritis+by+telemedicine%3A+Connected+monitoring.+A+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Joint+Bone+Spine%22%5BJournal%5D)">Management of patients with rheumatoid arthritis by telemedicine: Connected monitoring. A randomized controlled trial.</a> Joint Bone Spine. 89 (5), 105368(2022).</li>
<li>Jang, S., Kwon, E. J., Lee, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheumatoid+arthritis%3A+Pathogenic+roles+of+diverse+immune+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Rheumatoid arthritis: Pathogenic roles of diverse immune cells.</a> Int J Mol Sci. 23 (2), 905(2022).</li>
<li>Daikh, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheumatoid+arthritis%3A+Evolving+recognition+of+a+common+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Best+Pract+Res+Clin+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Rheumatoid arthritis: Evolving recognition of a common disease.</a> Best Pract Res Clin Rheumatol. 36 (1), 101740(2022).</li>
<li>Bhamidipati, K., Wei, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precision+medicine+in+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Best+Pract+Res+Clin+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Precision medicine in rheumatoid arthritis.</a> Best Pract Res Clin Rheumatol. 36 (1), 101742(2022).</li>
<li>Meyer, A., Parmar, P. J., Shahrara, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Significance+of+IL-7+and+IL-7R+in+RA+and+autoimmunity%5BTitle%5D)+AND+%22Autoimmun+Rev%22%5BJournal%5D)">Significance of IL-7 and IL-7R in RA and autoimmunity.</a> Autoimmun Rev. 21 (7), 103120(2022).</li>
<li>Yu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+induction+of+CCL5%2C+CXCL9+and+CXCL10+by+IFN-%CE%B3+and+NLRS+ligands+on+human+fibroblast-like+synoviocytes-a+potential+immunopathological+mechanism+for+joint+inflammation+in+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Synergistic induction of CCL5, CXCL9 and CXCL10 by IFN-γ and NLRS ligands on human fibroblast-like synoviocytes-a potential immunopathological mechanism for joint inflammation in rheumatoid arthritis.</a> Int Immunopharmacol. 82, 106356(2020).</li>
<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+sequencing+of+immune+cells+from+anticitrullinated+peptide+antibody+positive+and+negative+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Single-cell sequencing of immune cells from anticitrullinated peptide antibody positive and negative rheumatoid arthritis.</a> Nat Commun. 12 (1), 4977(2021).</li>
<li>Wei, X., Niu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+follicular+helper+cells+in+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Autoimmun%22%5BJournal%5D)">T follicular helper cells in autoimmune diseases.</a> J Autoimmun. 134, 102976(2023).</li>
<li>Mcelwee, M. K., Dileepan, T., Mahmud, S. A., Jenkins, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD4%2B+T+cell+repertoire+specific+for+citrullinated+peptides+shows+evidence+of+immune+tolerance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">The CD4+ T cell repertoire specific for citrullinated peptides shows evidence of immune tolerance.</a> J Exp Med. 220 (12), e20230209(2023).</li>
<li>Ahmed, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+inhibition+of+glycolysis+and+glutaminolysis+for+synergistic+therapy+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Dual inhibition of glycolysis and glutaminolysis for synergistic therapy of rheumatoid arthritis.</a> Arthritis Res Ther. 25 (1), 176(2023).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf+antagonist+sensitizes+synovial+fibroblasts+to+ferroptotic+cell+death+in+collagen-induced+arthritis+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Tnf antagonist sensitizes synovial fibroblasts to ferroptotic cell death in collagen-induced arthritis mouse models.</a> Nat Commun. 13 (1), 676(2022).</li>
<li>Huo, F., Hou, J., Zhu, Y., Feng, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ferroptosis+inducer+ike+ameliorate+pulmonary+fibrosis+in+collagen-induced+arthritis+%28CIA%29+mice+via+decreasing+the+expression+of+IL-6%2C+CCL5+and+CXCL9%5BTitle%5D)+AND+%22Xi+Bao+Yu+Fen+Zi+Mian+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">ferroptosis inducer ike ameliorate pulmonary fibrosis in collagen-induced arthritis (CIA) mice via decreasing the expression of IL-6, CCL5 and CXCL9.</a> Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi. 40 (2), 114-120 (2024).</li>
<li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ID2+exacerbates+the+development+of+rheumatoid+arthritis+by+increasing+IFN-%CE%B3+production+in+CD4%2B+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">ID2 exacerbates the development of rheumatoid arthritis by increasing IFN-γ production in CD4+ T cells.</a> Clin Transl Med. 15 (3), e70242(2025).</li>
<li>Murayama, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CTRP6+is+an+endogenous+complement+regulator+that+can+effectively+treat+induced+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">CTRP6 is an endogenous complement regulator that can effectively treat induced arthritis.</a> Nat Commun. 6, 8483(2015).</li>
<li>Kadura, S., Raghu, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheumatoid+arthritis-interstitial+lung+disease%3A+Manifestations+and+current+concepts+in+pathogenesis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+Rev%22%5BJournal%5D)">Rheumatoid arthritis-interstitial lung disease: Manifestations and current concepts in pathogenesis and management.</a> Eur Respir Rev. 30 (160), 210011(2021).</li>
<li>Mueller, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+understanding+the+pathogenesis+of+rheumatoid+arthritis%3A+New+treatment+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Recent advances in understanding the pathogenesis of rheumatoid arthritis: New treatment strategies.</a> Cells. 10 (11), 3017(2021).</li>
<li>Sun, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gut+commensal+parabacteroides+distasonis+alleviates+inflammatory+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Gut commensal parabacteroides distasonis alleviates inflammatory arthritis.</a> Gut. 72 (9), 1664-1677 (2023).</li>
<li>Li, Z. Y., Zhou, J. J., Luo, C. L., Zhang, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+tgr5+alleviates+inflammation+in+rheumatoid+arthritis+peripheral+blood+mononuclear+cells+and+in+mice+with+collagen+II-induced+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Med+Rep%22%5BJournal%5D)">Activation of tgr5 alleviates inflammation in rheumatoid arthritis peripheral blood mononuclear cells and in mice with collagen II-induced arthritis.</a> Mol Med Rep. 20 (5), 4540-4550 (2019).</li>
<li>Mccarthy, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endogenous+antigens+shape+the+transcriptome+and+TCR+repertoire+in+an+autoimmune+arthritis+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Endogenous antigens shape the transcriptome and TCR repertoire in an autoimmune arthritis model.</a> J Clin Invest. 135 (2), e174647(2024).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Annexin+A1+attenuates+cardiac+diastolic+dysfunction+in+mice+with+inflammatory+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Annexin A1 attenuates cardiac diastolic dysfunction in mice with inflammatory arthritis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (38), e2020385118(2021).</li>
<li>Owada, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LAT1-specific+inhibitor+ameliorates+severe+autoimmune+arthritis+in+skg+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">LAT1-specific inhibitor ameliorates severe autoimmune arthritis in skg mouse.</a> Int Immunopharmacol. 109, 108817(2022).</li>
<li>Zhang, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nrf2+activation+improves+experimental+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Nrf2 activation improves experimental rheumatoid arthritis.</a> Free Radic Biol Med. 207, 279-295 (2023).</li>
<li>Sakaguchi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+thymic+T-cell+selection+due+to+a+mutation+of+the+ZAP-70+gene+causes+autoimmune+arthritis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Altered thymic T-cell selection due to a mutation of the ZAP-70 gene causes autoimmune arthritis in mice.</a> Nature. 426 (6965), 454-460 (2003).</li>
<li>Van Hees, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+approaches+to+moderate+CRISPR-Cas9+activity%3A+Addressing+issues+of+cellular+uptake+and+endosomal+escape%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">New approaches to moderate CRISPR-Cas9 activity: Addressing issues of cellular uptake and endosomal escape.</a> Mol Ther. 30 (1), 32-46 (2022).</li>
<li>Tyumentseva, M., Tyumentsev, A., Akimkin, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR%2FCas9+landscape%3A+Current+state+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">CRISPR/Cas9 landscape: Current state and future perspectives.</a> Int J Mol Sci. 24 (22), 16077(2023).</li>
<li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B+cells+in+rheumatoid+arthritis%3A+pathogenic+mechanisms+and+treatment+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">B cells in rheumatoid arthritis: pathogenic mechanisms and treatment prospects.</a> Front Immunol. 12, 750753(2021).</li>
<li>Dunlap, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+associations+between+lymphocyte+subsets+and+functional+states+in+rheumatoid+arthritis+synovium%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Clonal associations between lymphocyte subsets and functional states in rheumatoid arthritis synovium.</a> Nat Commun. 15 (1), 4991(2024).</li>
<li>Okamoto, K., Takayanagi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+T+cells+on%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Effect of T cells on.</a> Bone. 168, 116675(2023).</li>
<li>Wang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+D2+receptor+on+CD4%2B+T+cells+is+protective+against+inflammatory+responses+and+signs+in+a+mouse+model+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Dopamine D2 receptor on CD4+ T cells is protective against inflammatory responses and signs in a mouse model of rheumatoid arthritis.</a> Arthritis Res Ther. 25 (1), 87(2023).</li>
<li>Wang, X. Q., Liu, Y., Cai, H. H., Peng, Y. P., Qiu, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+tyrosine+hydroxylase+inCD4%2B+T+cells+contributes+to+alleviation+of+Th17%2FTreg+imbalance+in+collagen-induced+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Biol+Med+%28Maywood%29%22%5BJournal%5D)">Expression of tyrosine hydroxylase inCD4+ T cells contributes to alleviation of Th17/Treg imbalance in collagen-induced arthritis.</a> Exp Biol Med (Maywood). 241 (18), 2094-2103 (2016).</li>
<li>Anaparti, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+frequency+of+TIGIT%2B+CD4+T+cell+subset+in+autoantibody-positive+first-degree+relatives+of+patients+with+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Increased frequency of TIGIT+ CD4 T cell subset in autoantibody-positive first-degree relatives of patients with rheumatoid arthritis.</a> Front Immunol. 13, 932627(2022).</li>
<li>Lei, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synovial+microenvironment-influenced+mast+cells+promote+the+progression+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Synovial microenvironment-influenced mast cells promote the progression of rheumatoid arthritis.</a> Nat Commun. 15 (1), 113(2024).</li>
<li>Jinno, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+retention+of+biologics+in+Japanese+patients+with+elderly-onset+rheumatoid+arthritis-the+answer+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Rheumatology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Comparison of retention of biologics in Japanese patients with elderly-onset rheumatoid arthritis-the answer cohort study.</a> Rheumatology (Oxford). 64 (2), 509-516 (2025).</li>
<li>Hagert, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+spread+of+mannan+to+the+immune+system%2C+skin+and+joints+within+6+hours+after+local+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Immunol%22%5BJournal%5D)">Rapid spread of mannan to the immune system, skin and joints within 6 hours after local exposure.</a> Clin Exp Immunol. 196 (3), 383-391 (2019).</li>
<li>Cheng, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deer+velvet+antler+extracts+exert+anti-inflammatory+and+anti-arthritic+effects+on+human+rheumatoid+arthritis+fibroblast-like+synoviocytes+and+distinct+mouse+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Chin+Med%22%5BJournal%5D)">Deer velvet antler extracts exert anti-inflammatory and anti-arthritic effects on human rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes and distinct mouse arthritis.</a> Am J Chin Med. 50 (6), 1617-1643 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Agarose</td><td>Yeasen</td><td>10208ES60</td><td>Preparación de gel de agarosa para su uso en experimentos de electroforesis de ADN</td></tr><tr><td>Etanol anhidro</td><td>Shanghai HuShi Laboratory Instruments Co., Ltd.</td><td>100009218</td><td>Agente deshidratante y fijador</td></tr><tr><td>ZAP 70 cebadores</td><td>Tsingke</td><td></td><td>cebadores utilizados para detectar la expresión del gen ZAP70, comúnmente utilizados en experimentos de PCR para genotipado de ratones</td></tr><tr><td>Solución de EDTA 0,5 M (pH = 7,4)</td><td>Biosharp</td><td>R00521</td><td>Se utiliza para la descalcificación para garantizar la calidad de las secciones de tejido y la tinción de tejidos que contienen calcio, manteniendo la integridad estructural del tejido</td></tr><tr><td>Tubos ep sin enzimas de 1,5 ml</td><td>LABSELECT</td><td>MCT-001-150-S</td><td>Se utiliza para una variedad de experimentos como almacenamiento de muestras, separación centrífuga, etc</td></tr>. <tr><td>2x Q3 SYBR qPCR Master Mix (universal)</td><td>ToloBio</td><td>22204</td><td>Se utiliza para realizar reacciones de qPCR altamente específicas y altamente sensibles.</td></tr><tr><td>2x Magic Green Taq SuperMix</td><td>TOLOBIO</td><td>21502-04</td><td>Solución tampón para preelectroforesis</td></tr><tr><td>Solución de formaldehído (paraformaldehído) al 4%</td><td>Biosharp</td><td>BL539A</td><td>Se utiliza como fijador para preservar la estructura tisular y la morfología celular, proporcionando muestras estables y bien conservadas para los pasos posteriores de tinción</td></tr><tr><td>Kit de aislamiento de ARN total de tejido animal/célula</td><td>Servicebio</td><td>MPC2409122</td><td>Extracción de ARN total de tejidos/células animales</td></tr><tr><td>BD Cytometric Bead Array (CBA) Mouse Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit</td><td>BD Biosciences</td><td>560485</td><td>Medir la expresión de citocinas Th1/2/17 en suero de ratón.</td></tr><tr><td>Plato de cultivo celular</td><td>LABSELECT</td><td>12211</td><td>Un recipiente para líquido celular del bazo y los ganglios linfáticos</td></tr><tr><td>Dimetilbenceno</td><td>China National Pharmaceutical Group Chemical Reagents Co., Ltd.</td><td>10023418</td><td>Se utiliza como agente desparafinante y aclarante</td></tr><tr><td>Cámara de recuento de células de seis puertos Easyfive</td><td>CytoEasy</td><td>N3EF110</td><td>Se utiliza para el recuento de células</td></tr><tr><td>Solución de tinción mejorada de Safranin O-Fast Green para cartílago.</td><td>Solarbio</td><td>G1371</td><td>Tiñe cartílago y tejidos óseos para observar cambios patológicos en la zona articular.</td></tr><tr><td>Portaobjetos de vidrio</td><td>CITOTEST</td><td>188105</td><td>Soporte básico para el corte de tejidos</td></tr><tr><td>Solución de tinción de hematoxilina</td><td>Servicebio</td><td>G1005-1</td><td>Tinción Solución</td></tr><tr><td>de tinción de hematoxilina</td><td>Servicebio</td><td>G1001</td><td>Tinción</td></tr><tr><td>Centrífuga refrigerada de baja velocidad</td><td>Cence</td><td>F14300021010004</td><td>Se utiliza para centrifugación y precipitación</td></tr><tr><td>Mannan</td><td>Sigma</td><td>m7504</td><td>Activador para el modelo. Disolver en PBS estéril a 2 mg/ml, mezclar bien y filtrar a través de una temperatura de 0,22 &mu; m para eliminar cualquier partícula o posibles fuentes de contaminación.</td></tr><tr><td>MojoSort Magnet</td><td>Biolengend</td><td>480019</td><td>Se utiliza para aislar y purificar células T CD4+ del bazo y los ganglios linfáticos de ratones</td></tr><tr><td>MojoSort Mouse CD4 T Cell Isolation Kit</td><td>Biolengend</td><td>480033</td><td>Se utiliza para aislar y purificar células T CD4+ del bazo y los ganglios linfáticos de ratones. Utilice un método de selección negativa que se une directamente a la molécula CD4 para aislar las células T CD4+, preservando la integridad de los antígenos de superficie sin afectar la funcionalidad de la molécula CD4, lo que lo hace adecuado para experimentos de infusión de células T CD4+.</td></tr><tr><td>Nano-300</td><td>ALLSHENG</td><td>AS-11020-00</td><td>Detección precisa de ácidos nucleicos, proteínas y soluciones celulares Agente de</td></tr><tr><td>montaje de resina neutra</td><td>Biosharp</td><td>BL704A</td><td>Fije y conserve secciones de tejido teñido</td></tr><tr><td>Microtomo de parafina</td><td>KEDEE</td><td>KD-3389</td><td>Utilizado para secciones de parafina</td></tr><tr><td>Solución salina tamponada con fosfato (PBS)</td><td>Pricella</td><td>WHB824P281</td><td>Utilizado como tampón solvente o agente de limpieza,</td></tr> <tr><td>filtro de celda estéril (70 &micro; m)</td><td>Biosharp</td><td>BS-70-CS</td><td>Elimine las impurezas grandes o los grupos de células agregadas de la suspensión celular para garantizar la pureza de la muestra y la uniformidad celular</td></tr><tr><td>Jeringa estéril (1 ml)</td><td>Aparato médico Lingyang</td><td>20241020</td><td>Inyección en la vena cantal interna</td></tr><tr><td>Centrífuga microrrefrigerada de alta velocidad de sobremesa</td><td>SCILOGEX</td><td>S1010E</td><td>Utilizado para centrifugación y precipitación</td></tr><tr><td>Tampón TEA (50x)</td><td>Yeasen</td><td>60116ES76</td><td>Estabiliza el pH, ayuda a proteger y preservar moléculas como el ADN y el ARN, utilizado en experimentos de electroforesis</td></tr><tr><td>ToloScript Todo en uno RT EasyMix para qPCR</td><td>ToloBio</td><td>22107</td><td>Se utiliza para convertir plantillas de ARN en ADNc, lo que facilita el análisis posterior de la expresión génica, qPCR y otros experimentos de biología molecular.</td></tr><tr><td>Pipetas Transefer</td><td>BIOFIL</td><td>240515-133-A</td><td>Se utiliza para transferir soluciones</td></tr><tr><td>Solución de colorante azul de tripano</td><td>Biosharp</td><td>7009529</td><td>Se utiliza comúnmente para ensayos de viabilidad celular, ayuda a diferenciar las células vivas de las células muertas</td></tr></tbody></table>

un modelo adoptivo de transferencia de artritis reumatoide en ratones

An Adoptive Transfer Model of Rheumatoid Arthritis in Mice

Puntuación clínica de la hinchazón articular y la tasa de incidencia en ratones 
La Figura 1 muestra la puntuación clínica de la inflamación articular y la tasa de incidencia en ratones modelo. Los resultados indican que todos los ratones del grupo modelo desarrollaron la enfermedad (n = 4), con una tasa de incidencia del 100%. Las puntuaciones en el grupo modelo aumentaron significativamente, mostraron un breve alivio en la segunda semana y, posteriormente, aumentaron durante un período de 6 semanas.
Manifestación de hinchazón articular en ratones Las articulaciones de los ratones del grupo modelo exhiben un engrosamiento e hinchazón significativos, con una hinchazón y engrosamiento notables también observados en las extremidades anteriores y traseras (Figura 2).
Resultados patológicos de las articulaciones del tobillo del ratón Los resultados anatomopatológicos indican que, en comparación con el grupo control, los ratones del grupo modelo muestran un engrosamiento significativo de la membrana sinovial en las articulaciones del tobillo, discontinuidad en el hueso y una marcada agregación de células inflamatorias (Figura 3, Figura 4 y Figura 5).
Factores inflamatorios séricos relacionados con las células T En comparación con el grupo de control, los ratones del grupo modelo mostraron aumentos significativos en los niveles séricos de IL-10 (7,51 frente a 2,15 pg/mL), TNF (78,83 frente a 13,11 pg/mL), IL-17 (101,6 frente a 12,64 pg/mL) e IFN-γ (5,15 frente a 1,90 pg/mL) (p &lt; 0,05). La IL-6 también aumentó significativamente en comparación con el grupo control (15,59 vs 6,27 pg/mL) (p = 0,05, Figura 6).
Cambios en los subconjuntos de células T Th1/2/17 y Tregs en el bazo Se midieron los niveles de expresión de ARNm de Tbx21 (Th1), Gata3 (Th2), Il-17 (Th17) y Foxp3 (Tregs) para evaluar los cambios en los subconjuntos de células T en el bazo. Estos genes codifican factores de transcripción clave y citocinas que definen la diferenciación y la función de sus respectivos subconjuntos de células T. En comparación con el grupo de control, los ratones del grupo modelo mostraron un aumento significativo de la expresión de ARNm de Tbx21 (1,68 frente a 0,61) e Il-17 (26,30 frente a 0,75) en el bazo (p &lt; 0,05) en relación con el gen de referencia Gapdh.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig01.jpg"> 
Figura 1: Puntuación clínica de la hinchazón articular. (A) Ratones del grupo modelo; (B) Incidencia acumulada en ratones del grupo modelo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig01large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig02.jpg"> 
Figura 2: Manifestaciones de hinchazón articular en ratones control y modelo (n = 4). (A-C) Imágenes representativas de las puntuaciones de hinchazón de las patas y las articulaciones (0,2,4) en los grupos de ratones control y modelo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig02large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig03.jpg"> 
Figura 3: Cambios histológicos en las articulaciones del tobillo de ratones del grupo control y del grupo modelo observados con tinción de hematoxilina-eosina. (A) Articulación del tobillo del ratón control; (B) Discontinuidad en el hueso de la articulación del tobillo del ratón del grupo modelo; (C) Proliferación sinovial en la articulación del tobillo del ratón del grupo modelo. Barras de escala = 50 μm (primera columna), 100 μm (segunda y tercera columnas). Las imágenes de las Fig. 3B y 3C son del mismo ratón, mostrando diferentes fenotipos patológicos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig03large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig04.jpg"> 
Figura 4: Diferencias en el grosor sinovial de las articulaciones del tobillo entre el grupo control y los ratones del grupo modelo (p &lt; 0,05). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig04large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig05.jpg"> 
Figura 5: Cambios histológicos en las articulaciones del tobillo de ratones del grupo de control y del grupo modelo observados con la tinción de Safranina O-Fast Green. (A) Articulación del tobillo del ratón del grupo de control; (B) Proliferación sinovial en la articulación del tobillo del ratón del grupo modelo. Barras de escala = 50 μm (primera columna), 100 μm (segunda y tercera columnas). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig05large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68196/68196fig06.jpg"> 
Figura 6: Cambios en los factores inflamatorios relacionados con las células T y subconjuntos en ratones de grupo de control y modelo. (A) Expresión de factores inflamatorios relacionados con las células T en el suero de ratones del grupo de control y modelo y (B) los cambios en los subconjuntos de células T Th1/2/17 y Tregs en el bazo. *p &lt; 0,05, **p &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/68196fig06large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Puntuación</td>
			<td>Hinchazón (rango 0-4)</td>
			<td>Eritema (rango 0-2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0</td>
			<td>Ninguno</td>
			<td>Ninguno</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td>Cualquier dígito</td>
			<td>leve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2</td>
			<td>Pata</td>
			<td>Extremo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3</td>
			<td>Muñeca/tobillo</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4</td>
			<td>Extremidad entera</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabla 1: Criterios de puntuación de la artritis. Para puntuar la artritis, cada extremidad se puntúa de acuerdo con la hinchazón y el eritema, con una puntuación de 0 a 6 asignada a cada extremidad. Las puntuaciones de las cuatro extremidades se suman para generar la puntuación total de artritis de cada ratón.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2">Secuencias de cebadores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nombre de Oligo</td>
			<td>Secuencia de 5' a 3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBX21-Adelante</td>
			<td>AGCAAGGAGCGAATGTT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBX21-Reverso</td>
			<td>GGGTGGACATATAAGCGGTTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gata3-Delantero</td>
			<td>CTCGGCCATTCGTACATGGAA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gata3-Reversa</td>
			<td>GGATACCTCTGCACCGTAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>il-17A-Adelante</td>
			<td>TTTAACTCCCTTGGCGCAAAA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>il-17A-Reversa</td>
			<td>CTTTCCCTCCGCATTGACAC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foxp3-Adelante</td>
			<td>CCCTTGACCTCAAAACCAAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foxp3-Reversa</td>
			<td>GTGTGACTGCATGACTAACTTTGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gapdh-Adelante</td>
			<td>GGTTGTCTCCTGCGACTTCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gapdh-Reversa</td>
			<td>TGGTCCAGGGTTTCTTACTCC</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabla 2: Lista de secuencias de cebadores.
Figura suplementaria S1: Estrategia de compuerta para la clasificación de células T CD4+ por citometría de flujo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68196/Supplemental%20Figure-Gating%20strategy.tif" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>

Un modelo adoptivo de transferencia de artritis reumatoide en ratones

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic, systemic autoimmune inflammatory disorder that may result in joint damage, deformities, disability, and even ...

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Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este video muestra un método para generar artritis inducida por adyuvantes en un modelo murino. El adyuvante completo de Freund (CFA) se inyecta en la articulación del tobillo y las áreas periarticulares del ratón. El CFA activa el sistema inmunitario, lo que provoca la infiltración de neutrófilos y una inflamación exagerada.

Una técnica para generar un modelo de ratón de artritis inducida por adyuvantes

Este video muestra una terapia basada en células para la artritis autoinmune en ratones. Las células T reguladoras derivadas de iPSC que expresan receptores específicos de ovoalbúmina se inyectan con albúmina sérica bovina metilada (mBSA) emulsionada en un adyuvante. Las células presentadoras de antígenos murinos (APC) procesan y presentan la mBSA a las células T, lo que provoca la activación de las células T y la migración a la membrana sinovial de la articulación de la rodilla. Las...

Una terapia basada en células para la artritis autoinmune en un modelo murino

Se describen protocolos para nuestros arteriosclerois de injerto de ratón (GA) modelos que implican la interposición de un segmento de vaso del ratón en un receptor de la misma cepa endogámica. Por retrocruzamiento de cambios genéticos adicionales en el recipiente de donante, el modelo se puede evaluar el efecto de los genes específicos en GA.

Modelos de ratón para Arteriosclerosis Graft

Aquí, presentamos un protocolo para inducir inflamación colónica en ratones mediante la transferencia adoptiva de células Taltas CD4 + CD45RB singénicas a receptores deficientes de células T y B. Las características clínicas e histopatológicas imitan las enfermedades inflamatorias intestinales humanas. Este método permite estudiar el inicio de la inflamación colónica y la progresión de la enfermedad.

La inducción de la inflamación intestinal murino por transferencia adoptiva de Efector CD4<sup&gt; +</sup&gt; CD45RB<sup&gt; Alta</sup&gt; T células en ratones inmunodeficientes

Describimos un protocolo para el injerto de interposición aórtica en ratones. El objetivo del protocolo es proporcionar un modelo con el que estudiar los procesos patológicos y las estrategias terapéuticas relevantes para las reacciones aloinmunes en las arterias y los cambios arteriales resultantes que contribuyen al fracaso del trasplante de órganos.

Modelo de ratón de rechazo vascular inducida por aloinmune y Arteriosclerosis Trasplante

La transferencia de linfocitos bm12 a un receptor C57BL/6 es un modelo establecido de lupus eritematoso sistémico. Aquí describimos cómo iniciar la enfermedad utilizando este modelo y cómo caracterizar las células T foliculares auxiliares, las células B del centro germinal y las células plasmáticas mediante citometría de flujo.

El inducible Modelo BM12 del lupus eritematoso sistémico (LES) en ratones C57BL / 6 ratones

Presentamos aquí un método para desarrollar células T reguladoras (Tregs) específicas de antígeno funcional (Ag) a partir de células madre pluripotentes inducidas (iPSCs) para la inmunoterapia de la artritis autoinmune en un modelo murino.

Desarrollo de derivados de células madre Las células T reguladoras específicas de antígeno contra la autoinmunidad

Descrito es la preparación de nanopartículas liposómicos antigénicas y su uso en estimular la activación de células B en vitro e in vivo. Respuestas de anticuerpos consistente y robusto condujeron al desarrollo de un nuevo modelo de la alergia del cacahuete. El protocolo para la generación de liposomas antigénicas puede ampliarse a los diferentes antígenos y vacunas.

Liposomas antigénicos para la generación de anticuerpos específicos de la enfermedad

Este protocolo utiliza péptidos mixtos G6PI para construir modelos de artritis reumatoide que están más cerca de la artritis reumatoide humana en células CD4+ T y citoquinas. Células T asesinas naturales invariables de alta pureza (principalmente iNKT2) con fenotipos y funciones específicas se obtuvieron mediante inducción in vivo y purificación in vitro para inmunoterapia adoptiva.

Inmunoterapia adoptiva de células iNKT en ratones RA inducidos por glucosa-6-fosfato (G6PI)

Se desarrolló un método de pulverización criogénica para procesar patas murinas utilizando un molino congelador de nitrógeno líquido para mejorar el rendimiento y la calidad del ARN o proteína extraída de los tejidos y permitir el análisis de perfiles moleculares asociados con Respuestas.

Un protocolo de Cryo-pulverización para el procesamiento de patas de ratón para evaluar las vías moleculares de la inflamación del tejido en un modelo de artritis inducida por colágeno

La imagen in vivo de las articulaciones es una técnica valiosa para descubrir el comportamiento migratorio de los leucocitos y la dinámica molecular dentro de las articulaciones inflamadas. Aquí presentamos un protocolo detallado para la obtención de imágenes in vivo de las articulaciones utilizando un modelo murino de artritis inducida por colágeno tipo II (CIA).

In vivo Las imágenes revelan el comportamiento migratorio de los leucocitos dentro de las articulaciones

Aprenda a establecer un modelo de artritis reumatoide en ratones mediante transferencia adoptiva de células T CD4+ de ratones SKG. Este sistema rápido y reproducible facilita el estudio de mecanismos inmunológicos y pruebas terapéuticas.

Un modelo adoptivo de transferencia de artritis reumatoide en ratones

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